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定量RT-PCR检测PBC患者外周血中颗粒溶素的基因表达水平

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的建立检测人颗粒溶素(granulysin,GNLY)mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并测定PBC患者外周血单个核细胞(PBMC)中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化(PBC,primarybiliary cirrhosis)发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建质粒pET28a-GNLY,作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。用此方法测定了60例PBC、60例乙型肝炎肝硬化及60例健康对照者外周血中GNLY mRNA的含量 ...
钱琤   +10 more
doaj  

LAPTM4B Promotes Autophagy through Regulation of ATG3 in Hepatocellular Carcinoma [PDF]

open access: yes, 2017
摘要 背景 原发性肝癌在世界范围内都有很高的发病率与死亡率,是常见的恶性肿瘤之一,肝癌的发生具有早期症状不明显,后期发展迅速的特点,这为肝癌的早期治疗提高了难度,随着医学的进步,尽管肝癌的诊断与治疗都有了很大进步,但肝癌患者的总体生存率还是不理想,所以寻找新的治疗靶点越来越迫切。 近年来关于自噬在肿瘤发生发展中的研究越来越多,自噬在肿瘤的形成、增殖、转移以及能量代谢等诸多方面具有调节作用。自噬活性在肝癌的发生发展中起着重要作用。LAPTM4B ...
王菲
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检测HCA-RNA的RT-PCR技术改进与应用

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1993
以台湾株丙型肝炎病毒的非结构区基因序列(HCV-T3)设计内外五条呈巢式排列的引物,结合AGPC核酸一步抽提法,寡聚核苷酸探针5′末端标记法和Southern电泳转移杂交法,建立简捷特异检测HCV-RNA的逆转录一多聚酶链反应(RT-PCR)技术。应用这一技术对121例非甲非乙型肝炎患者和45例抗HCV阳性的慢性乙型肝炎患者进行了血浆HCV-RNA检测,结果阳性率分别为66.1%(80/121)和66.7%(30/45)。本文对这一技术的方法学、HCV-RNA与抗HCV的关系 ...
doaj  

HCV 广东株5’NCRc DNA的克隆及序列测定

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997
摘 要 从广东省1例慢性丙型肝炎病人血清中提取HCV RN A,随机引物逆转录为cDN A后用HCV 5’ 端非编码区( 5’ NCR)特异引物进行聚合酶链反应( PC R)。扩增产物302 bp,经补齐和提纯后插入pUC 19质 粒,获得的重组质粒pUN采用双脱氧链终止法测定核苷酸序列,与国内外多个株比较,核苷酸同源性介乎 92.
李 刚 姚集鲁 彭文伟 王 斌 吕 凌
doaj  

微小RNA在心肌细胞氧化应激中的特征性变化

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的研究微小RNA(microRNA,简称miRNA)与心肌细胞氧化应激的关系,作为探讨缺血再灌注损伤分子病理生理的基础。方法培养中的H9c2(2-1)心肌细胞以过氧化氢处理产生氧化应激,然后收集心肌细胞提取miRNA。选取miR-210和miR-24进行逆转录,再进行定量实时聚合酶链式反应。结果心肌细胞以过氧化氢处理2h后,与对照相比,miR-210显著降低至对照水平的47.07%(P=0.013),而miR-24的水平则大幅升高,达到了对照水平的344.48%(P=0.002)。结论 ...
郭威早, 张显峰, 纪红
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IL-10在系统性红斑狼疮患者PBMC B细胞刺激因子表达中的作用 [PDF]

open access: yes, 2007
【目的】探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)B细胞刺激因子(Blys)基因和蛋白在体外的表达及IL-10对其表达的影响。【方法】梯度密度离心法分离25例系统性红斑狼疮患者和20名女性健康志愿者外周血单个核细胞,分为2组,IL-10(100ng/mL)组和培养基组(仅含RPMI1640培养基),分别于培养0、6、12、24、72h离心收集PBMCs,RT-PCR法检测刺激后0~24h细胞Blys mRNA表达,流式细胞仪和直接免疫荧光法检测72h膜结合型Blys蛋白表达。【结果 ...
叶玉津   +6 more
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盐酸二甲双胍对非酒精性脂肪肝大鼠脂肪组织肿瘤坏死因子α基因表达的影响

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006
[目的]以逆转录(RT)和实时定量聚合酶链式反应(real-time qPCR)方法检测和分析非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型的药物干预效果.[方法]以高脂饲料饲喂雄性Wistar大鼠12周诱发NAFLD,然后转以基础饲料饲养,并分别进行盐酸二甲双胍干预与蒸馏水灌喂对照,每组8只,为期4周.从大鼠脂肪组织提取总RNA并逆转录成为cDNA,通过real-time qPCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的相对水平,以t检验分析两组间数据的差异.[结果]干预组大鼠脂肪组织的TNF-α ...
江庆澜   +6 more
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检测细胞角蛋白在食管癌外周血和骨髓微转移中的意义 [PDF]

open access: yes, 2012
目的:探讨食管癌患者外周血和骨髓中CK18mRNA基因表达及临床意义。方法:采用巢式RT-PCR方法检测50例M0、10例M1的食管癌患者及10例食管良性病变患者外周血及肋骨骨髓中细胞角蛋白CK18mRNA基因的表达。结果:50例M0食管癌患者外周血、骨髓中CK18mRNA阳性表达率分别为38.0%(19/50)和42.0%(21/50);10例M1的食管癌患者外周血、骨髓中CK18mRNA阳性表达率分别为90.0%(9/10)、100%(10/10 ...
姚成才   +4 more
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LIFR在原发不孕症患者子宫内膜的表达

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的探讨白血病抑制因子受体(Leukaemia inhibitory factor receptor,LIFR)在子宫内膜的表达,与原因不明原发不孕症的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例研究组(原因不明原发不孕症患者)和20例对照组患者分泌中期子宫内膜LIFRmRNA的表达。结果研究组分泌中期子宫内膜LIFRmRNA表达水平为0.640 1±0.234 9,对照组为1.558 7±0.296 1,研究组较对照组明显降低,差异有极显著性 ...
张松灵   +3 more
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中国河南两株庚型肝炎病毒(HGV)NS5区部分cDNA的克隆与序列分析 [PDF]

open access: yes, 1998
通过逆转录-聚合酶链反应从我国河南省2例重叠感染HCV或HBV/HDV的献血员中,分离到HGVNS5区的部分cDNA,对其进行序列分析比较,结果表明:河南株HGVNS5区核苷酸与两株中国HGV株的同源性(>91.9%)高于国外代表株(88.5%-90.6%),但由核苷酸推导的氨基酸的同源性都无明显的地区性区别。HGVNS5区氨基酸序列较保守(同源性>91%),缺乏明显高变区。中国4株HGV在7384位发生了由C→T的变异,从而导致一个共同的保守位点的产生(由F→A)。重叠感染其他肝炎病毒时 ...
夏宁邵   +5 more
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