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丙型肝炎病毒基因高变区（E1，E2／NS1）的分子克隆及基因型鉴定
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1995 对广东省一个患者血清中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因高变区进行分子克隆及基因型鉴定。采用微粒吸附法提取ＨＣＶＲＮＡ，随机引物逆转录后进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）。所用引物位于Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１区，扩增产物８０６ｂｐ，产物提纯后定向插入ｐＢＶ２２０质粒载体，重组体转染ＤＨ５α菌株，筛选菌落经增殖后碱变性法提取质粒，再通过ＰＣＲ及酶切法鉴定阳性克隆。我们还用酶切法对此株克隆的基因型作了初步鉴定，证明属于１组Ⅱ型。
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2003 目的 研究外周血肝癌发生相关甲胎蛋白 (AFP)基因在肝癌早期诊断和鉴别诊断中的价值。方法 :从肝癌组织和肝病患者外周血中制备总RNA ,经随机引物和逆转录酶作用合成cDNA ,再以逆转录巢式聚合酶链反应 (RT -PCR)扩增AFP基因 ,并分析其临床价值。结果 RT -巢式PCR扩增的AFP基因片段为 15 9bp ,与原设计一致 ;在 2 0份肝癌及其癌周和远癌组织中 ,AFP基因阳性率分别为 10 0 %、6 5 %和 0 % ;肝癌患者外周血AFP基因检出率为 5 3.7% ,明显高于肝硬化 ...
杨大明 +16 more
doaj
Mutual regulation between CHD5 and EZH2 in hepatocellular carcinoma [PDF]
, 2016 肝细胞癌Hepatocellularcarcinoma(HCC)在全球范围内是发病率排第五位的癌症。由于其在手术后存在潜在的转移和复发，尽管对于肝细胞癌的治疗越来越先进，但是肝细胞癌病人的预后仍然很差。因此，研究清楚肝癌肿瘤发生发展和复发的分子机制，发现新的预后分子标志物，将会有助于肝癌治疗策略的发展。 分子机制的研究主要是以染色质调控为重要部分，其调控方式有很多不同的分类，如有些调控基因参与“书写”和“阅读”组蛋白翻译后修饰，这些调控基因在肿瘤的发生发展中控制基因的表达起到重要作用。例如：多疏蛋白 ...
李钊
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, 2000 目的:了解武汉地区血液病患者中庚型肝炎病毒(HGV)的感染情况,探讨HGV的传播途径。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定各型血液病患者血清中的抗HGV和HGV RNA。结果:51例血液病患者中血清抗HGV阳性6例,占11.8％(5/61),HGV RNA均阴性。6例抗GHV阳性患者中急粒2例,占25%(2/8),慢粒1例,占50%(1/2),再障2例,占50％(2/4),粒细胞缺乏症1例,占100%(1/1)。6例抗HGV阳性患者均有受血史,占18.7%(
余涤霞 +7 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2003 目的 研究外周血肝癌发生相关甲胎蛋白 （AFP）基因在肝癌早期诊断和鉴别诊断中的价值。方法 :从肝癌组织和肝病患者外周血中制备总RNA ,经随机引物和逆转录酶作用合成cDNA ,再以逆转录巢式聚合酶链反应 （RT -PCR）扩增AFP基因 ,并分析其临床价值。结果 RT -巢式PCR扩增的AFP基因片段为 15 9bp ,与原设计一致 ;在 2 0份肝癌及其癌周和远癌组织中 ,AFP基因阳性率分别为 10 0 %、6 5 %和 0 % ;肝癌患者外周血AFP基因检出率为 5 3.7% ,明显高于肝硬化 ...
杨大明 +5 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1994 采用低浓度２－巯基乙醇作为裂解剂，配合高热变性处理血清等标本中丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶＲＮＡ）模板，将裂解上清直接逆转录，使ＨＣＶＲＮＡ转变为ｃＤＮＡ，再行套式多聚酶链反应（ＰＣＲ）扩增．５８份抗－ＨＣＶ阳性血清标本中，可检出３２份（５５．２％）ＨＣＶＲＮＡ，虽与常规的酸胍酚抽提方法所检出相当（即３０份被检出ＨＣＶＲＮＡ阳性，５１．７％），由于这种直接法省去了用酚及氯仿抽提和醇类沉淀等步骤，具有明显的实用价值。
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实时荧光定量RT-PCR检测siRNA表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小干扰RNA（siRNA）表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术。方法体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250 mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250 mRNA的表达情况。结果四条siRNA分别使G250 mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%
赵俊峰 +5 more
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中国河南两株庚型肝炎病毒(HGV)NS5区部分cDNA的克隆与序列分析 [PDF]
, 1998 通过逆转录－聚合酶链反应从我国河南省２例重叠感染ＨＣＶ或ＨＢＶ／ＨＤＶ的献血员中，分离到ＨＧＶＮＳ５区的部分ｃＤＮＡ，对其进行序列分析比较，结果表明：河南株ＨＧＶＮＳ５区核苷酸与两株中国ＨＧＶ株的同源性（＞９１．９％）高于国外代表株（８８．５％－９０．６％），但由核苷酸推导的氨基酸的同源性都无明显的地区性区别。ＨＧＶＮＳ５区氨基酸序列较保守（同源性＞９１％），缺乏明显高变区。中国４株ＨＧＶ在７３８４位发生了由Ｃ→Ｔ的变异，从而导致一个共同的保守位点的产生（由Ｆ→Ａ）。重叠感染其他肝炎病毒时 ...
夏宁邵 +5 more
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定量RT-PCR检测PBC患者外周血中颗粒溶素的基因表达水平
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的建立检测人颗粒溶素（granulysin,GNLY）mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并测定PBC患者外周血单个核细胞（PBMC）中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化（PBC,primarybiliary cirrhosis）发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建质粒pET28a-GNLY,作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。用此方法测定了60例PBC、60例乙型肝炎肝硬化及60例健康对照者外周血中GNLY mRNA的含量 ...
钱琤 +10 more
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, 2010 目的了解江苏省部分地区散发戊型肝炎病例的流行特征及病毒基因型。方法在江苏省部分地区开展为期一年戊型肝炎病例监测,用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosor-dent assay,ELISA)对各医疗单位报告的急性肝炎病例进行血清学分型,对其中确诊为急性戊型肝炎病例进行流行病学分析以及戊型肝炎病毒(hepatits E virus,HEV)RNA检测和序列分析。结果男女戊型肝炎病例比例为4.4∶1,84.0%的病例集中在40岁及以上的年龄组,全年均有戊型肝炎病例发生,70.5 ...
夏宁邵 +6 more
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