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人HMGN5基因shRNA慢病毒载体构建与RNAi效率的鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2011
目的构建人HMGN5基因的shRNA慢病毒载体并鉴定在肺癌A549和H1299细胞上的沉默效率。方法设计HMGN5基因特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pLL-3.7载体,并筛选获得有效的shRNA慢病毒载体,在293T细胞包装成病毒颗粒,将其感染肺癌A549和H1299细胞,应用Real-time PCR方法从mRNA水平上检测HMGN5的沉默效率。结果构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确,包装病毒后滴度达到5×108TU/ml ...
陈鹏   +8 more
doaj  

靶向EZH2基因的shRNA真核表达载体的构建及鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的构建靶向EZH2基因的shRNA真核表达载体质粒,为利用RNA干扰技术探索EZH2基因的作用的研究做准备。方法根据EZH2 mRNA序列设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并连接入pGenesil-2载体,并进行酶切鉴定和测序。结果酶切证明构建的shRNA已插入载体中,经测序证明与设计相同。结论成功构建靶向EZH2基因的shRNA真核表达载体,为进一步研究EZH2基因在肿瘤细胞中的作用机制及后续的体内外RNAi实验研究奠定了基础。
卢绩   +6 more
doaj  

携带EGFP基因的逆转录病毒载体的构建及初步应用

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009
【目的】 构建携带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的逆转录病毒载体,观察GFP的表达情况以及对靶细胞生物特性的影响65377; 【方法】 以质粒pEGFP-C1为模板进行PCR反应,获得完整保留pEGFP-C1载体多克隆酶切位点(MCS)的EGFP基因片段,定向插入逆转录病毒载体pLXSN,筛选出正确的重组逆转录病毒载体pLXSN-EGFP,转染PA317包装细胞后获得具有感染能力的病毒颗粒,转染人多型性脑胶质瘤细胞SW038-C2,通过荧光显微镜和流式细胞仪(FACS ...
doaj  

立柱-导轨间距对冷弯薄壁型钢墙体立柱性能的影响

open access: yesJianzhu Gangjiegou Jinzhan, 2015
冷弯薄壁型钢组合墙体立柱与导轨间不可避免地存在间隙,并可能对墙体立柱性能产生影响。考虑初始缺陷、材料非线性和几何非线性,应用有限元分析法研究立柱-导轨间距对墙体立柱轴压承载力和屈曲模态的影响。研究表明,随着立柱-导轨间距的增加,立柱轴压承载力不断降低,屈曲模态逐渐趋向于整体屈曲,提出了满足立柱承载力和美观要求的立柱-导轨间距限值;进而以立柱-导轨间距为限值的组合墙体为典型组合墙体,研究钢材强度、覆面板厚度和强度对其立柱轴压承载力的影响。分析表明:钢材强度 ...
刘涛, 郭成喜
doaj  

人紧密连接蛋白claudin-6真核表达载体的构建

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的构建人紧密连接蛋白claudin-6的cDNA真核表达载体。方法应用RT-PCR、T-A克隆、限制性内切酶切及亚克隆等技术将claudin-6基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中。结果酶切鉴定、PCR扩增以及序列分析表明已经将claudin-6基因全长序列克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中。结论获得了人claudin-6基因的全长cDNA片段,构建了claudin-6原核克隆载体和真核表达载体。实验中发现,中国人claudin-6基因的461位点碱基为A ...
吴琼   +7 more
doaj  

人神经生长因子基因真核细胞表达载体的构建与鉴定

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1999
目的: 构建携带人神经生长因子( hNGF)基因的真核细胞表达载体, 为应用 NGF 进行老年性痴呆(AD)等疾病基 因治疗打基础。方法: 应用基因重组技术将 hNGF cDNA 克隆到逆转录病毒载体 pLXSN 中 ,用限制性内切酶酶切分析重组质粒 pLNGFSN 中 hNGF 基因的插入方向,用 PCR、斑点杂交和 Southern 杂交对重组质粒 pLNGFSN 作进一步鉴定。结果: hNGF cDNA 已正确地克隆到逆转录病毒载体 pLXSN 中,而构建成重组逆转录病毒载体 pLNGFSN ...
doaj  

[Chinese guidance for the clinical application of Adeno-associated virus vector-based gene therapy for hemophilia B (2025)]. [PDF]

open access: yesZhonghua Xue Ye Xue Za Zhi
Thrombosis and Hemostasis Group   +3 more
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[Development of novel drug carrier via round window membrane]. [PDF]

open access: yesLin Chuang Er Bi Yan Hou Tou Jing Wai Ke Za Zhi, 2021
Xiao L, Liu C, Xia L, Feng Y.
europepmc   +1 more source

[Research progress in targeted delivery of inner ear using nanocarriers]. [PDF]

open access: yesLin Chuang Er Bi Yan Hou Tou Jing Wai Ke Za Zhi
Chen Y, Zhang H.
europepmc   +1 more source

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