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实时荧光定量RT-PCR技术检测siRNA对HBV复制的干扰效果
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的运用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测小RNA分子（small interfering RNAs,siRNA）对乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）复制的抑制作用。方法在HepG2.2.15细胞内导入筛选的三条特异抗HBV的siRNA分子,用实时荧光定量RT-PCR的方法,检测干扰后HBV的mRNA表达水平。结果导入特异siRNA分子的细胞中HBV的mRNA表达量明显降低。结论实时荧光定量RT-PCR技术能准确可靠的检测mRNA的表达水平 ...
陈小卫, 焦京, 周美娟, 丁振华
doaj
The structural analysis and functional study of the interaction between Hepatitis B virus X protein BH3-like domain and Bcl-xL protein [PDF]
, 2016 乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus，HBV)感染是全球性的医疗难题，慢性HBV感染可大大增加感染者罹患原发性肝细胞癌(HCC)的风险。HBx蛋白是HBV基因组表达的一种多功能蛋白，在HBV的生命周期及其致HCC过程中发挥重要作用。此前研究表明，HBx可通过其序列中的BH3基序结构域与宿主细胞的Bcl-2/Bcl-XL蛋白相互作用，导致细胞凋亡，并同时提高细胞内Ca2+浓度，进而增强HBV复制，提示这一相互作用可能是HBx发挥功能效应的重要机制。本研究主要对HBx蛋白BH3结构域与Bcl ...
张莹
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使用FLAG标签肽及慢病毒载体共同筛选小鼠foxp3基因RNA干扰的有效靶点
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】筛选高效的foxp3 RNA干扰的靶点用于阻断CD4^＋CD25^＋ Treg细胞的免疫抑制功能。【方法】使用oligoengine软件设计foxp3基因shRNA序列，化学合成法合成4条shRNA序列，构建含foxp3的靶序列的慢病毒载体：构建出表达FLAG融合蛋白和目的基因的工具细胞293T细胞用于筛选RNA干扰的有效靶点。【结果】成功包装了4条foxp3基因靶序列相应的慢病毒颗粒；成功构建了表达融合蛋白和目的基因的293T工具细胞：在工具细胞上筛选出了2条RNAi效率分别为91.3％和95．
史艳侠 +5 more
doaj
Molecular mechanisms of cell death induced by matrine in human cholangiocarcinoma Cells [PDF]
, 2016 胆管癌是起源于胆管上皮的一种恶性肿瘤，在我国发病率和死亡率逐年上升。而胆管癌细胞抵抗凋亡是导致胆管癌化疗失败的重要原因，所以研发能够诱导胆管癌细胞以不发生凋亡的死亡新途径的化疗药显得十分重要。苦参碱具有多途径、多种机制的抗肿瘤活性，已经证实能够诱导多种肿瘤细胞死亡，但是在胆管癌中的生物学作用和潜在机制却鲜有报道。程序性坏死(necroptosis)是可被调控的程序性细胞死亡，在形态学上具有典型的坏死样形态改变，依赖于受体相互作用蛋白1和3，此外，可被程序性坏死的特异性抑制剂Nec-1所阻断 ...
徐贝贝
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RNA干扰Ku70基因对宫颈癌Hela细胞放射敏感性影响的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的观察ku70基因短干扰RNA（siRNA）对宫颈癌Hela细胞放射敏感性的影响。方法采用集落形成技术测定不同剂量射线照射对Hela细胞存活率的影响,观察Hela细胞对射线照射的敏感性。采用时定量PCR技术（quantitiv real time PCR,QRT-PCR）检测Ku70 mRNA水平表达。采用Western Blot免疫印记技术检测Ku70蛋白表达。采用RNA干扰（RNAi）技术抑制Hela细胞中Ku70蛋白的表达,观察Ku70蛋白表达下调对Hela细胞放射敏感性的影响 ...
张妍, 尹元
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Functional Characterization of AtST39 in Stress Response and AtMPA Mediating Pollen Development [PDF]
, 2012 基因芯片显示番茄细菌性叶斑病原菌Pseudomonassyringaepv.tomatoDC3000(PstDC3000)，干旱、冷和盐等逆境处理及在开花关键基因lfy突变体中都能够上调AtST39（At3g46110）基因表达；AtMPA（At1g05577）在拟南芥单核花粉粒向三核花粉发育的过程中特异性表达。但是AtST39参与胁迫和AtMPA在介导花粉发育的分子机制知之甚少。我们主要对AtST39进行了探索研究，结果如下： （1）NCBI数据库显示YWC基因家族共有185个蛋白家族成员 ...
肖世民
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建靶向人SSH1L的siRNA真核表达载体（pSUPER-SSH1L）。方法将设计好的SSH1L的siRNA的寡聚脱氧核苷酸链与真核表达载体pSUPER连接,构建重组pSUPER-SSH1L真核表达载体。对该重组表达载体进行酶切鉴定及DNA测序;通过Western blot检测SSH1L蛋白的表达。结果酶切鉴定、DNA测序以及Western blot检测结果证实表达质粒构建成功,无碱基突变。结论成功构建了靶向人SSH1L基因表达的siRNA干扰质粒载体pSUPER-SSH1L ...
邢志军, 赵建武, 王岩, 高忠礼
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A preliminary study of four histone deacetylase genes in Caenorhabditis elegans [PDF]
, 2016 秀丽隐杆线虫（Caenorhabditiselegans，C.elegans）作为发育生物学的模式生物，广泛用于神经系统和药物筛选方面的研究。秀丽隐杆线虫与人类和寄生虫的很多基因存在同源性，利用它的这一生物特点，可以建立与人类疾病相关基因的研究模型，研究相应的信号通路，发现新的具有重要生物功能的潜在药物靶标。 组蛋白去乙酰化酶（histonedeacetylases，HDACs）催化组蛋白的去乙酰化，可抑制基因的转录。在哺乳动物中发现了4类HDACs，它们参与了癌症相关基因的转录表达 ...
郑冬林
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的采用RNA干扰技术抑制树突状细胞（DCs）SOCS1的表达,并检测其对树突状细胞抗肿瘤活性的影响,为树突状细胞的临床应用奠定基础。方法针对SOCS1基因,采用化学合成法合成3对SOCS1 siRNA,并转染树突状细胞。Western blot检测树突状细胞SOCS1的表达情况,筛选出有效的siRNA序列,MTT法测定SOCS1沉默的树突状细胞抗肿瘤活性的变化。结果与空白对照组相比,序列3组SOCS1蛋白质表达水平明显降低;SOCS1沉默的树突状细胞抗肿瘤活性显著提高 ...
于鸿, 张健, 刘玉侠
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Function and mechanism of Repulsive Guidance Molecule RGMb/Dragon during Colorectal Cancer progression [PDF]
, 2016 结直肠癌是我国甚至全球范围内最常见的肿瘤之一，也是肿瘤相关死亡的主要原因之一。及时而有效的诊断是降低结直肠癌死亡率的重要措施。除了临床上常规的诊断及治疗方法外，人们也在不断致力于新型肿瘤标志物的研究，以进一步明确结直肠癌发生发展的机制。排斥导向分子(RGM)家族成员RGMb，又名Dragon，作为骨形态发生蛋白(Bonemorphogeneticprotein，BMP)通路的辅助受体，不但承载着胚胎发生、神经修复和肾脏正常生理功能，还与各种上皮来源肿瘤的发生发展密切相关。然而，RGMb ...
施颖
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