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目的探究、评估脑脊液特异的β2-转铁蛋白(β-2transferrin,β-2Tf)在早期诊断神经外科术后颅内感染中的应用价值。方法选取64例北京天坛医院神经外科术后的病人,根据病人的症状及实验室检查分为感染组和非感染组,其中感染组23例,非感染组41例,检测其脑脊液β2-转铁蛋白,并计算其与脑脊液总蛋白的比值。结果感染组β2-转铁蛋白明显高于非感染组,差异有统计学意义 ...
杨智君 +4 more
doaj
Sox9基因转染诱导L6大鼠成肌细胞向软骨细胞表型分化的研究
利用脂质体转染法,将真核表达质粒pcDNA3.1-Sox9导入L6细胞中.通过细胞增殖检测、细胞形态学观察、标志基因表达分析和甲苯胺蓝染色等方法分析Sox9基因转染对L6细胞增殖和向成软骨方向分化的诱导作用.结果表明,Sox9基因转染对L6细胞的增殖能力没有影响,但能明显抑制L6细胞相互融合形成肌管.和对照相比,Sox9基因转染后,细胞成肌分化标志基因Myf5的表达受到明显抑制,而成软骨分化标志基因Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col2a1)和蛋白聚糖(Aggrecan,Agg)的表达显著提高 ...
宋宏梅 +4 more
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目的将已构建完成的携带增强绿色荧光蛋白基因的TSLC1真核表达载体转染到HepG2细胞中,同时观察其对HepG2肝癌细胞的作用。方法脂质体Lipofectamine 2000介导重组载体转染到HepG2肝癌细胞中,经G418筛选建立稳定转染细胞株,分别采用RT-PCR、免疫组化法和westernblot法检测其表达;MTT检测细胞增殖活力,流式细胞仪分析细胞周期。结果与对照组比较,RT-PCR方法可见转染组细胞TSLC1mRNA表达明显增多,免疫组化和western ...
肖钟迪, 张玉成, 房学东
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【目的】 研究Bcl-xl基因对成人神经母细胞廇SH-SY5Y细胞毒性的影响.【方法】 将构建好的Bcl-xl基因重组真核表达载体pIRES2-EGFP/Bcl-xl转染SH-SY5Y细胞,并分为正常组、pIRES2-EGFP空质粒转染组、pIRES2-EGFP/Bcl-xl质粒转染组,利用凋亡诱导剂硝普钠(50 μmol/L)诱导各组细胞凋亡,行Hoechst33258细胞染色对比观察各组细胞凋亡情况,通过MTT法分析各组细胞存活率?RT-PCR与Western blotting检测转染后Bcl ...
杨炼红 +5 more
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本研究通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导,对多年生黑麦草进行遗传转化。用从成熟胚诱导的愈伤组织进行转化。经带有抗生素抗性基因的农杆菌侵染、抗生素筛选,获得抗性植株。经PCR、 GUS组织染色和Southern bloting验证,结果表明获得了稳定表达的转基因多年生黑麦草植株。该转化系统的建立,为定向进行分子设计改良黑麦草品种 ...
刘华玲, 杨宏, 马欣荣
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目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入pGC-FU载体,构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果,重组质粒pGC-FU-Shh的测序,Western
边学海 +6 more
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探讨12C6+离子束辐射对用带有绿色荧光蛋白基因的缺陷性腺病毒(AdCMV-GFP)转染小鼠黑色素瘤细胞(B16细胞系)的影响。采用不同剂量的12C6+重离子束辐射经AdCMV-GFP转染的B16细胞,利用流式细胞仪检测腺病毒的转染率。结果表明,12C6+重离子束辐射能提高腺病毒对B16细胞的转染率,且具有量效关系。此外 ...
李小达 +10 more
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SARA低表达对Activin A/Smads环路活性的影响
目的探讨下调Smad锚捉蛋白(SARA)表达对Activin A/Smads环路活性的影响。方法利用RNA干扰技术,设计靶向大鼠SARA基因的短发卡RNA(shRNA),瞬时转染激活素A(ActA)高表达的大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞。转染48h后倒置荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR、Western blot检测SARA基因的表达情况。对阳性转染组及阴性转染组细胞换液3h后,Western blot检测Smad3总蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果靶向SARA基因的SARA-shRNA及对照NC ...
石晓花 +8 more
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目的构建人死亡受体5(death receptor5,DR5)全长基因真核细胞表达载体pcDNA3.1/DR5,pcDNA3.1/GFP/DR5,并观察其转染胶质瘤细胞U138的效果。方法通过重叠PCR获得DR5全长编码序列,构建pcDNA3.1/GFP/DR5,pcDNA3.1/DR5表达载体,利用脂质体转染试剂盒,分别将2种质粒pcDNA3.1/GFP/DR5、pcDNA3.1/GFP共转染胶质瘤细胞U138,转染后72h,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测DR5mRNA的表达 ...
黎之静 +7 more
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通过分子细胞生物学方法,对抗白粉病、高蛋白质含量“小麦×簇毛麦”杂种后代端体附加系进行染色体组荧光原位杂交,以鉴定附加染色体来源.结果表明,附加端体染色体为簇毛麦染色体,染色体C-带分析结果显示,该端体可能为簇毛麦6Vs或7Vs染色体.该端体染色体携有抗白粉病和高蛋白质基因,利用染色体显微操作技术可对这些优良基因进行分离、克隆并加以利用.染色体原位杂交结果还发现,通过“小麦-簇毛麦”易位系6Vs/7AL易位染色体转移操作,已将易位染色体转移到推广小麦品种“川育12”中.此外 ...
余懋群,邓光兵,M.Cerbah,马欣荣,陈静,O.Panaud,S.Yakovlev +1 more
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