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SARA低表达对Activin A/Smads环路活性的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的探讨下调Smad锚捉蛋白(SARA)表达对Activin A/Smads环路活性的影响。方法利用RNA干扰技术,设计靶向大鼠SARA基因的短发卡RNA(shRNA),瞬时转染激活素A(ActA)高表达的大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞。转染48h后倒置荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR、Western blot检测SARA基因的表达情况。对阳性转染组及阴性转染组细胞换液3h后,Western blot检测Smad3总蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果靶向SARA基因的SARA-shRNA及对照NC ...
石晓花 +8 more
doaj
Research on expression of HIV-1 env in baculovirus [PDF]
, 2000 昆虫细胞杆状病毒表达系统(BEVS)是真核表达系统的一种，以一种无需额外辅助的重组昆虫杆状病毒作为表达载体，目前已被应用来表达不同来源的基因，如细菌、病毒、植物和哺乳动物的基因。它具有表达产量高，蛋白经过完善的后处理过程，如内含子剪切、糖基化等特点。其原理是通过外源基因置换病毒的核多角体蛋白基因，使外源基因在核多角体蛋白启动子下高效表达。本论文中采用BEVS表达HIV-1包膜蛋白，目的在于弥补原核表达系统不能表达大片段的、高度糖基化的重组蛋白；并探索其应用在检测试剂中的前景。Baculovirus ...
郭庆
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Expressions of Cyr61 and WISP-3 in Non-small Cell Lung Cancer and Its Clinical Significance [PDF]
, 2010 Background and objective Cysteine-rich protein 61 (Cyr61) plays a role as a tumor suppressor in non-small cell lung cancer (NSCLC). Cyr61 and WISP-3 have a very significant sequence homology, belonging to the same CCN gene family.
Chunwei ZHANG +3 more
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野生动物学报电穿孔转染（电转染）是一种高效、低毒、操作方便的细胞转染技术，但在鹿茸原代细胞中还没有应用的先例。为探索电转染过程中影响鹿茸原代细胞电转染效率和细胞存活率的关键参数，以293T细胞系为平行实验组，将pCMV-C-EGFP质粒电转入马鹿（Cervus elaphus）鹿茸前软骨和软骨原代细胞中。结果显示：（1）在方波条件下，鹿茸前软骨细胞电转染电压500 ~ 700 V，脉冲长度0.4 ~ 1.4 ms，脉冲次数优选1或2次；而软骨细胞电转染电压500 V，脉冲长度0.2 ~ 1.3 ms ...
金庆梅 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入pGC-FU载体,构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果,重组质粒pGC-FU-Shh的测序,Western
边学海 +6 more
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Establishment and Application of Cell Lines for the detection of dioxins [PDF]
, 2016 二噁英是一类常见的持久性有机污染物，广泛存在于环境中。毒性作用剂量极低并且易于在生物体内富集，对环境和人体健康都具有很大的危害。环境中的二噁英组分复杂，对分析技术的特异性和灵敏度要求都非常高。 国际上公认的检测二噁英的HRGC/HRMS标准方法需要复杂的前处理，且费用昂贵，而应用生物检测手段检测二噁英类污染物也有很大的优势。本研究主要利用二噁英类化合物进入生物体内后，作为芳香烃受体（Aryhydrocarbonreceptor，AhR）的配体 ...
杜宏
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 【目的】 用流式细胞仪(FCM)快速检测外源性血管内皮生长因子基因(VEGF基因)在大鼠原代培养肝细胞转染表达,根据结果优化其转染表达条件?【方法】 以加强型黄色荧光素蛋白(EYFP)为标记,用FCM快速检测重组质粒pIRES-EYFP/VEGF121在大鼠原代培养肝细胞中转染表达,根据结果优化pIRES-EYFP/VEGF121转染表达条件?【结果】 pIRES-EYFP/VEGF121得以成功构建,并转染大鼠原代培养肝细胞;优化的转染表达条件:在细胞数密度0.1×106/mL,质粒孵育时间30 ...
doaj
The universal autophagic effect induced by micro- and nanomaterials depends on dispersity and endocytosis [PDF]
, 2016 越来越多的研究显示，大部分纳米材料显著提升细胞自噬水平，并伴随多种毒性反应。这使得纳米材料的自噬效应受到人们的关注。但目前关于纳米材料的性质与自噬效应之间的关系仍未被明确，纳米材料如何引发自噬也尚未可知。本文的研究将对此作出部分解答。全文研究从一个简单现象开始：柠檬酸钠修饰的纳米氧化铁发生聚集之后引发显著的自噬效应，而在分散良好的状态下则不引起自噬。这种现象在不同粒径、不同表面修饰的纳米氧化铁，纳米金，纳米二氧化硅以及不同的细胞系中均存在 ...
黄登通
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绿色荧光蛋白基因转染人骨髓间充质干细胞体外成脂肪诱导分化的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的以逆病毒为载体将绿色荧光蛋白基因（EGFP）转染人骨髓间充质干细胞（hMSC）,研究对其成脂肪诱导分化的影响。方法以逆病毒为载体将EGFP基因转染hMSC,流式细胞仪检测转染后hMSC的表面标记,并对转染EGFP的hMSC进行成脂肪诱导分化培养。结果转EGFP基因的hMSC/EGFP细胞与未转基因的hMSC在细胞形态及生长特点上无差异。转基因的hMSC细胞仍高表达CD29、CD44、CD105抗原,传代培养后可诱导形成脂肪细胞。结论转染EGFP基因对hMSC在体外成脂肪诱导能力无明显影响 ...
陈晓 +4 more
doaj
Effects of hexabromocyclododecane (HBCD) on cardiac development in zebrafish embryos (Danio rerio): the mechanisms involved [PDF]
, 2015 六溴环十二烷（1,2,5,6,9,10-Hexabromocyclododecane，HBCD）是被运用最广泛的阻燃剂之一，在全球的用量仅次于四溴双酚A和多溴联苯醚。HBCD具有持久性、生物累积性和生物放大效应，因而被定义为持久性有机污染物（persistentorganicpollutants，POPs）。已有研究表明HBCD具有发育毒性、神经毒性、内分泌毒性和生殖毒性，但对心脏发育毒性的研究十分有限，尤其缺乏对心脏发育毒性机制的研究。本研究以斑马鱼和H9C2细胞系为实验模型，采用低浓度HBCD（0 ...
吴美芳
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