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HER2基因RNA干扰质粒对SK-BR-3细胞增殖及凋亡的影响
目的探讨HER2基因高效RNA干扰质粒转染到SK-BR-3乳腺癌细胞后,对细胞的增殖及其凋亡的影响。方法采用脂质体转染法将针对HER2基因的高效RNA干扰质粒转染至乳腺癌细胞SK-BR-3中,通过细胞计数、MTT比色法、流式细胞术和Western blot检测PCNA增殖细胞核抗原,分析检测其对SK-BR-3细胞增殖、凋亡的影响。结果 MTT比色测定显示,HER2-shRNA2干扰质粒转染到SK-BR-3细胞后在48 h后现抑制,与空白对照组比抑制率分别为48 h 16.53%7、2h 39.03%9 ...
韩冬, 徐煌, 李文浩, 张成文
doaj
The Role of BIN1 in Alzheimer’s Disease [PDF]
阿尔茨海默症(Alzheimer’sdisease,AD)是与年龄相关的神经退行性疾病,其主要的病理学特征为由β-淀粉样蛋白(-amyloid,Aβ)聚集产生的老年斑(senileplaues,SP)以及由异常磷酸化的tau蛋白组成的神经纤维缠结(neurofibrillarytangles,NFTs)。Aβ是由淀粉样前体蛋白(-amyloidprecursorprotein,APP)经过β-分泌酶和γ-分泌酶的依次顺序剪切而产生 ...
牛萌萌
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乳腺癌生存期相关长非编码 MAPT-AS1 及其共表达基因筛选与验证
【目的】筛选乳腺癌患者生存期相关差异表达长链非编码RNA(lncRNA)及其共表达基因,并验证其乳腺癌细胞中的表达情况。【方法】通过TCGA数据库筛选943例RNA-seq数据信息:(837例乳腺癌患者+106例正常对照),发现长非编码MAPT-AS1高表达,乳腺癌患者生存期更长。构建长非编码MAPT-AS1过表达和干扰质粒,将构建好的质粒转染乳腺癌细胞株T47D,并用嘌呤霉素筛选出稳定表达的T47D细胞株,通过RT-qPCR验证长非编码MAPT-AS1及其共表达基因的表达情况。【结果 ...
许家瑞 +6 more
doaj
Induction of Nur77-dependent apoptotic pathyway by Apaensin through activation of JNK and P38MAPK and high content screen model of nulear receptor modulators [PDF]
第一章主要介绍香豆素类衍生物通过激活p38和JNK通路调控Nur77依赖的细胞凋亡。香豆素化合物是从植物中提取的天然产物,具有包括抗肿瘤效应在内的广泛药理学活性,但这类化合物的抗肿瘤活性作用机制还不太为人所知。在本文中,我们首次发现香豆素类化合物Apaensin可以诱导肿瘤细胞凋亡,这种凋亡效应是通过激活JNK和p38MAPK激酶调控Nur77-Bcl-2凋亡信号通路实现的。我们发现在用JNK和p38抑制剂抑制JNK和p38MAPK的表达后,Apaensin所诱导的肿瘤细胞凋亡效应有所减弱 ...
赵伟
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目的利用小片段干扰RNA(siRNA)在肝癌细胞内诱导RNA干扰(RNAi),抑制细胞间粘附分子-1(ICAM-1)基因表达,在体外进行RNAi对肝癌治疗的实验研究。方法根据ICAM-1基因设计shRNA片断,构建pGenesil-1/ICAM-1表达载体,转入E.coli菌,并用Lipofectamine tm2000转染HepG2细胞,通过MTT方法检测细胞活性状态,应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞中ICAM-1基因蛋白质表达抑制情况。结果本实验已成功构建了针对ICAM-1基因的pGenesil ...
廖维甲 +5 more
doaj
CRISPR/Cas9 mediated genome editing and construction of sgRNA efficiency testing system in C. elegans [PDF]
CRISPR/Cas9做为第三代人工核酸内切酶,由于其操作简单、特异性强、及效率高的特性,目前已被广泛用于多种生物的基因组编辑。CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术不仅可以用于基因敲除,而且也可以用于精确的基因插入,成为基因功能研究非常有前途的工具。在短短的两年里,已有二十几篇文章先后报道了在秀丽隐杆线虫中利用CRISPR/Cas9对不同基因进行的精确编辑。 本研究中,我们利用CRISPR/Cas9系统,通过Cas9切割导致DNA断裂诱导同源重组,在对dpy-13基因敲除的同时,成功进行了1 ...
张丹丹
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目的研究RNA干扰(RNAi)对BEL7402细胞的N-ras基因表达的干扰效应。方法建立装载靶向N-ras基因小干扰性RNA(siRNA)的表达载体;用脂质体法将此表达载体转染BEL7402细胞株,以转染空载细胞作为对照;采用RT-PCR和Western blot检测N-ras基因的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果转染siRNA的表达载体可以抑制内源N-ras基因在转录和转译上的表达。N-ras基因的表达抑制与BEL7402细胞的凋亡相关联。结论转染siR ...
赵岳 +4 more
doaj
c-Src promotes tumor cell proliferation by activating HK2 [PDF]
大多数肿瘤细胞即使在氧气充足的情况下依然主要靠糖酵解方式提供能量,这就是著名的Warburg效应,它是肿瘤代谢的一个重要特征。己糖激酶(hexokinase,HK)是糖酵解过程中的第一个限速酶。在哺乳动物体内,HK主要有四种亚型,即HK1、HK2、HK3和HK4,其中HK2与肿瘤的关系最为密切。目前研究表明Warburg效应的发生与原癌基因(如Ras,c-Myc,HIF-1)的过度激活和抑癌基因(如p53)的失活密切相关。c-Src是哺乳动物中最早发现的原癌基因 ...
王随利
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The Effects and Mechanisms of JMJD1A on Colorectal Tumorigenesis [PDF]
结直肠癌(colorectalcancer,CRC)是当今世界高发恶性肿瘤之一,多数由散发腺瘤阶段性发展而来,少数结肠癌的发生呈家族性聚集现象或由炎性肠病诱导发生。对结肠癌的早期筛查与诊断是结肠癌防治重点,由于结肠癌患者个体间差异性大,对靶向药物的开发是未来结肠癌治疗的重要辅助手段。 组蛋白去甲基化酶JMJD1A(Jumonjidomaincontaining1A)通过羟基化作用使组蛋白赖氨酸去甲基进而行使转录调节功能,参与精子生成、能量代谢、干细胞更新调控,也参与低氧诱导下的肿瘤调控 ...
苗萌萌
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【目的】以人包皮成纤维细胞(HFF)为模型,通过系统比较针对不同靶点的小干扰RNA(siRNA)对酸性鞘磷脂酶1(SMPD1)基因的沉默效果,筛选获得最有效的小干扰RNA序列,同时观察沉默SMPD1对细胞凋亡的保护作用。【方法】设计合成三对靶向SMPD1基因的小干扰RNA作为实验组,同时设立阴性对照组和脂质体组(lipofectamine 2000),瞬时转染原代培养的HFF细胞,采用荧光定量RT-PCR法及Western blot测定SMPD1表达抑制情况,并用化疗药物丝裂霉素诱导细胞凋亡 ...
高军, 周灿权, 张仁礼, 马芸
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