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目的 探讨转录因子E2F3在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达及临床意义。方法 在癌症基因组图谱(TCGA)数据库及基因表达数据库(GEO)中分析E2F家族成员在EOC组织与正常组织中的表达差异及临床意义,同时借助生物信息数据库预测E2F3的转录调控靶点。应用RT-qPCR和Western blot检测EOC及对照组中转录因子E2F3及其靶基因的mRNA及蛋白表达水平。结果 TCGA数据信息结合GEO测序结果提示,与对照组相比在EOC中E2F1、E2F3呈现显著高表达 ...
张晶, 孔丽丽
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脂肪来源间充质干细胞调控原发免疫性血小板减少症小鼠Th细胞因子失衡
目的探讨脂肪来源的间充质干细胞(AMSCs)对原发免疫性血小板减少症(ITP)小鼠Th细胞因子失衡免疫调节变化及其特异性转录因子T盒子转录因子/ GATA结合蛋白3(T-bet/GATA-3)的影响,并初步探讨其相关机制。方法选取人来源健康脂肪组织,分离培养AMSCs,观察生长形态和干细胞鉴定,选取增长稳定的传代AMSCs;将30只BALB/c小鼠随机分为正常对照组(Normal组)、ITP对照组(ITP/PBS组)及ITP实验组(ITP/AMSC组)并进行相应的处理 ...
肖建红, 张阳春
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目的 探讨动脉源性栓子与心源性栓子的转录基因差异,以期确定潜在诊断性生物标志物的种类。方法收集12例动脉源性栓子和14例心源性栓子并随机各自分成3组进行总RNA提取,采用高通量转录组学检测动脉源性栓子和心源性栓子的转录组、筛选和确定差异表达基因和转录本并进行GO和KEGG途径分析,CPAT和rMATS分别完成新转录本编码能力预测和可变剪切事件检测。结果 动脉源性栓子和心源性栓子分别鉴定出11080个和10658个基因、24759个和24166个转录本。两组栓子相比 ...
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霍乱弧菌新发菌株中
目的探索霍乱弧菌新发菌株H1的六型分泌系统(T6SS)存在的转录调控机制。方法本研究以转录组测序为基础,分析H1株分别由于vipA敲除(H1ΔvipA),vipB敲除(H1ΔvipB)和clpV敲除(H1ΔclpV)时T6SS基因簇的转录水平,并对其差异基因进行了基因本体论(GO)富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集。结果发现H1ΔvipA有22个差异基因(FDR<0.01,|log2FC|≥1),其中有18个属于T6SS基因簇;并且除vipA外,其转录水平均呈上升趋势 ...
吴文轩, 郭扬, 张幸鼎, 赵文婧
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正常乳腺组织和浸润性乳腺癌组织中淋巴增强因子-1(LEF-1)转录因子的蛋白质表达水平的分析
目的通过实验对正常乳腺组织和浸润性乳腺癌组织中淋巴增强因子-1(LEF-1)转录因子的蛋白质表达水平进行分析,观察其差异。方法对从手术获得的新鲜乳腺组织做冰冻切片,经H&E染色分析鉴定出正常乳腺组织和乳腺浸润癌组织。用显微切割方法获取目标组织,再采用蛋白质免疫印迹法(Westen blot)检测正常乳腺组织和乳腺浸润癌组织中LEF-1转录因子的蛋白质表达差异。结果乳腺浸润癌组织中的LEF-1转录因子的蛋白质表达水平高于正常乳腺组织中的LEF-1转录因子的蛋白质表达水平。结论LEF ...
盖晋宏 +5 more
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pSiRNA-Shh逆转录病毒载体的构建及对恶性脑胶质瘤细胞作用的离体实验研究
目的建立逆转录病毒介导的人Shh基因RNA干扰体外表达体系并观察对恶性脑胶质瘤细胞的作用。方法将人Shh基因RNA干扰双链转录DNA片段重组到逆转录病毒质粒Psilencer 5.1-H1 Retro中,构建成携带人Shh基因RNA干扰逆转录病毒载体pSiRNA-Shh,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染恶性脑胶质瘤细胞株U251和CHG-5细胞,用WST-8、RT-PCR和Western Blotting分别检测对转染细胞活性、人Shh mRNA和蛋白表达的影响。结果重组pSiRNA ...
尹昌林 +5 more
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RNA-Mediated Transposable Elements in Insects(昆虫中RNA介导的转座因子)
在昆虫中编码反转录酶的转座因子分为二大类:含长末端重复(LTRs)和不含长末端重复的转座因子.LTRs反转录转座子是具有两侧长正向重复末端序列的片段,中间部分序列包括一个或一个以上的ORFs(开放性阅读框架),其编码转座因子复制和转座所必需的蛋白质;包括Gypsy-Ty3家族、Copia-Ty1家族和Pao因子等.不含长末端重复的转座因子有时称为反转座子,能编码反转录酶但缺乏整合酶;包括I、F、G、Jockey、Doc和Het-A等因子.本文简介了有关昆虫基因组中转座因子的主要家族及近年来的研究概况.
WangJinfu(王金福)
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目的制备YWHAZ重组腺病毒及逆转录病毒,在293T细胞中验证基因表达情况。方法将YWHAZ基因分别克隆至腺病毒穿梭质粒pacAd5CMV-IRES-GFP及逆转录病毒质粒pLXSN-IRES-GFP,并用酶切鉴定、PCR及测序验证后分别转染至HEK 293T及Ampho293细胞,构建重组腺病毒及逆转录病毒。重组病毒分别感染293T细胞,观察荧光验证病毒侵染效果,RT-PCR检测YWHAZ基因表达情况。结果 PCR、酶切鉴定及测序分析,重组腺病毒及逆转录病毒构建正确 ...
王雅雯, 于宏, 王世宝, 黄映辉
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肿瘤坏死因子-α和血浆纤溶酶原激活抑制物-1与动脉粥硬化相关性研究
目的探讨脂肪组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血浆纤溶酶原激活抑制物-1(PAI-1)mRNA转录量和蛋白表达量与动脉粥样硬化的相关性,从而揭示脂肪组织中TNF-α、PAI-1用于动脉粥样硬化分型的临床价值。方法选取60例动脉粥样硬化患者,按照病灶类型分为A组(I型病灶)、B组(Ⅱ型病灶)、C组(Ⅲ型病灶)、D组(Ⅳ型病灶)、E组(V型病灶)和F组(Ⅵ型病灶)。使用RT-PCR检测6组患者脂肪组织中TNF-α、PAI-1mRNA转录量(以β-actin为内参),使用Western ...
林红
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【目的】构建反义c-myb 重组逆转录病毒载体并建立其包装细胞株。【方法】采用RT-PCR 方法, 获取目的基因, 通过TA 克隆方法克隆入pUC19, 再反向亚克隆入逆转录病毒载体pDOR 中。采用DOTAP 法将重组逆转录病毒载体转入包 装细胞, 以NIH3T3 细胞为靶细胞测定产病毒滴度。【结果】序列测定结果与GenBank 中序列一致。c-myb 基因片段已定向 克隆入pDOR。细胞转染表明, 已形成稳定的包装细胞株PA317/ pDOR-my b, 产病毒滴度达5.2 ×104 ~ 9 ...
马会慧 +5 more
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