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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的将全长外源多药耐药基因转入间充质干细胞使其外源基因得以表达。方法从胎盘组织中分离培养间充质干细胞,构建携带全长外源多药耐药基因的逆转录病毒,将此逆转录病毒转染间充质干细胞,绿色荧光显微镜检测外源基因的表达,western blot检测MDR1基因表达产物。结果绿色荧光显微镜可观测到转染后间充质干细胞有绿色荧光蛋白的表达,western blot检测到全长多药耐药基因编码的p-糖蛋白的表达。结论mdr1逆转录病毒载体可有效转染人胎盘源MSC,转染的外源基因可充分表达。
王博蔚 +3 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的探讨p16基因转染对大肠癌细胞生长及对放射敏感性的作用。方法以脂质体介导外源性P16基因转染大肠癌SWWC细胞系,照射后MTT法测定OD值,计算细胞生长抑制率。结果p16基因转染大肠癌SWWC细胞发生周期阻滞,照射后转染组细胞生长抑制率增加,与对照组有明显差异。结论p16基因转染对大肠癌SWWC细胞具有明显抑制作用,可提高大肠癌细胞对放射的敏感性。
梁显军 +4 more
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强型黄色荧光蛋白和VEGF 双基因载体在肝细胞共转染表达 [PDF]
, 2002 【目的】构建携带加强型黄色荧光素蛋白(EYFP)和人类血管内皮生长因子(VEGF)的双基因真核表达载体 pIRES-EYFP/ VEGF121 , 用EYFP 作标记基因, 研究外源性VEGF121 基因在大鼠原代培养肝细胞转染表达, 为实时监测 VEGF121基因修饰肝细胞移植后状态提供基础。【方法】将pcDNA3VEGF121中VEGF121定向克隆到pIRES-EYFP , 构建重组质 粒pIRES-EYFP/ VEGF121 , 经酶切、PCR 扩增和部分DNA 序列分析证实后 ...
王金林 +3 more
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多药耐药基因转染人骨髓间充质干细胞及对其化疗保护作用的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的探讨逆转录病毒介导多药耐药基因（mdr1）体外转染人骨髓间充质干细胞（MSCs）能否提高其对化疗药物的耐受性。方法采用percoll密度梯度离心法自骨髓中分离MSC并进行纯化和扩增;脂质体转染法将携带有mdr1基因的逆转录病毒载体导入293T包装细胞,获得的病毒上清感染MSC,流式细胞术测定mdr1基因编码产物P-糖蛋白（P-g170）的表达水平;罗丹明（Rh123）排泌试验检测P-g170的功能活性;MTT法测定转染MSC对化疗药物耐受性。结果mdr1基因导入骨髓MSC后稳定表达P ...
叶明珠, 韩丽英, 岳鑫, 李荷莲
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, 2006 探讨了辐射诱导对p53重组腺病毒载体转染p53突变型结直肠癌细胞(HT-29细胞系)的影响。以复制缺陷型重组腺病毒载体(AdCMV-GFP)为对照,用复制缺陷型p53重组腺病毒载体(AdCMV-p53)转染经0.5、1.0、2.0Gyγ射线照射的HT-29细胞,用流式细胞分析法检测细胞凋亡和p53蛋白表达,并用克隆形成法测定细胞增殖能力。结果表明,0.5Gy辐射诱导明显提高了AdCMV-p53转染对HT-29细胞的抑制,促进细胞凋亡。0.5Gy辐射诱导对AdCMV-p53转染HT ...
李文建 +9 more
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慢性HBV 感染者血清HBsAg 自发转阴的影响因素分析 [PDF]
, 2018 【目的】通过对大队列的慢性HBV感染者长期随访观察，了解自然状态下血清HBsAg转阴情况及其 影响因素。【方法】选取中山大学附属第三医院974例未抗病毒的慢性HBV感染者为研究对象，定期收集患者临 床数据，包括人口学数据、基线及随访各时间点的生化学、病毒学、血清学、肝脾影像学指标，了解其血清HBsAg 自发转阴情况，并进行单因素和多因素COX回归分析。【结果】随访至2016年12月，974例慢性HBV感染者中共 54 例出现血清HBsAg 自发转阴，每年自发阴转率约为1.3%。单因素分析发现 ...
崇雨田, 尤旭, 李向永, 陈兴
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, 2008 目的观察p53腺病毒重组体(AdCMV-p53)转染对p53缺失肿瘤细胞辐射敏感性的影响。方法用腺病毒重组体(AdCMV-p53/GFP)转染经0、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0Gyγ射线辐射的H1299(nullp53)和PC-3(nullp53)细胞,用流式细胞分析法检测外源性p53表达,用克隆形成法检测肿瘤细胞增殖能力。结果辐射联合AdCMV-p53转染组p53阳性细胞所占比例均明显高于单纯辐射组、单纯AdCMV-p53转染组和辐射联合AdCMV-GFP转染组同种细胞p53阳性率 ...
刘兵 +7 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨逆转录病毒介导增强型绿色荧光蛋白（EGFP）转染人骨髓间充质干细胞（hBM-MSC）的可行性。方法携带EGFP的重组逆转录病毒载体（EGFP-RV）转染体外培养扩增的hBM-MSC,嘌呤霉素筛选,获得表达EGFP的hBM-MSC/EGFP,以未转染的hBM-MSC为对照组,观察两组细胞的形态、生长特性、表面分子表达及向脂肪细胞、成骨细胞分化的潜能。结果EGFP-RV转染hBM-MSC后,获得稳定表达EGFP的hBM-MSC/EGFP;hBM-MSC/EGFP的细胞形态、生长特性 ...
马俐君 +4 more
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, 2001 目的:以改进的银染RNAAP-PCR法分析原发性及转移性胃癌标本,鉴定和克隆胃癌转移相关基因。方法:以原发及转移灶胃癌标本总RNA为研究对象,首先以T12MN“锚定”引物进行逆转录合成cDNA第一链,再以10核苷酸任意引物进行PCR扩增,5%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物后银染显示并回收差异条带,经RNA点杂交验证、克隆测序后进入GenBank数据库检验同源性。结果:经银染RNAAP-PCR法分析,获得系列差异表达片段。对其中MGA1(662bp)和PGA1(589bp)两个片段进行验证和测序 ...
马胜平 +5 more
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