The association between the antioxidant property and ROS system in murine corneal epithelial progenitor cells [PDF]
, 2016 目的：活性氧（ROS）是体内产生的一种高活性分子，低浓度可以调节细胞代谢，基因转录和磷酸酶的活性，高浓度则会导致氧化损伤。目前，有关干细胞自身特性的研究越来越受到学者们的重视，但既往文献中关于干细胞对氧化应激反应以及应激条件下细胞内相关酶活性的变化规律却很少报道。本课题聚焦于，在过氧化氢（H2O2）诱导的氧化应激条件下，活性氧生成关键因子NOX4和抗氧化酶核转录因子NRF2在小鼠角膜上皮祖细胞（TKE2）和成熟的小鼠角膜上皮细胞（MCE）中的不同作用及相关机制。 方法：利用小鼠角膜上皮祖细胞（TKE2 ...
周晶
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的探讨比较荧光定量RT-PCR、普通RT-PCR和细胞培养3种方法在流感病毒检测中的应用,从而确定每种方法各自的实用领域。方法通过荧光定量RT-PCR、普通RT-PCR和狗肾传代细胞（MDCK）培养3种方法检测398件流感样病例（ILI）咽拭子样本。比较3种方法的灵敏度和特异性。结果实时荧光RT-PCR检测阳性样本129件（阳性率为32.4%）;普通RT-PCR检测出阳性样本93件（阳性率为23.4%）;MDCK细胞培养法分离出流感病毒64株（阳性率为16.1%）。荧光定量RT-PCR的灵敏度达到0 ...
张巍巍, 张丽荣, 胡钰
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Cloning and expression patterns of stem cells induction-associated pluripotency factors in large yellow croaker Larimichthys crocea [PDF]
, 2016 通过iPSCs技术获得iPSCs，建立个体特异的多能干细胞系，可为生长发育、种质资源保护、疾病防治及药物筛选研究等提供宝贵的实验材料，是一条新的从根本上解决大黄鱼养殖中的各种难题的有效策略模式。其中，多能性因子对iPSCs技术的研究是必不可少的，它们在调控胚胎干细胞（ESCs）的自我更新和多能性、原始生殖细胞（PGCs）的形成、早期胚胎发育、生殖细胞发生、器官发生、再生及增殖、生长、分化、凋亡等细胞过程等方面发挥重要作用。然而关于大黄鱼多能性因子的研究尚属空白。本文采用SMART ...
姜永华
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人TIM-1和TIM-3 mRNA实时SYBR Green Ⅰ定量RT-PCR检测方法的建立
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的建立实时SYBR Green I定量RT-PCR检测人TIM-1和TIM-3mRNA的方法。方法从人外周血单个核细胞提取的总RNA中逆转录扩增人TIM-1和TIM-3的cDNA,将将纯化的人TIM-1和TIM-3的扩增产物分别与pMD18-T Simple载体进行连接,转化宿主菌DH5α,提取重组质粒DNA,PCR鉴定并测序分析。纯化质粒并检测260nm吸光值,确定重组质粒原液的拷贝浓度并以此制备荧光定量PCR梯度浓度标准品,进行实时荧光定量PCR实验。结果建立了TIM-1和TIM ...
陈治中 +3 more
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Cloning, Expression and Immunolocalization of Aspartyl Protease Inhibitor Gene of Angiostrongylus cantonensis [PDF]
, 2016 广州管圆线虫（Angiostrongyluscantonensis）是一种人畜共患自然疫源性寄生虫，能引起人的嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎，也被称为广州管圆线虫病。其中间宿主是软体动物，例如福寿螺、玛瑙螺等，并以啮齿类动物等作为其终宿主。人类是广州管圆线虫的偶然宿主，因误食寄生有广州管圆线虫的第三期幼虫（L3）的福寿螺等而引起广州管圆线虫病。 寄生虫的天冬氨酸蛋白酶抑制剂（aspartylproteaseinhibitor，API）在寄生虫的寄生生活中起着重要的作用，包括寄生虫的营养摄取，组织入侵，免疫逃避，
曹斌斌
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Enhancement of hypothalamic STAT3 acetylation by nuclear receptor Nur77 dictates leptin sensitivity [PDF]
, 2015 孤儿核受体Nur77（也称为TR3）是核受体家族NR4A的一员，在脂肪、肝脏和骨骼肌组织的代谢调控中发挥重要功能，因此被认为是一种新型的治疗代谢性疾病的药物靶点。本文研究中我们发现，在正常生理条件下，随着年龄的增长，Nur77基因敲除的小鼠体重明显高于野生型小鼠。摄食的增多和能量消耗的减少是Nur77基因敲除小鼠体重上升的直接原因。棕色脂肪组织耗能产热功能的衰退也促使了脂肪的积累。原位杂交和实时荧光定量PCR结果显示，Nur77能够正调控瘦素leptin下游厌食多肽POMC的表达。脑室内注射leptin，
肖倩
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实时荧光定量RT-PCR技术检测siRNA对HBV复制的干扰效果
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的运用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测小RNA分子（small interfering RNAs,siRNA）对乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）复制的抑制作用。方法在HepG2.2.15细胞内导入筛选的三条特异抗HBV的siRNA分子,用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测干扰后HBV的mRNA表达水平。结果导入特异siRNA分子的细胞中HBV的mRNA表达量明显降低。结论实时荧光定量RT-PCR技术能准确可靠的检测mRNA的表达水平 ...
陈小卫, 焦京, 周美娟, 丁振华
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Comparison of two highly expressed antimicrobial peptides Scygonadin and SCY2 in Scylla paramamosain gonads and their mechanism of reproductive immunology [PDF]
, 2013 拟穴青蟹(Scyllaparamamosain，以下简称青蟹)是我国南方最重要的海水养殖蟹类品种。近些年来，随着青蟹养殖规模的不断扩大，各种病害频繁发生引起养殖青蟹大量死亡，严重影响了我国青蟹养殖业的发展。青蟹以先天性免疫为主，抗菌肽是先天性免疫系统中重要免疫因子，对抵抗病原微生物感染发挥关键作用。 Scygonadin(SCY1)和SCY2是本实验室从雄性拟穴青蟹射精管中发现的两种新抗菌肽基因，前期研究已分别阐明了两种抗菌肽的基因组成与部分特性，并证明SCY1具有生殖免疫功能 ...
乔琨
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基于TaqMan探针的幽门螺杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的探讨基于TaqMan探针的幽门螺杆菌23SrDNA基因片段的实时荧光定量PCR检测的有效方法。方法根据幽门螺杆菌23SrDNA序列设计引物和探针,构建质粒标准品,建立实时荧光定量PCR体系并进行方法学评价,并对2012年5月至10月收集的100份临床样本进行检测同时应用免疫组化及银染方法进行比较分析。结果建立了检测23SrDNA的实时荧光定量PCR方法:107-102copies/ul范围内均有"S"型扩增曲线,最低检测浓度为102copies/ul,标准曲线相关系数为1 ...
石建玲 +6 more
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Transcriptome and Proteome Analysis During Larval Settlement and Metamorphosis in Fujian Oyster(Crassostrea angulata) [PDF]
, 2016 附着变态衔接浮游阶段与底栖阶段，是海洋无脊椎动物生活史的重要环节，附着变态过程涉及到复杂的生理过程和行为形态的改变，人们至今未能很好地阐释其中涉及到的分子机制。福建牡蛎（Crassostreaangulata）是我国南方主要的贝类养殖种之一，具有典型的附着变态过程。然而关于牡蛎附着变态过程的分子研究停留在个别基因的克隆和定量表达的研究，这并不能反映附着变态过程的多基因的调控网络。有大量的药理学研究表明肾上腺素能够诱导牡蛎幼体未经附着而直接变态，但是肾上腺素诱导的分子机制的研究至今空白。本研究采用转录组学、
肖小伙
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