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定量RT-PCR检测PBC患者外周血中颗粒溶素的基因表达水平

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的建立检测人颗粒溶素(granulysin,GNLY)mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并测定PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化(PBC,primarybiliary cirrhosis)发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建质粒pET28a-GNLY,作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。用此方法测定了60例PBC、60例乙型肝炎肝硬化及60例健康对照者外周血中GNLY mRNA的含量 ...
钱琤   +10 more
doaj  

[Comparison of BCR::ABL (P210) mRNA levels detected by dPCR and qPCR methods in patients with chronic myeloid leukemia]. [PDF]

open access: yesZhonghua Xue Ye Xue Za Zhi, 2023
Gao HL   +6 more
europepmc   +1 more source

荧光定量PCR与PP65抗原检测在诊断儿童巨细胞病毒活动性感染的比较

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和pp65抗原检测儿童人巨细胞病毒(HCMV)感染,并对其诊断HCMV活动性感染进行比较评估。方法分析924例HCMV血清学检测阳性的儿童的全血HCMV-DNA荧光定量PCR及HCMV-pp65抗原检测结果,与临床诊断的符合程度进行比较。结果全血HCMV-DNA荧光定量PCR和pp65抗原检测的一致率为81.17%,其标准误为0.39,Kappa值为0.60;PCR检测HCMV感染的灵敏度为98.4%,特异度为97.3%,Youden指数为0.957 ...
祝兴元   +4 more
doaj  

荧光定量PCR检测miRNA-155在过敏性皮肤病中的应用研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2015
目的建立荧光定量PCR技术检测外周血miRNA-155相对含量检测方法,研究过敏性皮肤病患者外周血miRNA-155表达量与正常对照组的差异。方法利用miRNA分离纯化盒提取外周血血浆中的miRNA,逆转录合成cDNA后,采用SYBR Green荧光染料法进行定量PCR检测40例荨麻疹患者、30例皮肤湿疹患者和30例健康对照组外周血中miRNA-155的表达含量。结果荨麻疹患者外周血中的miRNA-155的表达水平明显高于正常对照组 ...
李迎, 毕连红, 宋玉国
doaj  

定量RT-PCR测定冠心病患者外周血中Toll样受体4的基因表达水平

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2005
目的建立检测人Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并用来测定冠心病患者外周血单个核细胞(PBMCs)中TLR4的基因表达水平,探讨TLR4基因表达水平与冠状动脉粥样硬化发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建克隆载体pGEM-T-TLR4作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。在GeneAmp5700型检测仪上测定了50例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者和40名健康对照者外周血中TLR4mRNA的含量 ...
耿红莲   +6 more
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端粒酶逆转录酶启动子热点突变的ARMS-LNA-qPCR检测方法建立

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2020
目的建立一种定量检测端粒酶逆转录酶(TERT)启动子区-124bp(C/T)和-146bp(C/T)位点突变率的实时荧光定量PCR方法。方法以常规PCR扩增含有TERT热点突变位点的纯化产物作为检测标本,采用等位基因扩增阻滞原理(ARMS)的引物,并结合锁核酸(LNA)探针作为野生等位基因抑制子,建立实时荧光定量PCR的TERT启动子热点突变率检测方法(ARMS-LNA-qPCR)。在30例表观健康人确定检测下限。结果所建方法的突变率标准曲线为:-124bp(C/T)突变率%=10(0.262×ΔCt ...
张洁, 李方, 齐长海, 梁国威
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B族链球菌不同检测方法的效果评价

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2023
目的 分析质谱快速鉴定法、选择肉汤培养后涂平板法、实时荧光PCR法和胶体金免疫层析法在孕妇B群链球菌(GBS)定植筛查中的应用效果。方法 同时采用质谱快速鉴定法、选择肉汤培养后涂平板法、细菌培养法、实时荧光PCR法和胶体金免疫层析法对278例孕35-37周孕妇阴道下端或肛周拭子进行GBS筛查。以细菌培养法作为金标准方法,评价质谱快速鉴定法、选择肉汤培养后涂平板法、实时荧光PCR法和胶体金免疫层析法的诊断性实验性能。结果 细菌培养法阳性率9.4%,选择肉汤培养后涂平板培养法阳性率10.4 ...
周新荣   +4 more
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荧光定量PCR检测HBV DNA与血清HBV标志物和preS1相互关系研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2005
目的探讨荧光定量PCR法检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA与HBV血清免疫学标志(HBVM)模式,preS1之间的相互关系及临床意义。方法采用实时荧光定量PCR法(FQ-PCR)检测801例血清的HBVDNA,用ELISA方法对其免疫学标志,preS1同时进行检测。结果HBVDNA的总检出率为67·0%,preS1的总检出率为74·9%。其中,在模式HBsAg(+),HBeAg(+),HBcAb(+)中血清HBVDNA含量明显高于HBsAg(+),HBeAb(+),HcAb(+)及HBsAg ...
张峻梅   +4 more
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实时荧光定量PCR检测原发性肝癌中PRL-2基因的表达

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007
【目的】建立TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝细胞再生磷酸酯酶2(PRL-2)mRNA表达水平,并应用该法检测原发性肝细胞癌中PRL-2基因的表达。【方法】构建含PRL-2基因开放阅读框架的T载体.制作标准曲线。提取手术切除12例人肝癌、门静脉癌栓(PVTT)和癌旁组织总RNA并逆转录为cDNA。应用实时荧光定量PCR法观察人肝细胞癌组织和门静脉癌栓及癌旁组织中PRL-2的表达水平。【结果】线性检测范围达5个数量级,最低检测下限为1×10^2拷贝,最高检测上限为1×10 ...
程超   +4 more
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环尾狐猴源弓形虫的检测与鉴定

open access: yes野生动物学报, 2016
为了确定引起广东环尾狐猴(Lemur catta)呼吸困难、厌食和出血性肺炎症状的病原,从2只死亡的环尾狐猴体内无菌采集心肝肺肾组织样本。通过病原形态学观察,鉴定为弓形虫(Toxoplasma sp.)后,另外采集在狐猴笼舍出现的2只老鼠和1只猫4份组织样本。所有样本分别采用荧光定量PCR及一步法PCR技术进行弓形虫的检测与529 bp重复序列分析。以弓形虫B1基因片断为扩增对象的荧光定量PCR检测显示6份样本的CT为25.84~30.29,溶解曲线中均出现明显峰值,核酸定量峰值均大于阳性对照 ...
单 芬 李康信 徐春忠 陈 武 彭仕明 李婉萍 李国清
doaj  

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