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丙型肝炎病毒基因高变区(E1,E2/NS1)的分子克隆及基因型鉴定

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1995
对广东省一个患者血清中的丙型肝炎病毒(HCV)基因高变区进行分子克隆及基因型鉴定。采用微粒吸附法提取HCVRNA,随机引物逆转录后进行聚合酶链反应(PCR)。所用引物位于E1,E2/NS1区,扩增产物806bp,产物提纯后定向插入pBV220质粒载体,重组体转染DH5α菌株,筛选菌落经增殖后碱变性法提取质粒,再通过PCR及酶切法鉴定阳性克隆。我们还用酶切法对此株克隆的基因型作了初步鉴定,证明属于1组Ⅱ型。
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人肝癌组织和外周血中甲胎蛋白基因片段扩增及临床应用

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2003
目的 研究外周血肝癌发生相关甲胎蛋白 (AFP)基因在肝癌早期诊断和鉴别诊断中的价值。方法 :从肝癌组织和肝病患者外周血中制备总RNA ,经随机引物和逆转录酶作用合成cDNA ,再以逆转录巢式聚合酶链反应 (RT -PCR)扩增AFP基因 ,并分析其临床价值。结果 RT -巢式PCR扩增的AFP基因片段为 15 9bp ,与原设计一致 ;在 2 0份肝癌及其癌周和远癌组织中 ,AFP基因阳性率分别为 10 0 %、6 5 %和 0 % ;肝癌患者外周血AFP基因检出率为 5 3.7% ,明显高于肝硬化 ...
杨大明   +5 more
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心衰鼠肺水通道蛋白表达变化及内皮素受体拮抗剂对其的影响 [PDF]

open access: yes, 2002
【目的】观察充血性心力衰竭大鼠肺组织水通道蛋白(Aquaporins, AQP)表达的变化及选择性内皮素受体A(endo thelin recepto r A , ETA)拮抗剂FR139317 对其的影响。【方法】40 只行左冠状动脉结扎致心肌梗死的大鼠随机分为心衰组 和心衰治疗组, 心衰治疗组予以FR139317 每天1 mg/kg 皮下注射, 共6 周, 另7 只接受假手术的大鼠组成空白对照组。测定 血液动力学参数, 放射免疫法(RIA)测血浆内皮素-1 浓度, 逆转录-聚合酶链反应(RT ...
刘英梅, 张旭明, 陈筱潮
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Effects of matrine on collagen proliferation and TNF-α, TGF-β1 and CTGF in atrial tissues of dogs with persistent atrial fibrillation [PDF]

open access: yes
目的 探讨苦参碱对犬心房颤动(房颤)心房肌组织中胶原合成以及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和结缔组织生长因子(connective Tissue Growth Factor,CTGF)表达变化的影响。方法 健康比格犬10只采用快速右心室起搏造房颤模型,随机分成房颤组和房颤+苦参碱组各5只。采用天狼星红染色,计算胶原容积分数(collagen volume ...
Dai, You-ping   +4 more
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人肝癌组织和外周血中甲胎蛋白基因片段扩增及临床应用 附视频

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2003
目的 研究外周血肝癌发生相关甲胎蛋白 (AFP)基因在肝癌早期诊断和鉴别诊断中的价值。方法 :从肝癌组织和肝病患者外周血中制备总RNA ,经随机引物和逆转录酶作用合成cDNA ,再以逆转录巢式聚合酶链反应 (RT -PCR)扩增AFP基因 ,并分析其临床价值。结果 RT -巢式PCR扩增的AFP基因片段为 15 9bp ,与原设计一致 ;在 2 0份肝癌及其癌周和远癌组织中 ,AFP基因阳性率分别为 10 0 %、6 5 %和 0 % ;肝癌患者外周血AFP基因检出率为 5 3.7% ,明显高于肝硬化 ...
杨大明   +16 more
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江苏省部分地区散发戊型肝炎流行病学及病毒基因型 [PDF]

open access: yes, 2010
目的了解江苏省部分地区散发戊型肝炎病例的流行特征及病毒基因型。方法在江苏省部分地区开展为期一年戊型肝炎病例监测,用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosor-dent assay,ELISA)对各医疗单位报告的急性肝炎病例进行血清学分型,对其中确诊为急性戊型肝炎病例进行流行病学分析以及戊型肝炎病毒(hepatits E virus,HEV)RNA检测和序列分析。结果男女戊型肝炎病例比例为4.4∶1,84.0%的病例集中在40岁及以上的年龄组,全年均有戊型肝炎病例发生,70.5 ...
夏宁邵   +6 more
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Influence and underlying mechanism of Prothymosin alpha on skin wound healing of normal and DM mice via MMP-9 /TIMP-1/Nrf2 [PDF]

open access: yes, 2012
国内外研究表明,胸腺素a原(ProTa)具有调节免疫系统、抗氧化、抗感染、抗炎症、抗凋亡、促进细胞分裂、增殖的功能,这为我们开展ProTa在正常、糖尿病(diabetesmellitus,DM)鼠皮肤受创后的作用及机理的研究提供了理论依据。 基质金属蛋白酶-9(MMP-9)是一种IV型胶原酶,在急性伤口的早期愈合过程中高表达随后下降至正常水平,在整个伤口愈合中发挥着巨大的作用。组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)是MMP-9的特异性抑制剂,在许多细胞因子的分泌和增殖中作用很大 ...
张亭
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热变性法处理HCVRNA模板直接扩增

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1994
采用低浓度2-巯基乙醇作为裂解剂,配合高热变性处理血清等标本中丙型肝炎病毒核酸(HCVRNA)模板,将裂解上清直接逆转录,使HCVRNA转变为cDNA,再行套式多聚酶链反应(PCR)扩增.58份抗-HCV阳性血清标本中,可检出32份(55.2%)HCVRNA,虽与常规的酸胍酚抽提方法所检出相当(即30份被检出HCVRNA阳性,51.7%),由于这种直接法省去了用酚及氯仿抽提和醇类沉淀等步骤,具有明显的实用价值。
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实时荧光定量RT-PCR检测siRNA表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA的表达

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2011
目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测小干扰RNA(siRNA)表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术。方法体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250 mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250 mRNA的表达情况。结果四条siRNA分别使G250 mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%
赵俊峰   +5 more
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The important role of Rbm24 and preliminary screening of related signaling molecules in cardiac cells [PDF]

open access: yes, 2014
目的研究Rbm24在心肌分化和心肌细胞中作用的分子机制,寻找Rbm24的靶标mRNA及与其相互结合的蛋白,揭示Rbm24在干细胞心肌分化过程中的作用,为探讨Rbm24敲低而导致心肌收缩受损的心肌病的相关信号通路提供一定的研究依据,并为心肌病的治疗提供一个重要的新靶点。 方法首先,通过qRT-PCR检测Rbm24在ESC分化过程的表达情况。同时,采用Westernblot免疫印迹分析结合细胞免疫荧光染色检测Rbm24在原代心肌细胞、H9C2细胞系、C2C12细胞系的表达情况。然后 ...
黄越
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