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野生动物学报电穿孔转染（电转染）是一种高效、低毒、操作方便的细胞转染技术，但在鹿茸原代细胞中还没有应用的先例。为探索电转染过程中影响鹿茸原代细胞电转染效率和细胞存活率的关键参数，以293T细胞系为平行实验组，将pCMV-C-EGFP质粒电转入马鹿（Cervus elaphus）鹿茸前软骨和软骨原代细胞中。结果显示：（1）在方波条件下，鹿茸前软骨细胞电转染电压500 ~ 700 V，脉冲长度0.4 ~ 1.4 ms，脉冲次数优选1或2次；而软骨细胞电转染电压500 V，脉冲长度0.2 ~ 1.3 ms ...
金庆梅 +6 more
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, 2015 本发明提供了一种转移石墨烯的方法，包括以下步骤：a)采用静电处理，将目标基底与沉积有石墨烯的衬底进行粘合，得到衬底-石墨烯-目标基底复合膜；b)剥离所述衬底-石墨烯-目标基底复合膜中的衬底。本发明提供的方法采用静电力将沉积有石墨烯的衬底与目标基底结合，避免了粘结剂的使用，从而不会在转移后的石墨烯上留有残留粘结剂，对转移后的石墨烯无污染，且保证了石墨烯的完整性。本发明提供的方法可以实现石墨烯的快速、完整无损 ...
许林峰, 汪伟, 王姣霞, 刘兆平
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, 2009 针对高速公路周边环境污染问题,提出用人工湿地来解决高速公路污染的观点。对人工湿地处理高速公路引起的大气污染、雨水径流污染、噪声污染以及高速公路服务区污染的机理作了详细的阐述,并给出了这种人工湿地的设计原则和设计方法。指出人工湿地在高速公路建设中的推广既能美化环境 ...
高速公路, 人工湿地, 污染
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的将真核表达质粒pEGFP-ActivinA以脂质体介导转染人皮肤微血管内皮细胞,观察能否在细胞内表达,为进一步研究其作用奠定基础。方法pEGFP-ActivinA扩增和酶切鉴定;原代培养人皮肤微血管内皮细胞,以脂质体介导将真核表达质粒pEGFP-ActivinA转染该细胞,于一定时间内在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,MTT法检测基因转染对人皮肤微血管内皮细胞增殖的影响。结果转染后48h在荧光显微镜下人皮肤微血管内皮细胞可见发出绿色荧光,72h发出绿色荧光的细胞增多,强度增强 ...
裴颖, 左玲, 栾永昕, 苏冠方
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转染自杀基因 pCEAcd-tk 的 SPC-A-1 细胞的死亡机制 [PDF]
, 2000 【目的】探讨自杀基因 pCEAcd-tk/前体药物体系旁观者效应的细胞死亡机制。【方法】提取质粒pCEAcd-tk,转染 到肺癌细胞株 SPC-A-1 中, 与未转染的细胞按2∶ 8 的比例混合后加到 96 孔培养板中(每孔 3×103) ,加前体药物 5-FC( 5μmol/ L)和 GCV( 10 μ mol/L)孵育 5 d 后, MTT 法测定细胞存活率而估计旁观者效应。取处理后的细胞, 提取 DNA, 琼脂糖凝胶电 泳; Hoechst 染色后荧光显微镜观察及碘化丙啶( PI)染色 ...
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绿色荧光蛋白基因转染人骨髓间充质干细胞体外成脂肪诱导分化的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的以逆病毒为载体将绿色荧光蛋白基因（EGFP）转染人骨髓间充质干细胞（hMSC）,研究对其成脂肪诱导分化的影响。方法以逆病毒为载体将EGFP基因转染hMSC,流式细胞仪检测转染后hMSC的表面标记,并对转染EGFP的hMSC进行成脂肪诱导分化培养。结果转EGFP基因的hMSC/EGFP细胞与未转基因的hMSC在细胞形态及生长特点上无差异。转基因的hMSC细胞仍高表达CD29、CD44、CD105抗原,传代培养后可诱导形成脂肪细胞。结论转染EGFP基因对hMSC在体外成脂肪诱导能力无明显影响 ...
陈晓 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2023 目的 通过基因沉默技术构建质粒成功转染原代星形胶质细胞(Ast)抑制IL-17表达，探讨IL-17的功能。方法 在制备原代Ast基础上，应用IL-17基因沉默质粒pGenesil-1A和B,用Lipofectamine 2000转染Ast,通过荧光分析法、RT-PCR法、Western Blotting法观察IL-17基因沉默后效果。结果 携带pGenesil-1B和A的IL-17基因沉默质粒制备成功后，免疫荧光携带pGenesil-1B转染效果明显高于pGenesil-1A,其转染率可高达56.72%;
沈笑然 +4 more
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, 2006 以复制缺陷型重组腺病毒载体(AdCMV-GFP)为对照,用复制缺陷型p53重组腺病毒载体 (AdCMV-p53)转染经0．5、1．0、2．0Gyγ射线照射的HT-29细胞,克隆形成法检测对细胞的抑制作用,流式细胞分析法检测细胞周期和细胞凋亡,探讨辐射诱导对AdCMV-p53转染p53突变型结直肠癌细胞(HT-29细胞系)细胞周期的影响。结果显示,0．5-1．0Gy辐射诱导明显增强40 MOI AdCMV-p53转染对HT-29细胞的抑制。与AdCMV-p53转染对照相比,1 d后,辐射诱导转染组G0 ...
李文建 +9 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1对膀胱癌细胞T24的生物学影响。方法将构建好的含771 bp大小的基因片段的真核表达质粒pcDNA3.1（+）/KiSS-1及空载体pcDNA3.1（+）用阳离子脂质体介导采用基因转染技术转染膀胱癌细胞T24,观察KiSS-1mRNA的表达、细胞生长能力、增殖情况及细胞侵袭力的变化。结果pcDNA3.1（+）/KiSS-1成功转染T24细胞,KiSS-1 mRNA表达阳性,而正常细胞和空载体组为阴性;转染目的基因后细胞生长曲线 ...
袁子杰, 杨杰
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, 2013 本研究分別以化學氧化劑(市售漂白水)氧化程序、間接電化學氧化程序與直接電化學氧化程序等實驗結果，探討電氧化裂解有機反應性染料之化學反應途徑，並提出 3 種電氧化分解有機化物之反應機制。綜合研究與文獻資料顯示，以直接電氧化法處理有機染料，透過氯的氫氧化物或離子產生氧化作用，與電反應槽內產生的二次氧化劑，及極板上的直接氧化等三種反應途徑。這樣的機制可以解釋何以電化學程序所產生的新鮮次氯酸溶液比市售漂白水對染料去色更有效，同時也可以解釋直接電氧化法與間接電氧化法對 COD 的去除效率差異 ...
陳俊成; 楊禎祿; 何志軒
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