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双向凝胶电泳-飞行时问质谱法分析促癌剂TPA诱导NIH3T3细胞表达变化的蛋白质
【目的】寻找并鉴定在TPA处理后小鼠成纤维细胞NIH3T3中表达发生变化的蛋白质,为阐明TPA 在诱导细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。(方法l用TPA刺激NIH3T3细胞,分别提取实验组和对照组 的NIH3T3细胞的总蛋白质,通过聚丙烯酰胺凝胶双向电泳,硝酸银染色后用软件分析寻找差异表达的蛋白质, 并对差异蛋白质进行质谱鉴定。(结果l软件分析显示TPA处理后的NIH3T3细胞中有明显的差异表达蛋白质, 质谱鉴定表明TPA处理后,表达上调的蛋白质有线粒体基质蛋白Pl前体、微管蛋白beta-5链 ...
江培洲
doaj
采用微流道反应器系统,优化甲胎蛋白单克隆抗体浓度,并装配在醛基改性后的硅片表面上,经牛血清白蛋白封闭后形成检测AFP芯片阵列。通过制作AFP浓度梯度标准曲线标定光学蛋白质芯片,实现肿瘤标志物AFP的检测,结果表明,该方法的最低测定浓度可以达到1.0ng/mL,变异系数为3.1%,回收率在94.4 105.0%之间,与人纤维蛋白原的交叉反应率≤0.25%、与1%葡萄糖≤0.08%、与人源IgG≤0.16%和与人血清白蛋白≤0.20%,说明光学蛋白质芯片技术检测AFP,灵敏度高、重复性好、操作简便 ...
靳刚, 陈艳艳, 黄承洪
core
纳米材料在进入生物系统后会与生物系统中的蛋白质发生相互作用形成蛋白质环冠,从而使纳米材料的生物识别性质发生改变,引起细胞或生物体的不同生理反应。本论文的研究工作主要致力于以生物质谱为基础的针对纳米材料与蛋白质相互作用的蛋白质组学新技术和新方法及纳米材料上蛋白质环冠的研究。针对Fe3O4纳米材料表面蛋白质环冠的形成问题,以蛋白质组学方法对三种不同粒径Fe3O4纳米粒子的表面血浆蛋白质环冠进行了研究,发现粒径大小对于Fe3O4纳米粒子表面吸附的血浆蛋白质的种类和丰度均具有非常重要的影响 ...
胡争艳
core
目的初步分析胶质瘤细胞分泌的exosome蛋白组成,探讨胶质瘤来源exosome的潜在免疫调节功能,从而为进一步利用exosome对胶质瘤进行免疫治疗提供理论依据。方法采用差速离心法从U251胶质瘤细胞培养上清液和Ⅲ级星形胶质瘤囊液中分别提纯exosome,用透射电镜鉴定;利用二维电泳分离、分析exosome内蛋白质,并用质谱技术鉴定了部分蛋白质。结果胶质瘤细胞可以产生exosome,其平均直径约100 nm。二维电泳图显示U251细胞分泌的exosome含有270个蛋白点,与数据库相符的有66个 ...
金铮 +4 more
doaj
静电相互作用对纤维蛋白质原在金表面吸附的影响及牛血清蛋白质与胶原蛋白质竞争吸附的AFM研究
固体表面的性质对蛋白质的吸附具有很大的影响作用,蛋白质在固体表面的吸附可分为共价吸附和非共价吸附.非共价吸附主要包括氢键、疏水力和静电力三种相互作用.其中静电相互作用对蛋白质吸附的影响仍未有一致的看法.该文将椭偏显微成像系统与电化学方法联用来研究静电相互作用在蛋白质吸附中的影响.在0.1MKHPO-NaHPO(pH=7.80)溶液中,金膜表面零电荷电势(PZC)在-0.60V(vs.SCE)左右.开路电位为+0.10V(vs.SCE),大于零电荷电势(PZC),说明金膜表面带正电荷 ...
于泳
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【目的】 建立适于人表皮组织的双向电泳技术,并应用质谱技术对人表皮组织蛋白质组进行初步分析?【方法】 利用组织匀浆法制备人表皮组织总蛋白?固相pH 梯度胶条进行双向电泳?PDQuest 7.4软件比较和分析电泳图谱,利用质谱技术鉴定部分蛋白斑点?【结果】 成功建立了适用于人表皮组织蛋白质组分析的双向电泳技术,获得和比较了人表皮组织双向电泳四种染色图谱?人表皮组织的蛋白质在pH5~8范围内分布均匀,分子量集中在15~100 ku之间?银染图谱获得的蛋白斑点数为586±14 ...
聂燕芳 +4 more
doaj
蛋白质芯片是一种新型的蛋白质分析技术,具有平行、快速、自动化检测、识别或纯化多元蛋白质的功能,在蛋白质功能分析、医学诊断,药物筛选和生物工业具有潜在的广泛应用前景。本文仅简要地介绍目前已经发展起来的几项有代表性的蛋白质芯片技术。
靳刚
core
在过去的几十年中,诊断医学有明显的进展。蛋白质组学和基因组学的发展,增进了人们对疾病的了解。这些领域揭示了各种疾病过程中蛋白质序列的显著性差异。检测在某些疾病中特定表达的蛋白质可以作为诊断或预后评价的指标。另外,通过检测与蛋白质相关的配体对蛋白质结构和功能的改变也可以作为诊断或预后评价的方法。电子自旋共振(EPR ...
刘忠超 +6 more
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