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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入pGC-FU载体,构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果,重组质粒pGC-FU-Shh的测序,Western
边学海 +6 more
doaj
, 2008 本研究通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导，对多年生黑麦草进行遗传转化。用从成熟胚诱导的愈伤组织进行转化。经带有抗生素抗性基因的农杆菌侵染、抗生素筛选，获得抗性植株。经PCR、 GUS组织染色和Southern bloting验证，结果表明获得了稳定表达的转基因多年生黑麦草植株。该转化系统的建立，为定向进行分子设计改良黑麦草品种 ...
刘华玲, 杨宏, 马欣荣
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四川大学学报. 自然科学版, 2011 piggyBac(PB)转座子的末端反向重复序列(ITR)和转座酶编码序列(PBase)分别克隆于质粒PB1156、atub-pBac-K10.1TR与包含红色荧光蛋白表达序列(RFP)的质粒pmClherry-N1重组构成供体质粒(Donor);PBase与真核表达载体pEFrF-PGK重组构成辅助质粒(Helper).使用由供体质粒与辅助质粒组成的PB二元共转染系统转染HEK293细胞,结果表明该二元共转染系统具有较好的转座活性,并且在分子水平验证了转座的发生以及使用反向PCR(IPCR ...
缪辉, 刘华华, 吴传芳
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低剂量碳离子束辐射增强AdCMV-p53转染对非小细胞肺癌细胞的治疗效果
, 2009 探讨低剂量碳离子束预辐照对AdCMV-p53转染非小细胞肺癌细胞的影响, 观察了20和40 MOI AdCMV-p53转染经12C6+ 束流或γ 射线预辐照的H1299细胞后, 外源性p53的表达、细胞周期、细胞凋亡和细胞存活等. 结果显示, 经碳离子束预辐照后 AdCMV-p53转染细胞p53阳性细胞所占比例高达90%多, 明显高于γ 射线预辐射后AdCMV-p53 转染细胞p53阳性率. 低剂量碳离子预辐照明显阻止AdCMV-p53转染细胞G0/G1阻滞的发生,促进 G2/M 阻滞和细胞凋亡的发生.
李文建等, 刘兵, 张红
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1对膀胱癌细胞T24的生物学影响。方法将构建好的含771 bp大小的基因片段的真核表达质粒pcDNA3.1（+）/KiSS-1及空载体pcDNA3.1（+）用阳离子脂质体介导采用基因转染技术转染膀胱癌细胞T24,观察KiSS-1mRNA的表达、细胞生长能力、增殖情况及细胞侵袭力的变化。结果pcDNA3.1（+）/KiSS-1成功转染T24细胞,KiSS-1 mRNA表达阳性,而正常细胞和空载体组为阴性;转染目的基因后细胞生长曲线 ...
袁子杰, 杨杰
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的建立Smad7稳定转染胶质母细胞瘤细胞株,并观测Smad7表达对U251细胞增殖的影响。方法应用脂质体将真核细胞表达质粒pCDNA3.0-Smad7和空载质粒pCDNA3.0转染入胶质母细胞瘤细胞,并在转染后绘制生长曲线以观测细胞增殖。结果RT-PCR和westernblot证实Smad7在转录和蛋白翻译水平上均呈高表达。Smad7转染后,细胞增殖速度减慢。结论Smad7稳定转染胶质母细胞瘤细胞株已成功建立,Smad7高表达可抑制胶质母细胞瘤细胞株的增殖。
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的转染化学合成siRNA特异性下调人主动脉平滑肌细胞PAI表达。方法人工合成一对互补并编码相应短发夹状PAI小核糖核酸,体外退火;采用电转染方法将小RNA导入人主动脉平滑肌细胞中,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、western blot法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白的表达变化。结果转染PAI siRNA载体后,人主动脉平滑肌细胞PAI mRNA和蛋白表达均较对照组明显下降 ...
侯旭晖, 杜建时, 尹维田
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低剂量碳离子束辐射增强AdCMV-p53转染对人非小细胞肺癌细胞的治疗效果
, 2009 探讨低剂量碳离子束预辐照对AdCMV-p53转染非小细胞肺癌细胞的影响,观察了20和40MOIAdCMV-p53转染经12C6+束流或γ射线预辐照的H1299细胞后,外源性p53的表达、细胞周期、细胞凋亡和细胞存活等.结果显示,经碳离子束预辐照后AdCMV-p53转染细胞p53阳性细胞所占比例高达90%多,明显高于γ射线预辐射后AdCMV-p53转染细胞p53阳性率.低剂量碳离子预辐照明显阻止AdCMV-p53转染细胞G0/G1阻滞的发生,促进G2/M阻滞和细胞凋亡的发生.碳离子束辐射诱导AdCMV ...
李强 +9 more
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, 2010 膜污染阻力是影响膜过程效率的关键因素,了解膜过程操作条件对膜污染的影响对于减轻膜污染、提高膜过程效率具有重要意义.实验利用串联阻力模型,以乳酸发酵液为实验体系,考察了新型旋转超滤膜组件的操作条件——跨膜压力、转速和温度对膜污染阻力及膜不同阻力分布的影响.实验发现跨膜压力越大时,膜的总阻力越大,由可逆污染形成的阻力占总阻力的比例越高;当转速越高时,膜的总阻力越小,由可逆污染形成的阻力占总阻力的比例越小;温度不同时,膜总阻力相同 ...
李敬 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨逆转录病毒介导增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转染人骨髓间充质干细胞（hBM-MSC）的可行性。方法携带EGFP的重组逆转录病毒载体（EGFP-RV）转染体外培养扩增的hBM-MSC,嘌呤霉素筛选,获得表达EGFP的hBM-MSC/EGFP,以未转染的hBM-MSC为对照组,观察两组细胞的形态、生长特性、表面分子表达及向脂肪细胞、成骨细胞分化的潜能。结果EGFP-RV转染hBM-MSC后,获得稳定表达EGFP的hBM-MSC/EGFP;hBM-MSC/EGFP的细胞形态、生长特性 ...
马俐君 +4 more
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