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野生动物学报电穿孔转染（电转染）是一种高效、低毒、操作方便的细胞转染技术，但在鹿茸原代细胞中还没有应用的先例。为探索电转染过程中影响鹿茸原代细胞电转染效率和细胞存活率的关键参数，以293T细胞系为平行实验组，将pCMV-C-EGFP质粒电转入马鹿（Cervus elaphus）鹿茸前软骨和软骨原代细胞中。结果显示：（1）在方波条件下，鹿茸前软骨细胞电转染电压500 ~ 700 V，脉冲长度0.4 ~ 1.4 ms，脉冲次数优选1或2次；而软骨细胞电转染电压500 V，脉冲长度0.2 ~ 1.3 ms ...
金庆梅 +6 more
doaj
Expressions of Cyr61 and WISP-3 in Non-small Cell Lung Cancer and Its Clinical Significance [PDF]
, 2010 Background and objective Cysteine-rich protein 61 (Cyr61) plays a role as a tumor suppressor in non-small cell lung cancer (NSCLC). Cyr61 and WISP-3 have a very significant sequence homology, belonging to the same CCN gene family.
Chunwei ZHANG +3 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入pGC-FU载体,构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果,重组质粒pGC-FU-Shh的测序,Western
边学海 +6 more
doaj
The molecular mechanism and biological functions regulation of P2RY1 gene in low differentiated gastric adenocarcinoma [PDF]
, 2016 摘要 背景和目的：P2RY1是细胞膜蛋白受体，ADP及其类似物可以激活该受体。近期的研究发现P2RY1与肿瘤的发生发展密切相关。位于细胞膜上的P2RY1受体在接受细胞外信号刺激后，激活下游相关信号通路，发挥相应生物学功能，继而对癌细胞的增殖、分化、凋亡等产生一系列影响。本研究目的旨在运用分子生物学方法对P2RY1在低分化胃腺癌细胞的发生发展过程中的作用与相关分子机制及其生物学功能的调控进行探索研究。 方法：首先，通过胃癌样本的甲基化芯片筛选出P2RY1基因，同时在样本中通过westen ...
华应刚
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 【目的】 用流式细胞仪(FCM)快速检测外源性血管内皮生长因子基因(VEGF基因)在大鼠原代培养肝细胞转染表达,根据结果优化其转染表达条件?【方法】 以加强型黄色荧光素蛋白(EYFP)为标记,用FCM快速检测重组质粒pIRES-EYFP/VEGF121在大鼠原代培养肝细胞中转染表达,根据结果优化pIRES-EYFP/VEGF121转染表达条件?【结果】 pIRES-EYFP/VEGF121得以成功构建,并转染大鼠原代培养肝细胞;优化的转染表达条件:在细胞数密度0.1×106/mL,质粒孵育时间30 ...
doaj
Corneal neovascularization is allowed by the degradation and remodeling of typeⅠcollagen depended on Notch4-upregulated VEGFr3 expression [PDF]
, 2015 背景:角膜是无血管的高度透明的特殊组织，承担了眼三分之二的视觉功能。角膜新生血管（Cornealneovascularization，CNV)严重威胁视力，甚至导致失明，其机制未明，被认为是新形成的血管以出芽方式从角膜缘血管丛侵入无血管的角膜基质的过程。尽管近几十年来国内外已经针对CNV进行了大量的基础和临床研究，并取得了一些进展，然而因CNV发生的原因多种多样，发病机制非常复杂，到目前为止，仍没有发现一种共同的机制可以解释不同原因导致的CNV，也没有找到一种十分有效的方法治疗CNV。因此 ...
周丹
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绿色荧光蛋白基因转染人骨髓间充质干细胞体外成脂肪诱导分化的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的以逆病毒为载体将绿色荧光蛋白基因（EGFP）转染人骨髓间充质干细胞（hMSC）,研究对其成脂肪诱导分化的影响。方法以逆病毒为载体将EGFP基因转染hMSC,流式细胞仪检测转染后hMSC的表面标记,并对转染EGFP的hMSC进行成脂肪诱导分化培养。结果转EGFP基因的hMSC/EGFP细胞与未转基因的hMSC在细胞形态及生长特点上无差异。转基因的hMSC细胞仍高表达CD29、CD44、CD105抗原,传代培养后可诱导形成脂肪细胞。结论转染EGFP基因对hMSC在体外成脂肪诱导能力无明显影响 ...
陈晓 +4 more
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Study on the Molecular Mechanisms of dlk1 Stimulated Lung Cancer Cell Proliferation [PDF]
, 2010 Background and objective The imprinted gene dlk1 has been recognized as a cancer related gene since it aberrantly expressed in a series of cancer tissues, but its role in lung cancer is still unknown. The aim of this study is to examine dlk1’s expression
Bing LING +10 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1999 目的: 构建 p53 表达质粒, 研究 p53基因对白血病细胞 K562 细胞生长的抑制作用。方法: 以 T4 连接酶把 2 160 bp 的 p53 cDNA 片段插入 pRc/CMV 质粒, 重组构建 pRc/p53 表达质粒,以 Lipofectin 介导pRc/p53 质粒转染K562 细胞,以甲 基纤维素半固体培养方法作 K562 细胞体外克隆培养, 观察转染 p53 基因后 K562 细胞克隆形成改变。结果: p53 cDNA 质粒 转染的 K562 细胞, 体外培养克隆形成能力明显减低 ...
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1对膀胱癌细胞T24的生物学影响。方法将构建好的含771 bp大小的基因片段的真核表达质粒pcDNA3.1（+）/KiSS-1及空载体pcDNA3.1（+）用阳离子脂质体介导采用基因转染技术转染膀胱癌细胞T24,观察KiSS-1mRNA的表达、细胞生长能力、增殖情况及细胞侵袭力的变化。结果pcDNA3.1（+）/KiSS-1成功转染T24细胞,KiSS-1 mRNA表达阳性,而正常细胞和空载体组为阴性;转染目的基因后细胞生长曲线 ...
袁子杰, 杨杰
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