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目的:以改进的银染RNAAP-PCR法分析原发性及转移性胃癌标本,鉴定和克隆胃癌转移相关基因。方法:以原发及转移灶胃癌标本总RNA为研究对象,首先以T12MN“锚定”引物进行逆转录合成cDNA第一链,再以10核苷酸任意引物进行PCR扩增,5%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物后银染显示并回收差异条带,经RNA点杂交验证、克隆测序后进入GenBank数据库检验同源性。结果:经银染RNAAP-PCR法分析,获得系列差异表达片段。对其中MGA1(662bp)和PGA1(589bp)两个片段进行验证和测序 ...
马胜平 +5 more
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抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1和PPARγ mRNA表达的影响
目的观察抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1(Transcription Sp1,)和过氧化物酶体增殖体激活受体(Peroxisome Proliferator-Activated Receptorγ,PPARγ)mRNA表达的影响。方法把pc DNA3.1抵抗素基因真核表达载体转染入HepG2肝细胞,用RT-PCR方法进行Sp1和PPARγ)mRNA表达的检测。结果抵抗素基因转染HepG2细胞后,Sp1的表达明显增强,P0.05。结论抵抗素基因转染HepG2细胞后,可明显增强Sp1的表达 ...
金正贤, 赵虹, 杜珍武, 张桂珍
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目的: 使用多聚阳离子脂质体载体( lipofectAMINE)在体外建立转γ -干扰素( IFN-γ )基因的大鼠肝细胞模型。方 法: 利用 lipofectAMINE 在体外将 IFN-γ基因转染大鼠肝细胞。分别以 RT-PCR 和 ELISA 方法检测所转IFN-γ基因在大鼠肝细胞 的转录和表达情况。结果: 以 lipofectAMINE 为载体的 IFN-γ基因转染大鼠肝细胞后, 可被有效的转录并产生具有生物活性的 IFN-γ。结论: IFN-γ基因可被成功转染入大鼠肝细胞并可有效表达 ...
王 坤 郭 英 闵 军 陈积圣
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转染APOBEC3A基因对宫颈癌Hela细胞生物学行为的影响
摘 要: 【目的】 探讨载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽样蛋白3A(APOBEC3A)表达对宫颈癌Hela细胞体外增殖、凋亡及迁移能力的影响。【方法】根据Hela细胞是否转染APOBEC3A真核表达质粒,分A3A特异性转染组(A3A组),空白质粒转染组(阴性对照组,M45)和未转染组(空白组,Hela)。利用Westernblotting检测A3A特异性转染组A3A蛋白的表达;而后使用CCK8法、流式细胞仪分析法和异质粘附、Transwell法分别检测A3A 对Hela细胞增殖、凋亡 ...
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【目的】探讨美蓝法示踪和定位行乳腺癌前哨淋巴结活检(SLNB)的可行性及其临床意义,并探索常规病理检查(HE染色)、免疫组化染色(IHC染色)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对判断前哨淋巴结(SLN)微转移灶的价值。【方法】66例乳腺癌患者,用美蓝示踪行SLNB,对SLN及腋窝淋巴结(ALN)进行HE染色;随机选取40例SLN进一步行细胞角蛋白19(CK19)的IHC染色及RT-PCR检测;比较3种方法对SLN微转移灶检出的敏感性、准确率及假阴性率的差异。【结果】66例中,美蓝示踪成功检出63例,
梁志东 +3 more
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多药耐药基因转染人骨髓间充质干细胞及对其化疗保护作用的实验研究
目的探讨逆转录病毒介导多药耐药基因(mdr1)体外转染人骨髓间充质干细胞(MSCs)能否提高其对化疗药物的耐受性。方法采用percoll密度梯度离心法自骨髓中分离MSC并进行纯化和扩增;脂质体转染法将携带有mdr1基因的逆转录病毒载体导入293T包装细胞,获得的病毒上清感染MSC,流式细胞术测定mdr1基因编码产物P-糖蛋白(P-g170)的表达水平;罗丹明(Rh123)排泌试验检测P-g170的功能活性;MTT法测定转染MSC对化疗药物耐受性。结果mdr1基因导入骨髓MSC后稳定表达P ...
叶明珠, 韩丽英, 岳鑫, 李荷莲
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本发明提供了一种转移石墨烯的方法,包括以下步骤:a)采用静电处理,将目标基底与沉积有石墨烯的衬底进行粘合,得到衬底-石墨烯-目标基底复合膜;b)剥离所述衬底-石墨烯-目标基底复合膜中的衬底。本发明提供的方法采用静电力将沉积有石墨烯的衬底与目标基底结合,避免了粘结剂的使用,从而不会在转移后的石墨烯上留有残留粘结剂,对转移后的石墨烯无污染,且保证了石墨烯的完整性。本发明提供的方法可以实现石墨烯的快速、完整无损 ...
许林峰, 汪伟, 王姣霞, 刘兆平
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核仁组成区(nOrS)是细胞某些染色体上携带着可转录核糖体的dnA(rdnA)。1975年gOOdPAS-TurE和blOOM首次应用氨银染色显示哺乳动物染色体上的nOrS[1]。1980年HOWEl和blACk[2]应用明胶、蚁酸配制的硝酸银染色—..
陈平, 杨善民
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目的构建含基因NLRC3的重组真核载体pcDNA3.1/myc-hisA-NLRC3。方法利用基因重组技术将NLRC3基因插入到真核表达载体pcDNA3.1/myc-hisA中,经酶切,PCR,测序及Western确定重组体质粒构建成功并转染。结果重组真核载体pcDNA3.1/myc-hisA-NLRC3构建成功。并将重组体转染至hUMSC细胞中并进行单克隆筛选扩增。结论重组真核载体pcDNA3.1/myc-hisA-NLRC3构建成功,并成功转染到hUMSC中,为下一步研究NLRC3的转染研究奠定基础。
宛莹, 张世冬, 梁爽, 聂德志
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慢性HBV感染者经长期核苷(酸)类似物治疗获HBsAg 阴转停药后的疗效
摘 要: 【目的】 回顾性研究慢性HBV感染者经长期核苷(酸)类似物治疗获得HBsAg阴转停药后疗效的持久性?【方法】对28例使用核苷(酸)类似物总疗程 ≥ 24月,获得HBsAg阴转的慢性HBV感染者,予以停用核苷(酸)类似物治疗后进行肝脏生化学?病毒学?血清学检测和随访观察? 【结果】 28例服用核苷(酸)类似物获得HBsAg阴转停药的慢性HBV感染者经过平均2.3(0.8 ~ 7.5)年的停药观察,无一例患者复发?停药时(n = 28)?停药后24周(n = 28)?48周(n = 24)?72周(
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