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目的研究RNA干扰(RNAi)对BEL7402细胞的N-ras基因表达的干扰效应。方法建立装载靶向N-ras基因小干扰性RNA(siRNA)的表达载体;用脂质体法将此表达载体转染BEL7402细胞株,以转染空载细胞作为对照;采用RT-PCR和Western blot检测N-ras基因的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果转染siRNA的表达载体可以抑制内源N-ras基因在转录和转译上的表达。N-ras基因的表达抑制与BEL7402细胞的凋亡相关联。结论转染siR ...
赵岳 +4 more
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对紫外线灭活的草鱼出血病病毒(GCHV)F9株,在几种鲤科鱼类培养细胞中诱导产生干扰素的能力及影响干扰素产量的各因素进行了研究。纯化的GCHV在紫外线照射5分钟丧失感染性,但获得了在CAB等5种鲤科鱼类培养细胞中高效诱导产生干扰素的能力。干扰素的诱导需要病毒高复数感染细胞。干扰素主要在诱导后14小时内产生。培养上清中的新生牛血清对干扰素的产量有抑制作用,而在pH6.2~7.8范围内对干扰素产量无明显影响。诱导温度和细胞年龄对诱导产量有明显的影响。用紫外线灭活的GCHV在鱼类培养细胞中诱导干扰素时 ...
王铁辉,张义兵,李戈强,易泳兰,刘汉勤,朱作言
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【目的】以人包皮成纤维细胞(HFF)为模型,通过系统比较针对不同靶点的小干扰RNA(siRNA)对酸性鞘磷脂酶1(SMPD1)基因的沉默效果,筛选获得最有效的小干扰RNA序列,同时观察沉默SMPD1对细胞凋亡的保护作用。【方法】设计合成三对靶向SMPD1基因的小干扰RNA作为实验组,同时设立阴性对照组和脂质体组(lipofectamine 2000),瞬时转染原代培养的HFF细胞,采用荧光定量RT-PCR法及Western blot测定SMPD1表达抑制情况,并用化疗药物丝裂霉素诱导细胞凋亡 ...
高军, 周灿权, 张仁礼, 马芸
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目的构建Nogo受体基因干扰RNA表达载体,为促进中枢神经轴突的再生、探索临床治疗脊髓损伤新途径奠定基础。方法GeneBank中NgR的序列,应用www.invitrogen.com网站的设计软件设计、合成NgR miRNA的相应Oligo DNA,与BLOCK-iT Poll miR RNAi Expression Vector相连接,转化感受态Eco.li TOP10。结果限制性内切酶BamHⅠ和XhoⅠ酶切、测序鉴定重组载体BLOCK-iT Poll miR RNAi/NgR,显示NgR ...
王朝鲁, 孙红辉, 杨有庚
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siRNA对骨肉瘤U2OS细胞株MDM2-mRNA表达的抑制作用
目的研究载体介导的siRNA(small interfere RNA)技术对骨肉瘤细胞株U2OS中MDM2-mRNA表达的抑制作用。方法依据设计siRNA的原则,以MDM2为靶基因设计并合成有小发夹结构的两条DNA序列,经退火成互补双链,再克隆到载体PGCsilencerTM中构建重组体(PGCsilencerTM-MDM2 siRNA)。实验分转染重组质粒组,转染阴性对照质粒组和只加脂质体的空白组;RT-PCR法观察U2OS细胞中MDM2-mRNA表达改变 ...
吕佳音 +5 more
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为了为三维进气道的设计提供有用的分析数据,对高超声速和超声速来流下三维进气道内激波干扰进行了理论和数值研究。进气道模型选取"箱式"以及三面侧压进气道作为研究对象。理论分析采用了"空间降维"方法,即将进气道各个角落处的三维双楔定常激波干扰问题转换为二维非定常激波干扰问题,并利用激波动力学对其进行求解。数值验证方法利用2阶NND差分格式求解三维无粘欧拉方程,网格数量为1200多万,并采用MPI并行进行计算。该理论分析方法很好地对进气道各个角落处的激波干扰波系结构进行了判别 ...
汪运鹏, 姜宗林, 王春, 项高翔
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高山林线是一类典型的生态交错带,因其特殊的结构和功能以及对外界环境的高度敏感性而成为全球气候变化研究的热点之一。本文简要介绍了高山林线的相关概念及其界定,从高山林线海拔位置波动、植被格局变化、生态交错带物种组成变化及其生理生态特征变化等几个方面阐述了干扰对高山林线再形成过程的不同影响,总结了高山林线物种对干扰的两种基本响应方式,即退行和入侵。认为人为干扰在一定程度上弱化了当前气候变暖对高山林线波动的影响,因而在不同地区必须紧密结合当地可能的干扰来讨论高山林线的波动 ...
吴宁, 罗鹏, 易绍良, 方近圻
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目的探讨RNA干扰技术沉默胰岛素生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)对胶质瘤细胞株U251增殖、凋亡的影响,为胶质瘤的基因治疗提供一个可选择的靶点和方法。方法构建靶向IGFBP-2基因的RNAi表达载体;采用脂质体法将siRNA转染U251细胞,设非特异的siRNA阴性对照组和未转染siRNA的阴性对照组;采用RT-PCR法半定量检测siRNA对IGFBP-2基因表达的抑制作用;用MTT法测定U251细胞增殖变化;流式细胞术检测siRNA诱导细胞凋亡作用。结果构建的RNAi表达载体抑制了IGFBP ...
许淑芬 +6 more
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本发明公开一种能隔离强脉冲干扰的测控系统,该系统包括:压力变送器,与放电腔相连,负责放电电路对腔内气体放电时,对放电腔内的气体压力进行测量;隔离电路,与压力变送器的输出端相连,对输出的电信号进行采样,使输入和输出信号电隔离,并实现输入和输出的线性转换;采集系统,与隔离电路的输出端相连,把隔离电路输出的无干扰信号采集到计算机系统中,并通过测控软件显示出来。本发明通过对高功率脉冲放电期间,对耦合到测试信号传输线的干扰信号的隔离,有效的减少了强脉冲干扰的幅度,阻止了强脉冲干扰信号对测试系统的损害 ...
多丽萍 +6 more
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本文应用生物信息学和RT-PCR方法分别获得了三角褐指藻两个PEPC全长cDNA,分别称为:PtPEPC1和PtPEPC2,前者完整开放阅读框3030bp,编码1009个氨基酸,后者完整开放阅读框2634bp,编码877个氨基酸;基于克隆所得PtPEPC的ORF构建了反向互补RNA干扰载体pPha-PtPEPC1RNAi和pPha-PtPEPC2RNAi,并用轰击法(PDS-1000/He)转化野生型三角褐指藻,筛选鉴定到了所需的阳性转基因藻;实时定量RT-PCR结果揭示:含PtPEPC ...
冷鹂 +6 more
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