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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的了解HBV感染的不同血清学指标组合的HBV-DNA阳性情况。方法用荧光定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验（ELISA）分别检测1531份乙型肝炎患者和健康体检者血清的HBV-DNA和HBV血清标志物（HBV-M）。结果1组（HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性）、2组（HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性）、3组HBsAg阳性的患者HBV-DNA的阳性率分别为99.5%、57.1%、15.4%,其拷贝数分别为1.14×108/ml,1.43×106/ml,6.64×104/ml ...
王建东, 赵凤桐, 崔吉, 夏薇
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的利用荧光定量PCR检测健康育龄妇女阴道中的主要乳酸杆菌,并比较不同季节阴道乳酸杆菌分离率及数量的差异。方法分别在春夏季、秋冬季采集健康妇女阴道分泌物标本97例（春夏季63例、秋冬季34例）,应用SYBR GreenI荧光定量PCR方法测定标本中5种乳酸杆菌16SrRNA基因拷贝数量并比较两组间的差异。结果健康妇女阴道乳酸杆菌的分离率达到96.9%,其中卷曲乳酸杆菌分离率66.0%、惰性乳酸杆菌45.4%。健康妇女阴道乳酸杆菌数量（Log10 copies/ml）为6.21±1.28 ...
彭国丽, 吕治, 苏建荣
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长链非编码RNA XIST海绵miR-34通过Wnt/β-catenin信号通路促进结肠癌进展的机制
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的探讨长链非编码RNA XIST海绵miR-34促进结肠癌进展的机制;方法以人类结肠癌组织和相应的非肿瘤组织为研究对象,对人结肠癌细胞系(SW480,HCT116与HT29)和正常结肠上皮细胞系NCM460进行培养和转染,分别对细胞增殖能力、菌落形成能力、细胞迁移能力进行测定,利用qRT-PCR对mRNA表达量进行测定;荧光素酶报告分析实验检测荧光素酶活性;通过Western blotting分析对细胞捏蛋白表达量进行测定;利用动物实验进行皮下异种移植,测定肿瘤重量。结果 ...
洪森, 李世权, 刘涛, 康振华
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荧光定量PCR检测大肠癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA的意义
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的探讨荧光定量PCR技术检测大肠癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA的临床意义。方法采用荧光定量PCR技术,检测大肠癌患者76例,健康志愿者30例外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA水平。结果76例大肠癌患者外周血CK19mRNA的水平为5 962.5±19 926.1 copies/ml,其中38例阳性,阳性率为50.0%;CK20mRNA的水平为6 244.3±15 113.1 copies/ml,其中28例阳性,阳性率为36.8 ...
李招云 +3 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2014 目的建立大鼠左颈总动脉与左侧颈外静脉吻合分流性肺动脉高压模型。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为三组:吻合组（A组,n=15）,结扎组（B组,n=15）,正常组（C组,n=15）。饲养3月后测定血流动力学指标,右心室/左心室+室间隔质量比,肺组织切片病理变化,ELISA方法测定血浆ET-1浓度,荧光定量PCR测定肺组织表达内皮素-1mRNA的变化。结果与B,C两组相比,A组:右心室收缩压力明显升高,血清内皮素-1水平升高,荧光定量PCR结果显示A组内皮素-1mRNA的相对表达量是B组的2.601倍 ...
赵科研 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的探讨荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸（HBV-DNA）时核酸提取体系中加入样本量的不同和不同反应体系对检测结果的影响。方法选取乙肝检测患者DNA定量结果为低拷贝数（10-103copies/ml）和高拷贝数（105-107copies/ml）样本各10例,分别按2种核酸提取体系及2种反应体系分为4组进行HBV-DNA荧光定量PCR检测。结果 10例低拷贝数样本减少反应体系后只有3例检出有反应,由于反应体系的减小造成结果存在明显差异 ...
郭楠 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的构建携带人肝癌细胞CDK2基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体;方法设计能表达CDK2特异性的小干扰RNA(siRNA),构建pAKD-shRNA-CDK2重组质粒,采用磷酸钙共转染法将重组质粒pAKD-shRNACDK2、包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共转染AAV-293细胞,采用定量PCR方法对病毒进行滴度测定;结果三质粒共转染AAV-293细胞48h后,荧光显微镜下检测到GFP绿色荧光,表明共转染成功,测定病毒平均滴度为3.56×1012v.g/ml ...
于水澜, 姜颖, 于英君, 宋高臣
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】探讨采用荧光定量PCR 技术检测脑源性神经营养因子(BDNF)基因转染细胞(PcDNA3.1(+)/BDNF/ CHO)中BDNF 的拷贝数。【方法】分别以同等质量的PcDNA3.1(+)/BDNF/CHO , PcDNA3.1(+)/CHO(空载体转染细胞) 及CHO 细胞的DNA 为模板, 在PE5700PCR 仪上进行荧光定量PCR 分析。每个样本共检测30 次, 结果采用q 检验分析。 【结果】PcDNA3.1(+)/ BDNF/CHO 细胞、PcDNA3.1(+)/ CHO ...
李 影 +3 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2018 ： 【目的】构建PET28a-TAT-RabGEF1重组质粒载体，在E.coli Rosetta（DE3）菌株中高效表达并纯化融合 蛋白，研究TAT-RabGEF1融合蛋白对肥大细胞的跨膜转导活性。【方法】以小鼠组织cDNA为模板，设计上游和下游 含有限制性酶切位点和TAT序列的引物，PCR扩增目的片段TAT-RabGEF1，并通过双酶切构建PET28a-TAT-Rab?
方虹仪, 邢纪斌, 罗晨芳
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的确定低剂量力达霉素可诱导小鼠胚胎癌P19细胞分化,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养P19细胞,分别加入力达霉素和维甲酸（retinoiacid,RA）,观察细胞形态,并分别行PCR和免疫荧光染色检测巢蛋白（Nestin）和微管相关蛋白2（MAP2）的表达。Western blot检测低剂量力达霉素和维甲酸处理该细胞后Oct4的表达。分别用慢病毒Oct4和si-Oct4感染P19细胞,使其过表达和下调Oct4,观察细胞形态,并行PCR和免疫荧光染色观察Nestin和MAP2的变化。结果 ...
周娟 +5 more
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