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四川大学学报. 自然科学版, 2009 采用改良的zea Longa法制备大鼠脑缺血模型,研究腺病毒介导的bFGF的基因治疗对大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型的治疗作用及脑血管发生的影响.将30只SD大鼠随机分为假手术组、空载体组(Ad-null组)和治疗组(Ad-bFGF组),于造模成功后24h尾静脉给药.检测实验各组脑组织含水率的变化,通过核磁共振的和免疫组化分别检测实验各组大脑梗死体积和血管发生的变化.结果发现治疗组大鼠脑组织含水率和脑梗死面积明显小于空载体组,脑血管密度显著高于空载组 ...
刘康 +6 more
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以人甲胎蛋白启动子控制表达HIV-1vpr基因的重组腺病毒诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡作用的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的研究人甲胎蛋白（AFP）启动子控制表达HIV-1 vpr基因的重组腺病毒对AFP（+）肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡的作用,评估以该策略利用vpr进行肿瘤特异性基因治疗的可行性。方法将以AFP启动子控制HIV-1vpr表达的重组腺病毒rvAdAFP-vpr和空白载体rvAd-null分别感染AFP（+）的肝癌细胞BEL-7402和AFP（-）的肝癌细胞SMMC-7721,利用流式细胞仪检测Vpr的特异性表达和细胞周期分布,用细胞荧光染色和线粒体膜电位检测等方法观察细胞凋亡。结果与对照病毒rvAd ...
魏强 +5 more
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两种不同AFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒获得及鉴定
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 构建及包装由全长 5 1kbAFP启动子和低氧反应元件 （HRE）与 0 3kbAFP启动子两者组合的杂合0 3kbAFP启动子控制下表达HIVvpr基因的两种重组非复制型腺病毒。方法 采用细菌内同源重组腺病毒载体制备方法和PacI酶切、PCR、SouthernBlot鉴定方法。结果 构建及包装出由这两种AFP启动子控制下表达HIVvpr基因的重组非复制型腺病毒 ,经PacI酶切、PCR和SouthernBlot基因整合分析证明构建成功。结论 我们成功构建了的全长5 ...
魏强 +4 more
doaj
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 ［目的 l 采用Cre-LoxP同源重组系统构建并鉴定携带人胰岛素样生长因子-1 (human insulin-like growth factor-I, hIGF-1)目的基因的复制缺陷重组腺病毒，为椎间盘退变的h!GF-1基因治疗奠定基础。［方法】 PCR合成h!GF-1基因，用pMD18-T载体克隆h!GF-1目的基因，酶切、测序并进行NCBI BLAST相似性在线分析。将pMD18-T- hIGF-1和pDNR-lr质粒分别行EcoR I和BamH I双酶切，DNA连接酶连接双酶切产物 ...
黄宗强
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2018 目的利用腺病毒载体Ad-GINS2感染NB4细胞,观察其对NB4细胞增殖的影响。方法通过AdGINS2感染NB4细胞,利用荧光显微镜观察NB4细胞的感染情况,利用PCR和Western blotting技术检测GINS2基因的转录和翻译水平;MTT方法检测NB4细胞增殖情况。结果 PCR检测结果显示,与空载组和未处理组相比,GINS2的表达水平明显增加 ...
高艳军 +5 more
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反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生物学行为的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的探讨反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生长及转移的影响。方法通过构建裸鼠原位膀胱癌移植瘤模型并灌注携带基因的腺病毒载体,观察肿瘤生长及盆腔淋巴结转移情况,同时采用免疫组化法检测肿瘤细胞增殖和凋亡指数。结果肿瘤大小:治疗组为（14.60±5.31）mm2,对照组为（58.92±7.16）mm2 ...
李然伟 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTTP）70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因（EGFP）和中国旱獭α干扰素基因（cwIFNA5）分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
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转基因溶瘤性单纯疱疹病毒对人类乳腺癌细胞及其干细胞的溶瘤作用
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2011 【目的】 通过体外实验观察溶瘤性单纯疱疹病毒(HSV)载体G47Δ对人类原代乳腺癌细胞及乳腺癌干细胞毒效应,探讨其对人乳腺癌的治疗作用【方法】 选取6例浸润性导管癌组织,体外培养人原代乳腺癌细胞及人原代乳腺癌干细胞,将G47Δ按不同感染复数(MOI),即MOI=0.01和MOI=0.1加入各实验组中,观察每天细胞的生长情况G47Δ含有LacZ基因,其表达产物可被X-gal染色检测 【结果】 G47Δ病毒在乳腺癌细胞中可复制和传播通过X-gal染色法得以证实 ...
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2015 目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因转染大鼠内皮祖细胞的方法,分析转染VEGF基因对内皮祖细胞生长的影响。方法分离大鼠骨髓内皮祖细胞并诱导其分化,采取FITCUEA-I和Dil-Ac-LDL双染色法验证;采用腺病毒包装VEGF165基因,按照不同比例转染内皮祖细胞后,通过荧光显微镜观察质粒自带绿色荧光蛋白验证转染效率;以未转染及转染空载体为对照;采用MTT法验证转染VEGF165基因对内皮祖细胞增殖的影响 ...
王伟 +5 more
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腺病毒介导CD40Ig基因转染联合骨髓细胞输注诱导大鼠心脏移植物耐受的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 研究CD4 0Ig基因转染联合骨髓细胞输注对大鼠心脏移植免疫耐受诱导的影响。方法 构建可表达CD4 0Ig的腺病毒载体Ad CD4 0Ig。建立大鼠心脏移植模型 ,将实验动物分为 5组 :A ,对照组 ,无任何处理 ;B组 ,单纯输注供者骨髓细胞 ;C ,单纯输注Ad CD4 0Ig ;D ,Ad CD4 0Ig和供者的骨髓细胞联合输注 ;E :输注对照腺病毒Ad Lacz。观察心脏移植物的存活时间、并MLR检测及移植物组织学检查。结果 5组移植物的存活时间分别为 :8 34± 0 35天、9
徐衍盛, 肖序仁, 李峰永
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