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目的探索唐氏综合征(Down’s Syndrome)的快速诊断方法。方法采用细胞遗传学分析技术对35例唐氏综合征患者(包括4例羊水标本和31例外周血标本)进行核型分析。同时采用荧光定量PCR技术对35例唐氏综合征患者和371例正常对照(含32例羊水标本和339例外周血标本)21号染色体上的D21S11位点进行PCR扩增检测。其中对10例未培养的羊水细胞(4例唐氏综合征患者和6例正常对照)进行荧光原位杂交分析。将唐氏综合征患者的荧光定量PCR检测结果和荧光原位杂交检测结果与细胞遗传学分析结果进行比较 ...
尉庭华 +5 more
doaj
Sequencing and correlation analysis of miRNAome and transcriptome of Larimichthys crocea infected by Cryptocaryon irritans [PDF]
大黄鱼(LarimichthyscroceaRichardson,1846)曾是我国的传统四大海洋渔业对象之一,也是我国目前最主要的海水网箱养殖经济鱼类之一,2015年养殖年产量超过14万吨。近年来由于发展模式的制约,养殖管理的缺失,加之养殖环境的严重污染,大黄鱼养殖过程中的各种病毒性疾病,细菌疾病和寄生虫疾病日趋严重,其中以刺激隐核虫(Cryptocaryonirritans)病的危害最为严重。其所感染大黄鱼并导致继发性的细菌感染,造成养殖大黄鱼大面积死亡,对该养殖产业损失极大 ...
乔莹
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实时荧光定量RT-PCR检测siRNA表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA的表达
目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测小干扰RNA(siRNA)表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术。方法体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250 mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250 mRNA的表达情况。结果四条siRNA分别使G250 mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%
赵俊峰 +5 more
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Study on the microbial community structure, diversity and abundance in water-soil interface sediments on the watershed of three rivers [PDF]
为了探讨无机盐分、养分及有机质矿化作用对微生物群落结构、多样性和功能微生物丰度影响,河流水土界面微生物群落结构和碳、氮、硫循环功能微生物种群的演替规律,本论文以九龙江、闽江和瓯江三江流域作为研究区域,并增加温室培养实验,对其中水土界面沉积物样品中的理化参数、微生物群落、多样性和功能微生物丰度进行测定;采用基因文库构建技术、变性梯度凝胶电泳技术(DGGE)和illumina高通量测序技术分析了样品中微生物群落结构及活动规律;利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术对功能微生物进行定量 ...
李虎
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为探究低温条件下东北林蛙(Rana dybowskii)肝脏中GSK3β基因表达量变化,需利用荧光定量PCR(Fluorescence quantitative real-time PCR)对GSK3β基因表达量进行检测,而在此过程中PCR引物的筛选直接影响到检测结果数据的准确性与真实性。本实验以东北林蛙为实验对象,基于本研究组前期获得的东北林蛙转录组数据库,并参考其他物种GSK3β基因,利用Beacon Designer 7软件设计了6对引物,采用逆转录PCR和实时荧光定量PCR技术 ...
张 宇 巩珊珊 柴龙会 张晶钰 肖向红
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Detection of MTAP Protein and Gene Expression in Non-small Cell Lung Cancer [PDF]
Background and objective The abnormal expression of MTAP, a tumor suppressor gene, is found in a variety of tumor tissues. The aim of this study is to detect the expression of MTAP mRNA protein and the clinical significance for the therapy of non-small ...
Baoqing DING +3 more
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目的体外构建DNA氧化损伤模型,荧光实时定量PCR检测线粒体DNA氧化损伤。方法体外应用亚甲蓝联合可见光(MBL)方法建立DNA氧化损伤模型,通过8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)特异性切割氧化损伤位点8-羟基鸟嘌呤(8-oxoG),运用荧光实时定量PCR法检测不同比例混匀的OGG1酶切与未酶切的DNA氧化损伤模板。结果成功构建体外氧化损伤DNA模型,OGG1酶能特异切割氧化损伤位点;OGG1酶切DNA在定量PCR体系模板中所占比例,与线粒体DNA编码基因COⅡ扩增Ct值呈正相关 ...
孙玉 +6 more
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The Role and Mechanism of MicroRNA-219 in Epileptogenesis [PDF]
目的:通过海人酸、匹罗卡品诱导C57BL/6、ICR小鼠癫痫持续状态发作,制造人类颞叶癫痫动物模型,探讨microRNA-219在癫痫发病中的功能通路及调控网络的动态变化,为癫痫的诊断提供新的依据,为抗痫药物研制提示新的作用靶点。 方法:用成年雄性C57BL/6、ICR小鼠为研究对象,侧脑室注射海人酸(Kainicacid,KA)或腹腔注射匹罗卡品诱发小鼠癫痫发作,建立小鼠癫痫动物模型。24小时后检测小鼠皮质脑电图改变并运用荧光定量PCR方法检测小鼠海马和皮质中microRNA-219表达变化情况 ...
唐荣
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甲型肝炎病毒和戊型肝炎病毒双重荧光定量PCR方法的建立及应用
目的建立甲型肝炎病毒(HAV)和戊型肝炎病毒(HEV)的双重荧光定量PCR检测方法并应用于临床样本的检测。方法根据参考文献分别选取HAV以及HEV基因组的保守区域设计合成特异性引物和探针,从而建立并优化双重荧光定量PCR反应体系,之后评价反应体系的特异性、敏感性和稳定性。结果本研究建立的HAV和HEV双重荧光定量PCR技术应用于检测HAV核酸时检测极限可以达到1个拷贝/反应,对同一样品重复测定5次获得的Ct值的变异系数(CV)最大为1.5%,同时该体系检测HEV的最低检测极限也达到10个拷贝/反应 ...
张磊, 鲁淑婷, 李玉龙, 黄洲风
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Comparative proteomic analysis reveals cold acclimation enhances the cold tolerance in mangrove plant Sonneratia apetala [PDF]
低温是一种重要的非生物胁迫因子,对植物的产量、分布具有重要的影响,特别是对生长、发育起着至关重要的作用。无瓣海桑(Sonneratiaapetala)是一种重要的红树植物,自1985年从孟加拉国引入中国后,以其生长迅速、树体高大、结实率高、在抵御护花米草入侵中发挥重要作用等特点迅速成为红树林湿地生态恢复中的理想树种。但无瓣海桑对低温较敏感,不耐寒,因此温度成为其生长和分布的重要限制因子之一。本论文研究经低温驯化和未经低温驯化无瓣海桑响应寒害的生理变化以及差异表达蛋白特性,阐明无瓣海桑的可能耐寒机理 ...
罗美蓉
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