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绿色荧光蛋白基因转染人骨髓间充质干细胞体外成脂肪诱导分化的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的以逆病毒为载体将绿色荧光蛋白基因（EGFP）转染人骨髓间充质干细胞（hMSC）,研究对其成脂肪诱导分化的影响。方法以逆病毒为载体将EGFP基因转染hMSC,流式细胞仪检测转染后hMSC的表面标记,并对转染EGFP的hMSC进行成脂肪诱导分化培养。结果转EGFP基因的hMSC/EGFP细胞与未转基因的hMSC在细胞形态及生长特点上无差异。转基因的hMSC细胞仍高表达CD29、CD44、CD105抗原,传代培养后可诱导形成脂肪细胞。结论转染EGFP基因对hMSC在体外成脂肪诱导能力无明显影响 ...
陈晓 +4 more
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, 2001 目的:以改进的银染RNAAP-PCR法分析原发性及转移性胃癌标本,鉴定和克隆胃癌转移相关基因。方法:以原发及转移灶胃癌标本总RNA为研究对象,首先以T12MN“锚定”引物进行逆转录合成cDNA第一链,再以10核苷酸任意引物进行PCR扩增,5%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物后银染显示并回收差异条带,经RNA点杂交验证、克隆测序后进入GenBank数据库检验同源性。结果:经银染RNAAP-PCR法分析,获得系列差异表达片段。对其中MGA1(662bp)和PGA1(589bp)两个片段进行验证和测序 ...
马胜平 +5 more
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腺病毒载体介导人BMP-2与VEGF-165对骨髓间充质干细胞形态特征及增殖能力影响的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2015 目的探讨携带骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)与血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF-165)双基因的腺病毒载体转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后对细胞形态特征及增殖能力的影响。方法选取4只新西兰大白兔抽取骨髓液,分离鉴定获得第3代BMSCs做为实验对象,实验分成4组:Ad-BMP-2-VEGF ...
张聪 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的转染化学合成siRNA特异性下调人主动脉平滑肌细胞PAI表达。方法人工合成一对互补并编码相应短发夹状PAI小核糖核酸,体外退火;采用电转染方法将小RNA导入人主动脉平滑肌细胞中,采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、western blot法分别检测转染细胞PAI mRNA和蛋白的表达变化。结果转染PAI siRNA载体后,人主动脉平滑肌细胞PAI mRNA和蛋白表达均较对照组明显下降 ...
侯旭晖, 杜建时, 尹维田
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miR-23b-3p靶向PALM3对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡及炎症因子表达的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的研究miR-23b-3p对肺炎链球菌诱导的肺泡上皮细胞凋亡和炎症的作用及机制。方法将肺泡上皮细胞A549细胞分为对照组、感染组、转染组、感染组+转染组;对照组A549细胞常规培养,感染组用1×108 CFU/mL肺炎链球菌培养A549细胞,转染组转染不同载体,感染组+转染组在A549细胞被肺炎链球菌处理前48h进行转染。qRT-PCR检测细胞中miR-23b-3p和paralemmin-3(PALM3)mRNA的水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞中PALM3 ...
戴彩同, 张少锋, 黄玉洁
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨逆转录病毒介导增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转染人骨髓间充质干细胞（hBM-MSC）的可行性。方法携带EGFP的重组逆转录病毒载体（EGFP-RV）转染体外培养扩增的hBM-MSC,嘌呤霉素筛选,获得表达EGFP的hBM-MSC/EGFP,以未转染的hBM-MSC为对照组,观察两组细胞的形态、生长特性、表面分子表达及向脂肪细胞、成骨细胞分化的潜能。结果EGFP-RV转染hBM-MSC后,获得稳定表达EGFP的hBM-MSC/EGFP;hBM-MSC/EGFP的细胞形态、生长特性 ...
马俐君 +4 more
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转染ＡＰＯＢＥＣ３Ａ基因对宫颈癌Ｈｅｌａ细胞生物学行为的影响
, 2014 摘 要： 【目的】 探讨载脂蛋白Ｂ ｍＲＮＡ编辑酶催化多肽样蛋白３Ａ（ＡＰＯＢＥＣ３Ａ）表达对宫颈癌Ｈｅｌａ细胞体外增殖、凋亡及迁移能力的影响。【方法】根据Ｈｅｌａ细胞是否转染ＡＰＯＢＥＣ３Ａ真核表达质粒，分Ａ３Ａ特异性转染组（Ａ３Ａ组），空白质粒转染组（阴性对照组，Ｍ４５）和未转染组（空白组，Ｈｅｌａ）。利用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎｇ检测Ａ３Ａ特异性转染组Ａ３Ａ蛋白的表达；而后使用ＣＣＫ８法、流式细胞仪分析法和异质粘附、Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ法分别检测Ａ３Ａ 对Ｈｅｌａ细胞增殖、凋亡 ...
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抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1和PPARγ mRNA表达的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的观察抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1（Transcription Sp1,）和过氧化物酶体增殖体激活受体（Peroxisome Proliferator-Activated Receptorγ,PPARγ）mRNA表达的影响。方法把pc DNA3.1抵抗素基因真核表达载体转染入HepG2肝细胞,用RT-PCR方法进行Sp1和PPARγ)mRNA表达的检测。结果抵抗素基因转染HepG2细胞后,Sp1的表达明显增强,P0.05。结论抵抗素基因转染HepG2细胞后,可明显增强Sp1的表达 ...
金正贤, 赵虹, 杜珍武, 张桂珍
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的观察单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-TK）丙氧鸟苷（GCV）自杀基因系统联合IL-12基因对人宫颈癌hela细胞系体外杀伤作用。方法采用脂质体转染法将HSV-TK及IL-12联合基因转染hela细胞,并将其用于体外实验,观察GCV对转染联合基因的Hela的杀伤作用及旁观者效应等。结果加入GCV后体外培养联合基因转染的Hela细胞,24 h后细胞明显发生形态上改变,正常对照组细胞生长旺盛;随着GCV剂量的加大,转染联合基因的Hela细胞的存活率呈逐渐下降的趋势 ...
李楷滨, 王立岩, 盛敏佳
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RNAi-chk1在抑制小鼠Lewis肺癌细胞生长作用的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的观察chk1-RNAi联合放疗对Lewis肺癌细胞的抑制及凋亡情况。方法以脂质体Lipofectimine-2000介导,将chk1-536的siRNA表达载体转染小鼠Lewis肺癌细胞株,将其分为空白对照组、错义序列组、siRNA组,2Gy照射组、2Gy照射+错义序列组、2Gy照射+siRNA组。应用MTT法检测转染细胞抑制率、流式细胞术分析转染siRNA后细胞的凋亡,并应用RT-PCR检测转染细胞chk1-mRNA表达水平。结果 chk1-siRNA转染联合辐射组的Lewis肺癌细胞 ...
侯吉光 +4 more
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