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慢病毒介导的Clusterin基因沉默抑制肾癌786-O细胞增殖并促进细胞凋亡

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2012
【目的】 应用慢病毒介导的RNA干扰技术,检测clusterin(CLU)基因沉默在人肾癌786-O细胞的干扰效果及其对人肾癌786-O细胞增殖?迁移和凋亡的影响?【方法】 构建靶向CLU基因的慢病毒干扰载体,利用包装细胞293T获得重组慢病毒,感染人肾癌786-O细胞株?实验分5组:CLU-RNAi-LV1(KD1)?CLU-RNAi-LV2(KD2)?CLU-RNAi-LV3(KD3)为加入靶向CLU基因的慢病毒感染的肾癌细胞组,未处理的慢病毒感染的肾癌细胞组(NC组),肾癌786 ...
doaj  

siRNA对VEGFR2的表达抑制及对HL60细胞和人内皮细胞的影响

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006
【目的】为探索治疗白血病的新思路研究了小干扰RNA(siRNA)对肿瘤细胞株HL60和人血管内皮细胞(EC)株EA·hy926血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)基因表达的抑制作用。【方法】制备并筛选VEGFR2基因的最有效siRNA,并据此设计shRNA寡核苷酸链,构建pENTR^TM/U6干扰表达载体。瞬时转染细胞.采用MTF法、RT-PCR法及Western blot测定VEGFR2表达抑制情况。【结果】VEGFR2 siRNAa、b、c抑制HL60细胞效率分别为77.5%、45.0%、80.
郭海霞   +5 more
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小干扰RNA抑制PTTG基因对人胰腺癌细胞PANC-1侵袭能力的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的研究PTTG基因沉默对胰腺癌细胞侵袭力的影响,探讨其与胰腺癌细胞侵袭性的关系及调控机制。方法阳离子脂质体转染PTTG siRNA对PANC-1中的PTTG基因进行干扰;利用RT-PCR和Western blot技术检测其基因沉默效应;通过Transwell小室法测定PANC-1细胞侵袭能力的改变。结果转染PTTG siRNA后,PANC-1细胞中PTTG的mRNA转录和蛋白表达受抑,显著低于未经处理的PANC-1细胞 ...
王宁, 王冠军, 刘洁
doaj  

利用RNA干扰技术构建IER5-SiRNA-Hela细胞系

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2011
目的观察小干扰RNA(siRNA)转染Hela细胞后,对IER5基因抑制效果,筛选出高效的siRNA转染质粒。方法利用siRNA设计软件,将设计好的RNA片断插入到siRNA表达质粒载体PsilencerTM 3.1-H1 hygro中,测序正确后转染至Hela细胞中。利用Real-time PCR的方法 ,测定siRNA对Hela细胞中IRE5的抑制效果。结果在mRNA水平及Western blot测试,IER5-siRNA-Hela细胞的IER5基因mRNA表达抑制效果明显。从细胞形态上讲,IER5-
李莉   +8 more
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SIK2 shRNA重组腺病毒载体构建及其在3T3-L1脂肪细胞的表达

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2011
目的构建特异性小鼠盐诱导基因(Salt induced kinase2,SIK2)的shRNA腺病毒载体,干扰脂肪细胞中SIK2的表达。方法设计3对靶向SIK2的shRNA,插入穿梭质粒pENTR/U6载体,转染3T3-L1脂肪细胞,通过Real-timePCR方法筛选最佳沉默SIK2效果的穿梭质粒,经腺病毒同源重组后,重组小鼠SIK2shRNA腺病毒载体经脂质体转染HEK293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-SIK2-shRNA,并进行大量扩增和纯化。纯化的腺病毒感染成熟的3T3 ...
杜静   +5 more
doaj  

靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体的构建及鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的构建靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体质粒,为利用RNA干扰技术探索HIWI基因的作用的研究做准备。方法根据HIWI mRNA序列设计并合成shRNA寡核苷酸片段,退火形成双链并连接入pGenesil-2载体,并进行酶切鉴定和测序。结果酶切证明构建的shRNA已插入载体中,经测序证明与设计相同。结论成功构靶向HIWI基因的shRNA真核表达载体,为进一步研究HIWI基因在干细胞和肿瘤细胞中的作用机制及后续的体内外RNAi实验研究奠定了基础。
陈岐辉   +4 more
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维持性血液透析患者合并慢性丙型肝炎的治疗新体会

open access: yesLinchuang shenzangbing zazhi, 2013
目的 探讨苦参素治疗维持性血液透析患者合并慢性丙型肝炎的效果、不良反应。方法收集维持性血液透析合并慢性丙型肝炎患者26例,随机分为治疗组和对照组,每组13例。治疗组给予聚乙二醇干扰素α-2a 180μg,肌肉注射,每周1次,疗程6个月,联合苦参素葡萄糖注射液100 ml静滴3个月。对照组仅给予聚二醇干扰素α-2a 180μg,肌肉注射,每周1次,疗程6个月。观察治疗后12周、24周及停药后随访24周血清丙型肝炎病毒-RNA滴度中位数水平及丙型肝炎病毒-RNA阴转率,同时观察治疗前、后不良反应。结果 ...
doaj  

[Single-cell RNA sequencing of B cells reveals molecular typing in Sjögren syndrome]. [PDF]

open access: yesBeijing Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban
Lin W   +6 more
europepmc   +1 more source

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