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腺病毒载体介导人BMP-2与VEGF-165对骨髓间充质干细胞形态特征及增殖能力影响的实验研究
目的探讨携带骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)与血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF-165)双基因的腺病毒载体转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后对细胞形态特征及增殖能力的影响。方法选取4只新西兰大白兔抽取骨髓液,分离鉴定获得第3代BMSCs做为实验对象,实验分成4组:Ad-BMP-2-VEGF ...
张聪 +5 more
doaj
Systematic Analysis of ApiAP2 Transcription Factor Gene Family in the Rodent Malaria Parasite Plasmodium yoelii [PDF]
疟疾是疟原虫(Plasmodiumspp.)感染导致的蚊媒传染性疾病,疟原虫生活周期复杂,经历了多宿主和多细胞形态的转化,每一步都需要精确地基因时空表达调控,转录因子介导的DNA转录水平的调控起到重要作用。 ApiAP2基因家族是疟原虫基因组中预测的为数极少的转录因子基因家族,在人疟原虫和啮齿类动物疟原虫中高度保守。在顶复体亚门生物(包括疟原虫)和植物中,ApiAP2基因编码蛋白均含有一个或者多个60个氨基酸大小的AP2DNA结合结构域,起到激活或抑制转录的作用。 之前的转录谱和蛋白质组学分析发现 ...
赵伊华
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目的建立Smad7稳定转染胶质母细胞瘤细胞株,并观测Smad7表达对U251细胞增殖的影响。方法应用脂质体将真核细胞表达质粒pCDNA3.0-Smad7和空载质粒pCDNA3.0转染入胶质母细胞瘤细胞,并在转染后绘制生长曲线以观测细胞增殖。结果RT-PCR和westernblot证实Smad7在转录和蛋白翻译水平上均呈高表达。Smad7转染后,细胞增殖速度减慢。结论Smad7稳定转染胶质母细胞瘤细胞株已成功建立,Smad7高表达可抑制胶质母细胞瘤细胞株的增殖。
doaj
【目的】研究丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)对肝门部胆管癌细胞(QBC939)细胞凋亡及细胞周期的影响。【方法】将包含HCV-C基因的真核表达质粒pcDNAHCV-C和空载体,利用脂质体介导将其转染QBC939,经G418筛选获得稳定转染HCV-C的QBC939细胞(QBC939HCV-C+),RT-PCR和免疫荧光法检测HCV-C蛋白表达,MTT法检测QBC939HCV-C+细胞、空白质粒转染QBC939(QBC939pcDNA)细胞和未转染QBC939细胞生长增生率;流式细胞术(FACS ...
李志花
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Regulation of Pol II pausing release and 3’-end mRNA cleavage by different subtypes of SEC [PDF]
编码蛋白的真核细胞基因的转录是由RNAPolymeraseII通过一系列的高度复杂有序的调控机制完成的,整个转录的循环主要分为起始、延伸以及终止三个基本环节,其中延伸是mRNA转录中至关重要的一步,它决定了mRNA在基因转录中的合成速率。mRNA的转录延伸是由正性和负性转录延伸因子共同参与调控的,当mRNA转录出了大概20-30nt的时候,负性转录延伸因子NELF和DRB敏感因子DSIF通过跟RNApolymeraseII(PolII)的结合,使得PolII先暂停下来,正性转录延伸因子P ...
朱鑫星
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目的转染化学合成siRNA特异性下调人主动脉平滑肌细胞PAI表达。方法人工合成一对互补并编码相应短发夹状PAI小核糖核酸,体外退火;采用电转染方法将小RNA导入人主动脉平滑肌细胞中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、western blot法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白的表达变化。结果转染PAI siRNA载体后,人主动脉平滑肌细胞PAI mRNA和蛋白表达均较对照组明显下降 ...
侯旭晖, 杜建时, 尹维田
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Brd4-P-TEFb and SECs complexs cooperatively regulate RNA Pol II pause release via different recruitment pathways [PDF]
真核基因转录调控是细胞基因表达调控网络的基础,细胞内编码蛋白的基因和核内小RNA(snRNA)的转录是由RNA聚合酶II(RNAPolII)负责的。RNAPolII控制的转录由前起始复合物组装、转录起始、启动子清理、转录延伸、转录终止等5步依次协同完成。正性转录延伸因子b(P-TEFb)发现之前,研究人员一直认为转录前起始复合物组装和转录起始是转录调控的关键步骤。随着人们对P-TEFb在转录调控方面研究的深入,发现转录延伸同样受到严密及精细的调控,是基因转录的限速步骤。 最近的研究表明 ...
陆小冬
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目的探讨盐诱导基因(Salt Inducible Kinase 2,SIK2)对3T3-L1成熟脂肪细胞生脂的影响及其机制。方法利用小鼠SIK2重组腺病毒表达载体,转染3T3-L1成熟脂肪细胞,采用油红O染色提取法和RT-PCR,测定脂肪细胞生脂及其关键酶和转录因子固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)mRNA水平的变化。结果与未转染组和空载体转染组相比,SIK2转染组油红O染色提取的脂滴含量降低56 ...
杜静 +5 more
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High-efficienct Construction of HBV-replicative Stable Cell Lines Based on ALL-IN-ONE Sleeping Beauty Transposon System [PDF]
乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus,HBV)感染是全球范围内的重要公共卫生问题。HBV为嗜肝病毒,只能在肝细胞中增殖,目前HBV复制与抑制相关的研究大多采用HBV质粒瞬时转染Huh7或HepG2细胞的方法,但在进行药物筛查、病毒制备等需要稳定均一的实验条件时,稳定整合细胞株是更好的选择。HepG2.2.15和HepAD38是当前用于HBV研究的最常用的两株细胞株,其构建策略为随机整合方式,且这两株细胞株均为GenotypeD型。有研究表明,不同基因型乙型肝炎病毒有不同的地理分布特征,在复制 ...
吴勇
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抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1和PPARγ mRNA表达的影响
目的观察抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1(Transcription Sp1,)和过氧化物酶体增殖体激活受体(Peroxisome Proliferator-Activated Receptorγ,PPARγ)mRNA表达的影响。方法把pc DNA3.1抵抗素基因真核表达载体转染入HepG2肝细胞,用RT-PCR方法进行Sp1和PPARγ)mRNA表达的检测。结果抵抗素基因转染HepG2细胞后,Sp1的表达明显增强,P0.05。结论抵抗素基因转染HepG2细胞后,可明显增强Sp1的表达 ...
金正贤, 赵虹, 杜珍武, 张桂珍
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