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实时荧光定量PCR检测血清miR-7方法的建立及临床初步应用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2016 目的建立ploy（A）聚合酶加尾的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测血清miR-7,并作临床初步应用。方法用Trizol试剂提取血清总RNA。miR-7ploy（A）聚合酶加尾逆转录获得cDNA,进行SYBR Green Ⅰ实时定量PCR扩增检测。制作C.elegans-miR-39模拟物浓度梯度稀释的标准曲线,绝对定量血清中miR-7的表达水平。结果该方法能定量检测血清miR-7表达水平,熔解曲线呈单峰,PCR扩增产物特异,在103copies/uL至106copies ...
陈鑫 +5 more
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Haiyang yu huzhao为更好地保护和开发光唇鱼(Acrossocheilus fasciatus)资源，进行了光唇鱼卵原干细胞提取、冻存和移植研究。结果显示，光唇鱼卵原干细胞呈椭圆形，长径和短径分别为(16.52±0.87) µm、(10.66±0.87) µm。低温冻存光唇鱼卵巢时以10%的DMSO作为保护剂效果最好，从冻存卵巢中提取卵原干细胞的效率可达新鲜卵巢的42.22%±1.02%。以孵化出膜3日龄斑马鱼仔鱼为受体，将提取的光唇鱼卵原干细胞用PKH26荧光染料标记后移植入受体鱼腹腔。荧光显微镜观察显示，移植后1~5 ...
王 宏艳 +7 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】探讨种植前基因诊断的临床应用。【方法】对1 例夫妇均为东南亚缺失型α-地中海贫血携带者, 经超排 取卵、卵母细胞单精子显微注射受精及胚胎细胞活检, 吸取的单个卵裂球采用针对α-SEA 基因的gap-PCR 引物和荧光探针用 荧光定量PCR 技术进行诊断, 将诊断为不致病的3 个胚胎进行宫腔内移植。【结果】胚胎移植后7 周B 超诊断单胎妊娠, 18 周羊膜腔穿刺产前诊断证实为不致病胎儿。【结论】应用成熟的显微操作技术进行胚胎细胞活检, 活检的单个卵裂球用荧光 定量PCR 技术进行诊断 ...
李晓红
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2002 目的 在Light-CyclePCR仪上对多药耐药基因 （MDR1）定量的技术方法和临床应用进行探讨。方法 应用荧光定量逆转录 -多聚酶链反应 （RT -PCR）检测了 30例急性白血病患者和 8例正常人外周血MDR1基因的表达。结果 该实验方法标准曲线线性良好 （r=1.0 ） ,耐药组MDR1基因拷贝数与非耐药组有显著性差异 （P
穆会君, 谢平
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野生动物学报, 2010 为建立SYBR Green I实时荧光PCR检测鉴定狮（Panthera Leo）制品的方法,本文在豹属动物线粒体细胞色素b基因上设计狮特异性引物,建立并优化了SYBR Green I实时荧光PCR检测鉴定体系,采用17种血液、组织和骨粉类样品的DNA,通过扩增曲线和融解曲线分析检测的特异性和灵敏度,并用狮肉粉和牛肉骨粉系列百分比混合物进行抗干扰能力分析。结果显示,狮血液和组织DNA样品均出现特异性的实时扩增曲线,平均熔解温度在84±0.2℃。虎、豹、熊等14种哺乳动物DNA样本的检测结果均为阴性 ...
徐君怡 +3 more
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MiR-192/-215靶向BIVM基因调控胃癌细胞生物学功能
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2018 ： 【目的】研究miR-192/-215通过靶基因BIVM调控人胃癌发生发展的机制。【方法】首先利用靶基因 预测网站、基因芯片、实时荧光定量PCR技术筛选出miR-192/-215的靶基因BIVM，然后构建双荧光素酶报告 质粒，验证BIVM为miR-192/-215靶基因。随后通过转染BIVM-siRNA干扰BIVM表达后，检测其对胃癌细胞增 殖、凋亡的作用。8只裸鼠随机分为BIVM-siRNA实验组和NSC-siRNA对照组，将转染BIVM-siRNA的胃癌细胞 种植于裸鼠皮下 ...
林慧娟 +5 more
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Syndecan1慢病毒干涉质粒的构建及其对舌鳞癌CAL27细胞增殖的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2015 目的探讨RNA干扰Syndecan1基因对舌鳞癌CAL27细胞增殖的影响,阐明其作用机制。方法构建靶向基因Syndecan1的siRNA载体重组质粒pDSL-hpUGIP-Syndecan1-1834、pDSL-hpUGIP-Syndecan1-1588、pDSLhpUGIP-Syndecan1-544作为RNA干扰质粒组,同时设立阴性对照质粒组(pDSL-hpUGIP-control siRNA质粒);采用荧光定量PCR检测Syndecan1mRNA的表达水平和表达抑制率 ...
王晓峰, 孔晨飞, 王伟, 张天夫
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2015 目的真菌感染发病率和死亡率逐年增高,亟需建立主要病原真菌快速、敏感、特异的鉴定方法,对感染的早期诊治至关重要。方法以真菌线粒体COⅡ基因为靶标,设计白假丝酵母的特异性引物,建立荧光定量PCR鉴定方法,分析其灵敏度、特异性及重复性。结果该方法检测的灵敏度可达1×102copies/μl（相当于10-7 ng/μl）,熔解曲线显示具有单一峰,且仅有白假丝酵母出现扩增曲线,其他种、属真菌均未见扩增。且具有较好的重复性和稳定性。结论建立的白假丝酵母荧光定量PCR鉴定方法灵敏度高、特异性强、重复性和稳定性好 ...
许凡凡 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 本文通过荧光定量逆转录-聚合酶链反应（FQ-RT-PCR）,检测β-hCG-mRNA,建立在外周血中检出滋养细胞方法,推测妊娠肿瘤患者外周血中滋养细胞的含量,为肿瘤的发展转移做预防。
兰晶
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应用荧光PCR技术检测6500例患者血清HBV DNA的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2002 目的 揭示血清乙肝病毒标志物 （HBVM）与血清HBVDNA含量相关性。方法 采用ELISA法对血清、HB VM进行检测 ;对HBVM阳性 6 5 0 0例患者血清采用荧光PCR法定量检测HBVDNA。结果 在HBVM阳性的 6 5 0 0例血清中 ,有 3982例占 6 1 3% ,HBVM标志物阳性者血清均有HBVDNA阳性。血清HBsAg、HBeAg、抗 HBc阳性者HBVDNA阳性率占 96 9% ,大于 10 6copies/ml者占 72 1% ,HBsAg、抗 HBe、抗 ...
高俊芬 +4 more
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