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将转草鱼生长激素基因黄河鲤(♂)与改良四倍体鲫鲤(♀)交配,获得100%三倍体子代"鲤鱼".通过特异引物PCR检测,子代鲤鱼包括转基因(简称阳性鱼)和非转基因(简称阴性鱼)两部分,其中阳性鱼占总检测鱼数的44.2%;染色体检测表明,子代转基因鲤鱼的染色体数目为3n=150;组织切片结果表明性腺不能发育成熟;在同龄的鲤鱼繁殖季节(24月龄),转基因三倍体鲤鱼仍不能产生成熟配子.阳性和阴性三倍体鲤鱼在形态上无明显差异,它们的体侧扁,近似纺锤形,体色青灰,有两对口须 ...
梁向阳 +9 more
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目的观察单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)丙氧鸟苷(GCV)自杀基因系统联合IL-12基因对人宫颈癌hela细胞系体外杀伤作用。方法采用脂质体转染法将HSV-TK及IL-12联合基因转染hela细胞,并将其用于体外实验,观察GCV对转染联合基因的Hela的杀伤作用及旁观者效应等。结果加入GCV后体外培养联合基因转染的Hela细胞,24 h后细胞明显发生形态上改变,正常对照组细胞生长旺盛;随着GCV剂量的加大,转染联合基因的Hela细胞的存活率呈逐渐下降的趋势 ...
李楷滨, 王立岩, 盛敏佳
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应用RT-PCR技术克隆草鱼生长激素(gcGH)的cDNA,将此cDNA定向插入真核表达载体VR1020中,构建成重组真核表达质粒VgcGH.利用脂质体法使质粒VgcGH转染哺乳动物细胞COS7,对转染后的COS7细胞进行RT-PCR、ELISA和免疫荧光检测,分别在转录和翻译水平证实gcGH基因在COS7细胞中得到了持续和正确的转染表达.
高庆 +5 more
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腺病毒载体介导人BMP-2与VEGF-165对骨髓间充质干细胞形态特征及增殖能力影响的实验研究
目的探讨携带骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)与血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF-165)双基因的腺病毒载体转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后对细胞形态特征及增殖能力的影响。方法选取4只新西兰大白兔抽取骨髓液,分离鉴定获得第3代BMSCs做为实验对象,实验分成4组:Ad-BMP-2-VEGF ...
张聪 +5 more
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重组腺病毒载体Ad-LMP-1的构建及其转染 MSC后成骨活性
【目的】 快速构建大鼠LIM矿化蛋白-1基因重组腺病毒载体,转染MSC,探讨LMP-1基因对MSC成骨分化和成骨活性的影响65377; 【方法】 从大鼠成骨细胞内提取总RNA,并设计LMP-1特异性引物进行RT-PCR,获取LMP-1基因后利用Invitrogen公司的TOPO定向克隆技术创建入门克隆pENTR/D-LMP-165377;转化TOP10细菌后,挑取阳性克隆摇菌提取质粒,入门克隆再与表达载体pAD/CMV/V5-DEST进行同源重组反应得到病毒载体pAD/CMV/V5-LMP-1 ...
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目的探讨盐诱导基因(Salt Inducible Kinase 2,SIK2)对3T3-L1成熟脂肪细胞生脂的影响及其机制。方法利用小鼠SIK2重组腺病毒表达载体,转染3T3-L1成熟脂肪细胞,采用油红O染色提取法和RT-PCR,测定脂肪细胞生脂及其关键酶和转录因子固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)mRNA水平的变化。结果与未转染组和空载体转染组相比,SIK2转染组油红O染色提取的脂滴含量降低56 ...
杜静 +5 more
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【目的】 比较两种基因转染方法对外源基因在心肌组织中表达的影响。【方法】 20只SD大鼠随机分为尾静脉注射(IV)组和心肌内注射(IM)组各10只,分别于冠状动脉结扎前后在体转染携带绿色荧光蛋白报告基因的腺病毒,荧光显微镜下观察绿色荧光在心肌组织中的表达情况。【结果】 术后存活的6只IV组大鼠心肌组织在腺病毒转染后24 h和14 d均观察不到绿色荧光,但在其肝脏组织中检测到大量绿色荧光表达。术后存活的7只IM组大鼠注射部位心肌在腺病毒转染后24 h和14 d均检测到绿色荧光表达,而肝脏组织内未见绿色荧光。
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[The E3 ubiquitin ligase KLHL8 degrades HBx protein via the ubiquitin-proteasome pathway and inhibits HBV cccDNA transcription]. [PDF]
Liu ZH +6 more
europepmc +1 more source
以绿色荧光蛋白腺病毒重组体(Replication deficient adenovirus green fluorescence protein recombinant,AdCMV-GFP)为对照,用p53腺病毒重组体(Replication deficient adenovirus p53 recombinant,AdCMV-p53)转染经0、0.25、0.5、1.0、1.5和2.0Gyγ射线预辐射的HepG2(wtp53)、Hela(wtp53,wtP53低水平表达)和HT-29(mtp53 ...
刘兵 +8 more
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