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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的评价靶向Hiwi基因的shRNA表达载体的干扰效果。方法通过构建靶向Hiwi基因的短发夹RNA（shout-hairpin RNA,shRNA）真核表达载体pGenesil-2-Hiwi1和pGenesil-2-Hiwi2263,并以pGenesil-2-control为阴性对照,转染膀胱癌T24细胞,从mRNA和蛋白水平观察3种干扰载体的干扰效率。结果pGenesil-2-Hiwi1和pGenesil-2-Hiwi2263组膀胱癌T24细胞Hiwi mRNA与GAPDH灰度比值较Normal ...
陈岐辉 +4 more
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建靶向增强型绿色荧光蛋白基因（EGFP）的RNA干扰质粒载体。方法设计并合成针对EGFP编码区的模板寡核苷酸单链,克隆入pSilencerTM 3.1-H1 neo载体中,对重组质粒进行酶切鉴定和DNA序列测定。结果重组质粒经限制性内切酶酶切得到66 bp和4.3 kb条带;重组阳性克隆测序结果与实验设计的模板寡核苷酸序列相符。结论成功构建靶向EGFP的RNA干扰表达载体,为RNA干扰技术在实验室的进一步开展奠定基础。
干惠珠 +5 more
doaj
, 2016 为了研究激波与旁路转捩边界层的干扰机理,采用直接数值模拟(DNS)方法对来流马赫数Ma∞=2.9,24°压缩拐角内激波与转捩边界层的相互作用进行了系统的研究。考察了旁路转捩干扰下压缩拐角内分离区形态和激波波系结构的典型特征。比较了转捩干扰与湍流干扰流动结构的差异,并分析了造成差异的原因。研究了拐角内转捩边界层的演化特性,探讨了转捩干扰下脉动峰值压力和峰值摩阻的分布规律及形成机制。研究结果表明:相较于湍流干扰,两侧发卡涡串的展向挤压使得分离区起始点以V字型分布,且分离激波沿展向以破碎状态为主 ...
童福林 +4 more
core
Novel endoribonucleases as central players in various pathways of eukaryotic RNA metabolism [PDF]
, 2010 For a long time it has been assumed that the decay of RNA in eukaryotes is mainly carried out by exoribonucleases, which is in contrast to bacteria, where endoribonucleases are well documented to initiate RNA degradation.
Andrzej Dziembowski +3 more
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Cdc42-shRNA表达载体的构建及在肝癌细胞株的沉默效果
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建Cdc42-shRNA真核表达载体。方法合成Cdc42的基因干扰序列并定向插入到RNA干扰（RNAi）真核表达载体pGenesil-1质粒,通过测序进行鉴定。干扰质粒经脂质体Lipofectamine2000介导转染肝癌细胞,Westernblot方法检测沉默效率。结果测序证明干扰序列完全正确,Westernblot结果显示Cdc42-shRNA对肝癌细胞株内源性Cdc42有较好的沉默效果。结论成功构建了Cdc42-shRNA真核表达载体,为进一步研究Cdc42在基因治疗中的作用奠定基础。
解英俊 +3 more
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2016 目的构建重组HDAC1基因的短发夹RNA（shRNA）慢病毒干扰质粒并研究其对卵巢癌COC1细胞HDAC1表达的影响。方法针对HDAC1基因设计特异性siRNA靶点,构建慢病毒干扰质粒载体,筛选获得的有效shRNA慢病毒干扰序列,将其转染卵巢癌COC1细胞。采用Real-time PCR方法检测靶基因在mRNA水平的沉默效果,Western blot方法检测靶基因在蛋白质水平的沉默效果。结果构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确 ...
贾妍, 邹颖刚, 许天敏, 崔满华
doaj
, 1990 对不可压缩层流二维干扰流动,本文提出一个干扰流动(IF)理论。IF理论要点为:1)干扰流动沿主流的法向被分为三层即粘性层、干扰层和无粘层,引进了法向动量交换为主导过程的干扰层概念。2)利用力学守恒律、三层匹配关系及文中引进的干扰模型,把三层的空间尺度及惯性-粘性诸力的数置级表示为单参数m的函数 ...
高智
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甘蓝型油菜G蛋白β亚基过量表达载体和RNA干扰载体的构建及遗传转化
四川大学学报. 自然科学版, 2013 构建了含甘蓝型油菜G蛋白β亚基BnGB1基因的过量表达载体pFGC5941-BnGB1和RNA干扰(RNAi)载体pFGC5941-Ri-BnGB1,将构建的两个载体分别经根癌农杆菌介导,转化甘蓝型油菜"R197"下胚轴外植体,经过外植体的预培养、共培养以及选择培养后,获得再生植株24株.经PCR鉴定,其中有1株为BnGB1基因过量表达转基因植株,2株为BnGB1基因RNA干扰转基因植株.RT-PCR结果显示,相对于野生型"R197"油菜,过表达转基因植株中的BnGB1基因的表达量提高 ...
张艺琼, 刘洋, 王茂林
doaj
Zhongguo cuzhong zazhi目的 探究甲基转移酶3（methyltransferase 3，METTL3）对人脑血管平滑肌细胞（human brain vascular smooth muscle cells，HBVSMC）基因表达以及增殖和迁移功能的影响。 方法 采用小干扰RNA（small interfering RNA，shRNA）干扰技术，构建METTL3基因干扰载体并通过腺病毒感染HBVSMC，依据感染情况将其分为空白组（无病毒感染）、对照组（空载病毒感染）和干扰组（METTL3-shRNA病毒感染 ...
孟晨曦1，孙洪英2，张佳2，毛戬2，杨阳3，策乐木格3 (MENG Chenxi1, SUN Hongying2, ZHANG Jia2, MAO Jian2, YANG Yang3, Celemuge3 )
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, 2011 干扰素反应在脊椎动物抵抗病毒感染过程中发挥重要作用。近年来,鱼类干扰素抗病毒免疫反应的研究取得了重要进展,不仅克隆鉴定了一系列鱼类干扰素系统基因,而且通过功能研究揭示了鱼类具有类似于高等哺乳类的干扰素反应。但是,鱼类干扰素反应及分子调控具有自身特点 ...
张义兵, 桂建芳
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