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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建基质金属蛋白酶-26（MMP-26）小干扰RNA（siRNA）表达质粒,以研究其对人肿瘤细胞MMP-26基因表达的沉默效果,探索肿瘤基因治疗的新途径。方法根据MMP-26基因mRNA序列,设计有小发夹结构的3条寡核苷酸序列,克隆到空载体pSUPERIOR.puro中,构建重组质粒,同时设计构建分别针对GFP和-βactin的干扰质粒作为阴性对照和阳性对照,并进行酶切鉴定和测序分析。结果酶切及测序证实重组质粒构建成功。结论利用RNA干扰（RNAi）技术可成功构建siRNA表达载体。
张扬 +4 more
doaj
, 2001 采用高精度差分格式求解非定常可压缩N-S方程,对激波－单涡／双涡相互干扰产生的声场进行了直接数值模拟.详细研究了波－涡干扰声场结构的早期发展阶段,将激波－单涡的计算结果和相应实验进行了对比,并给出近场声压的衰减规律.在此基础上模拟较为复杂的激波－双涡干扰 ...
马延文, 胡国庆, 傅德薰
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HER2基因RNA干扰质粒对SK-BR-3细胞增殖及凋亡的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的探讨HER2基因高效RNA干扰质粒转染到SK-BR-3乳腺癌细胞后,对细胞的增殖及其凋亡的影响。方法采用脂质体转染法将针对HER2基因的高效RNA干扰质粒转染至乳腺癌细胞SK-BR-3中,通过细胞计数、MTT比色法、流式细胞术和Western blot检测PCNA增殖细胞核抗原,分析检测其对SK-BR-3细胞增殖、凋亡的影响。结果 MTT比色测定显示,HER2-shRNA2干扰质粒转染到SK-BR-3细胞后在48 h后现抑制,与空白对照组比抑制率分别为48 h 16.53%7、2h 39.03%9 ...
韩冬, 徐煌, 李文浩, 张成文
doaj
, 2009 小干扰RNA(smallinterferingRNA;siRA)介导的RNA干扰(RNAinterference;RNAi)是近年来快速发展的一种转录后基因沉默(post-transcrptionalgenesilencing;PTGS)方法;已经成为一种重要的基因治疗手段。本研究以草鱼出血病病毒(GCRV)外壳蛋白基因VP7为靶基因;选择3个不同的siRNA位点;构建了3个草鱼H1基因启动子驱动的shRNA表达载体pH1siGCRV(X)-CMVeGFP及其对照表达载体pH1shHK-CWVeGFP ...
亚平, 朱作言, 胡炜, 陈芸汪
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乳腺癌生存期相关长非编码 MAPT-AS1 及其共表达基因筛选与验证
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2019 【目的】筛选乳腺癌患者生存期相关差异表达长链非编码RNA（lncRNA）及其共表达基因，并验证其乳腺癌细胞中的表达情况。【方法】通过TCGA数据库筛选943例RNA-seq数据信息：（837例乳腺癌患者+106例正常对照），发现长非编码MAPT-AS1高表达，乳腺癌患者生存期更长。构建长非编码MAPT-AS1过表达和干扰质粒，将构建好的质粒转染乳腺癌细胞株T47D，并用嘌呤霉素筛选出稳定表达的T47D细胞株，通过RT-qPCR验证长非编码MAPT-AS1及其共表达基因的表达情况。【结果 ...
许家瑞 +6 more
doaj
, 2008 RNA干扰(RNAi)是个古老而保守的机制,其作用如同“基因组的免疫系统”,广泛存在于真核生物真菌、植物、动物中,是天然的抵御病毒侵袭的系统.植物病毒在和植物长期而复杂的协同进化中,为了生存繁殖,提高自身复制、运动、感染寄主的能力,也演化出了对付宿主沉默反应的机制,即反干扰机制.目前的研究表明,病毒编码沉默抑制子是反干扰机制的最主要方式.本文主要就病毒编码的沉默抑制子作用特点和功能进行了概述.并介绍了缺损干扰RNA及卫星RNA的特殊复杂二级结构、快速复制与运动躲避沉默信号等反干扰机制 ...
乔定君, 黄维藻, 马欣荣
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低表达长非编码RNA MALAT1对人宫颈癌HeLa细胞体外生长和迁移的影响
四川大学学报. 自然科学版, 2015 设计3个针对MALAT1不同靶序列的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),筛选出有效的siRNA序列,设计并构建短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)干扰质粒,转染到HeLa细胞中,构建低表达MALAT1的稳定细胞株.通过细胞的生长曲线和细胞划痕实验验证降低MALAT1对HeLa细胞增殖和迁移的影响.结果显示MALAT1表达水平在HeLa细胞中得到有效地降低,低表达MALAT1的HeLa细胞生长速度和迁移速度减小 ...
齐文川, 李骞, 吴传芳
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, 2010 干扰素调节因子是在研究干扰素转录调控时发现的[1]。到目前为止,在哺乳动物和鸟类中共发现10种干扰素调节因子IRF-1—10。一般认为干扰素调节因子(IRF)通过调节干扰素的表达而行使其抗病毒、应激、免疫调节等功能[2,3]。近年来,研究人员发现IRF在细胞凋亡 ...
聂品 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的利用小片段干扰RNA（siRNA）在肝癌细胞内诱导RNA干扰（RNAi）,抑制细胞间粘附分子-1（ICAM-1）基因表达,在体外进行RNAi对肝癌治疗的实验研究。方法根据ICAM-1基因设计shRNA片断,构建pGenesil-1/ICAM-1表达载体,转入E.coli菌,并用Lipofectamine tm2000转染HepG2细胞,通过MTT方法检测细胞活性状态,应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞中ICAM-1基因蛋白质表达抑制情况。结果本实验已成功构建了针对ICAM-1基因的pGenesil ...
廖维甲 +5 more
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, 2006 古尔班通古特沙漠作为北疆冬季牧场,普遍承受牲畜的践踏干扰,研究表明:动物践踏干扰导致各种类型生物结皮的覆盖度有不同程度的降低,干扰主要集中于结皮层(0~2 cm)。微生物各类群对践踏干扰的反应具差异性,真菌与干扰的相关性最高,细菌和放线菌对干扰不敏感。践踏干扰改变了微生物各类群在垄间低地的数量垂直分布格局,但并未改变微生物区系组成。有机质对干扰不敏感,仍随土层加深而递减,在结皮层(0~2 cm ...
梁少民 +4 more
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