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甘蓝型油菜G蛋白β亚基过量表达载体和RNA干扰载体的构建及遗传转化
四川大学学报. 自然科学版, 2013 构建了含甘蓝型油菜G蛋白β亚基BnGB1基因的过量表达载体pFGC5941-BnGB1和RNA干扰(RNAi)载体pFGC5941-Ri-BnGB1,将构建的两个载体分别经根癌农杆菌介导,转化甘蓝型油菜"R197"下胚轴外植体,经过外植体的预培养、共培养以及选择培养后,获得再生植株24株.经PCR鉴定,其中有1株为BnGB1基因过量表达转基因植株,2株为BnGB1基因RNA干扰转基因植株.RT-PCR结果显示,相对于野生型"R197"油菜,过表达转基因植株中的BnGB1基因的表达量提高 ...
张艺琼, 刘洋, 王茂林
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建基质金属蛋白酶-26（MMP-26）小干扰RNA（siRNA）表达质粒,以研究其对人肿瘤细胞MMP-26基因表达的沉默效果,探索肿瘤基因治疗的新途径。方法根据MMP-26基因mRNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列,克隆到空载体pSUPERIOR.puro中,构建重组质粒,同时设计构建分别针对GFP和-βactin的干扰质粒作为阴性对照和阳性对照,并进行酶切鉴定和测序分析。结果酶切及测序证实重组质粒构建成功。结论利用RNA干扰（RNAi）技术可成功构建siRNA表达载体。
张扬 +4 more
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, 2009 传统上,环境内分泌干扰物的研究对象主要是对动物生殖器官的作用。但是脊椎动物体内存在复杂的内分泌系统,来调节其生长发育及繁殖。本文从环境内分泌干扰物对生物完整内分泌系统的影响总结了最近的研究进展。内分泌干扰物可通过作用于下丘脑-脑垂体-性腺轴的内分泌系统途径,影响重要激素或者受体,并最终影响动物的繁殖;也可作用于下丘脑-脑垂体-甲状腺轴途径,影响甲状腺激素的合成、转运、结合等过程,破坏甲状腺激素内环境的稳定而对生长发育造成危害。环境污染物也可通过影响类固醇激素的合成途径 ...
史熊杰 +5 more
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HER2基因RNA干扰质粒对SK-BR-3细胞增殖及凋亡的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的探讨HER2基因高效RNA干扰质粒转染到SK-BR-3乳腺癌细胞后,对细胞的增殖及其凋亡的影响。方法采用脂质体转染法将针对HER2基因的高效RNA干扰质粒转染至乳腺癌细胞SK-BR-3中,通过细胞计数、MTT比色法、流式细胞术和Western blot检测PCNA增殖细胞核抗原,分析检测其对SK-BR-3细胞增殖、凋亡的影响。结果 MTT比色测定显示,HER2-shRNA2干扰质粒转染到SK-BR-3细胞后在48 h后现抑制,与空白对照组比抑制率分别为48 h 16.53%7、2h 39.03%9 ...
韩冬, 徐煌, 李文浩, 张成文
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, 2011 针对电机控制中外界的扰动因素,提出用干扰观测器来补偿扰动对伺服系统运行的影响。在对象的名义模型正确条件下,给出了干扰观测器和反馈控制器的设计方法。并从理论上保证了被控对象参数不确定时的鲁棒性 ...
蔺辉, 田新锋
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乳腺癌生存期相关长非编码 MAPT-AS1 及其共表达基因筛选与验证
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2019 【目的】筛选乳腺癌患者生存期相关差异表达长链非编码RNA（lncRNA）及其共表达基因，并验证其乳腺癌细胞中的表达情况。【方法】通过TCGA数据库筛选943例RNA-seq数据信息：（837例乳腺癌患者+106例正常对照），发现长非编码MAPT-AS1高表达，乳腺癌患者生存期更长。构建长非编码MAPT-AS1过表达和干扰质粒，将构建好的质粒转染乳腺癌细胞株T47D，并用嘌呤霉素筛选出稳定表达的T47D细胞株，通过RT-qPCR验证长非编码MAPT-AS1及其共表达基因的表达情况。【结果 ...
许家瑞 +6 more
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, 2004 本发明涉及重组蛋白质药物的生产，具体地说是一种从干扰素制剂中去除内毒素的方法，将壳聚糖，或去氧胆酸钠，或己二胺作为亲和配基，共价结合到多孔介质上，以动态过滤或静态吸附的方式进行操作，用以去除重组干扰素制剂中的内毒素；其中亲和配基在多孔介质上的量为含氮量0.02％～3％。本发明方法内毒素去除率高，干扰素活性回收率高；特异性好，适合生产的要求；实用范围广，前景好 ...
邵英光 +3 more
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低表达长非编码RNA MALAT1对人宫颈癌HeLa细胞体外生长和迁移的影响
四川大学学报. 自然科学版, 2015 设计3个针对MALAT1不同靶序列的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),筛选出有效的siRNA序列,设计并构建短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰质粒,转染到HeLa细胞中,构建低表达MALAT1的稳定细胞株.通过细胞的生长曲线和细胞划痕实验验证降低MALAT1对HeLa细胞增殖和迁移的影响.结果显示MALAT1表达水平在HeLa细胞中得到有效地降低,低表达MALAT1的HeLa细胞生长速度和迁移速度减小 ...
齐文川, 李骞, 吴传芳
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, 1999 研究了岷江上游大沟流域内的人为干扰体，分析了干扰的类型、强度、频率及其时空变化特征，揭示了不同干扰类型及其特性对植被退化的作用、干扰体与人口增长、植被退化等的关系．结果表明：大沟流域人为干扰类型多达８种，但优势的干扰类型是砍伐薪材和牲畜放牧．从近３０ａ的干扰强度变化看，以８０年代初的干扰强度最大，并在近２０ａ内保持很高的干扰强度水平；干扰强度的年内变化表现为春末、夏、秋大而冬、早春小．近４０ａ来的干扰频率愈趋增高，年内表现为春秋季干扰频率最高，夏季中等，而冬季最小．人为干扰的空间差异十分明显 ...
刘照光, 包维楷,刘照光
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的利用小片段干扰RNA（siRNA）在肝癌细胞内诱导RNA干扰（RNAi）,抑制细胞间粘附分子-1（ICAM-1）基因表达,在体外进行RNAi对肝癌治疗的实验研究。方法根据ICAM-1基因设计shRNA片断,构建pGenesil-1/ICAM-1表达载体,转入E.coli菌,并用Lipofectamine tm2000转染HepG2细胞,通过MTT方法检测细胞活性状态,应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞中ICAM-1基因蛋白质表达抑制情况。结果本实验已成功构建了针对ICAM-1基因的pGenesil ...
廖维甲 +5 more
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