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【目的】应用二维电泳和质谱对正常人眼小梁组织蛋白质组的进行初步分析。【方法】采用二维凝胶电泳对正常人眼小梁组织进行蛋白分离和图像分析。分别用(7 cm×8 cm、13 cm×16 cm、18 cm×16 cm)3 种不同尺寸大小凝胶分离蛋白, 并结合基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析及数据库搜索从而鉴定部分蛋白质斑点。【结果】建立小梁组织蛋白样品处理及二维凝胶电泳的实验条件及方法, 获得正常人眼小梁组织二维凝胶电泳蛋白图谱。3 种不同尺寸大小凝胶的蛋白质分离斑点数分别为 230 个、875 个 ...
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蛋白质组学已成为后基因组时代的重要研究主题。近年来,色谱微分离技术和质谱鉴定技术的发展加快了蛋白质组的研究进程,有望成为蛋白质组研究的主流技术之一。因此,本文致力于构建新型蛋白质微分离与鉴定平台,为蛋白质组研究提供高效、高速、高通量的蛋白质分析工具。 发展并完善了色谱微分离与质谱鉴定联用的接口技术。设计了一种微型多通道电喷雾离子源,实现了多种微分离模式与质谱的联用,扩展了质谱的应用。利用氢氟酸刻蚀技术,制作了纳升级流量的质谱接口,将质谱的检测灵敏度提高了3倍以上。在此基础上 ...
段继诚
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磷脂在蛋白质乳液中的作用研究进展Research progress on the role of phospholipids in protein-based emulsions
蛋白质作为天然乳化剂对环境变化敏感,磷脂与蛋白质的相互作用可降低蛋白质对环境变化的敏感性。旨在为利用蛋白质、磷脂的优势共同提高乳液的稳定性,拓宽乳液工业应用提供参考,综述了不同蛋白与不同磷脂的相互作用、蛋白质与磷脂相互作用的影响因素以及蛋白质-磷脂复合乳液的应用。磷脂与蛋白质之间通过疏水相互作用使蛋白质乳液表现出更强的稳定性。蛋白质与磷脂相互作用的影响因素有磷脂与蛋白的比例、pH、温度、盐浓度和制备乳液所使用的物理手段(如高压、超声)。蛋白质-磷脂复合乳液可用于递送生物活性物质、制备低脂食品和人工乳 ...
李雪阳1,邹依彤1,涂向辉1,祁冰洁1,刘新2, 杨庆余1,王丽娟1 " LI Xueyang1, ZOU Yitong1, TU Xianghui1, QI Bingjie1, LIU Xin2 , YANG Qingyu1,WANG Lijuan1"
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本发明涉及S期激酶相关蛋白1(S-PHASE KINASE-ASSOCIATED PROTEIN1,SKP1);具体地说是真核生物(烟草)中普遍存在的一类蛋白,是泛素连接酶3SCF复合体的核心亚单位,与烟草的抗病毒活性相关,分子量为17527.78Da,等电点4.57,定位于细胞质,其Skp1结构域位于4-105 位氨基酸。本发明对生物农药的应用具有明显指导作用;该基因的克隆对于揭示壳寡糖诱导植物抗性反应的分子信号通路很有价值,并在寡糖生物农药的应用方面具有重要的理论指导意义 ...
杜昱光, 张付云, 白雪芳
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哮喘是一种常见慢性炎症性疾病,其发病率有逐年上升的趋势。由于病因复杂,表型多样,多年来单纯从基因方面研究并没有取得哮喘诊治方面的突破。基因是源头,真正发挥功能的是蛋白质。一般来说,机体在出现病理变化之前,体内的蛋白质在成分和量方面都会发生相应改变,因此,以研究疾病相关蛋白的蛋白质组学应运而生。通过蛋白质组学技术揭示哮喘病理状态下异常表达的蛋白质以及疾病不同时期的蛋白变化水平,可以筛选出与哮喘相关的蛋白标志物,特别是可能发现以往从未被与哮喘相关联的新蛋白,从而有助于哮喘的诊断 ...
卢洪华, 李艳春, 华树成
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在组学水平上对中国传统动物药—鹿茸进行研究对于揭示鹿茸快速生长和凋亡的机理具有重要意义。本论文基于蛋白质组学技术,研究了鹿茸蛋白质提取方法、不同生长时期差异蛋白质和对上皮细胞的促增殖作用。发展了一种基于五种不同蛋白质提取液的鹿茸蛋白质平行提取方法,并采用基于串联 柱的微柱反相色谱-电喷雾串级质谱对酶解产物进行了分析。结果表明:五种蛋白质提取液提取的蛋白质之间具有互补性;共计鉴定得到了416 个蛋白质,其中有14 个和7 个蛋白质分别与生长和骨化相关。 采用RPLC-ESI-MS/MS ...
高亮
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运用蛋白质组学技术研究结肠粘膜、腺瘤及腺癌组织蛋白的差异表达
[目的]通过比较结肠正常粘膜、腺瘤、腺癌组织之间的蛋白质组表达差异,寻找结肠腺癌相关的蛋白质,筛选结肠癌早期诊断的分子标志物。[方法]运用比较蛋白质组学技术,对8例结肠癌患者(伴有腺瘤)的正常粘膜、腺瘤、腺癌组织提取的总蛋白进行双向电泳(2-D),分析凝胶图片选择两两间差异表达超过2倍的蛋白质进行MALDI-TOF/TOF质谱分析和生物学信息分析。[结果]成功建立结肠正常粘膜、腺瘤、腺癌的双向凝胶电泳图谱,在凝胶电泳图谱中平均蛋白质斑点数分别为3066 、2986和3289 ...
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目的比较大鼠血清样本的4种制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)分离效果的影响。方法分别用直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理大鼠血清样本,双向电泳分离血清蛋白;硝酸银染色;image master5.0软件分析所得蛋白质斑点。结果对直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理的大鼠血清样本进行双向电泳分离,经3次重复性检测,凝胶的平均蛋白质点数分别为610±54,683±46,735±42和865 ...
张彬, 谭岩
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目的探讨卵巢浆液性囊腺癌与卵巢浆液性囊腺瘤的差异表达蛋白质谱,从而寻找特异性诊断标志物。方法采用二维液质联用分析技术。结果卵巢浆液性囊腺癌与卵巢浆液性囊腺瘤两组间差异蛋白数共计128个。其中116个蛋白在卵巢浆液性囊腺癌中表达上调,12个蛋白表达下调。结论纤维结合蛋白1,基膜聚糖,核心蛋白多糖,骨诱导因子,微管蛋白A、B,肌动蛋白,肌动蛋白素,角蛋白8,结蛋白,膜联蛋白A1、A2,YWHAZ,踝蛋白1,转酮醇酶1,组织蛋白酶D,X线交错互补修复基因6,谷胱甘肽转移酶,核仁蛋白,抑制素,抗原提呈蛋白1 ...
刘彦红 +4 more
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