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以KDR为启动子的双自杀基因系统诱导结肠癌细胞凋亡的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的研究以KDR为启动子的双自杀基因系统CDglyTK诱导结肠癌细胞凋亡的实验研究。方法用联合基因AdKDR-CDglyTK腺病毒转染表达KDR不同的人结肠癌细胞HCT116和LS174T,检测转染效率;RT-PCR检测双自杀基因CDglyTK的表达;用梯度浓度的前药5-FC及GCV处理,MTT法检测双自杀基因系统对HCT116和LS174T的细胞毒性作用;流式细胞术观察细胞凋亡变化;免疫组织化学法检测caspase-3蛋白的表达。结果携带双自杀基因的重组腺病毒载体成功转染结肠癌细胞。RT ...
王朝阳, 黄宗海
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腺病毒介导的IL-24基因转移对系膜细胞分泌细胞因子IL-6、TNF-α的影响
Linchuang shenzangbing zazhi, 2014 目的 探讨腺病毒介导的白细胞介素24(interleukin-24,IL-24)基因转移对系膜细胞分泌细胞因子白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-6、TNF-α的影响。方法 通过逆转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)方法构建IL-24腺病毒载体,并经序列分析证实。腺病毒载体在293细胞中扩增。分组培养系膜细胞:
王晓浪
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慢病毒载体介导siRNA对裸鼠移植人肺腺癌A549抑瘤作用的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的研究慢病毒载体介导siRNA抑制survivin基因表达后对人肺腺癌A549细胞体内增殖能力的影响以及对裸鼠移植人肺腺癌的抑瘤活性。方法应用裸鼠成瘤实验测定致瘤能力的改变,采用RT-PCR和Western-blot测定干扰后survivin基因及其蛋白的表达水平;流式细胞术检测肺癌细胞凋亡指数和增殖指数。结果靶向survivin基因的siRNA可以有效抑制survivin基因的表达,使survivin-mRNA表达减少50%-80%,蛋白表达减少60%;流式细胞术检测细胞凋亡率明显提高 ...
赵岐刚, 田小侠, 李鹏, 司磊
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】研究灭活后的柯萨奇病毒 B1 在原代培养骨骼肌细胞中对报道基因 pCDNA3-LacZ 转移效率的影响。【方 法】①用聚乙二醇沉淀和蔗糖低温超速离心法提纯并用β-丙内酯灭活病毒; ②分别用不同浓度的转铁蛋白聚赖氨酸( TfpL)+ LacZ、灭活 CVB1+LacZ 以及灭活 CVB1+TfpL+LacZ 在肌肉细胞进行基因转移, 以报告基因产物 β-半乳糖苷酶染色阳性的 细胞数作为基因转移效率指标。【结果】灭活 CVB1+TfpL+LacZ 在肌肉细胞中使基因转移效率由 TfpL +LacZ ...
陈国俊 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的已有研究显示HER2基因过表达乳腺癌细胞对曲妥珠单抗（TZB）产生抵抗性与LC3的过表达相关,本研究通过RNAi沉默耐TZB的SKBR3（SKBR3-TR）细胞LC3的表达,探讨HER2阳性乳腺癌对TZB抵抗的机制。方法以SKBR3乳腺癌细胞及SKBR3-TR细胞为研究对象,检测两组细胞中LC3表达情况。以SKBR3-TR细胞为研究对象,通过慢病毒载体沉默SKBR3-TR细胞LC3的表达,实时定量PCR（Realtime20PCR）、蛋白免疫印迹检测LC3mRNA、蛋白的表达及水平,通过CCK ...
万广稳 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2016 目的研究过表达miRNA-291b-3p对诱导H9C2细胞胰岛素抵抗的影响。方法 1用10ng/ml TNF-α处理心肌细胞系H9C2细胞24h,通过Real time PCR检测miR-291b-3p表达水平,Western blot分析AKT/GSK信号通路活性,用蒽酮法检测细胞糖原水平;2构建miR-291b-3p mimics腺病毒载体,感染H9C2细胞48h,分析miR-291b-3p水平、AKT/GSK信号通路活性和糖原水平的变化。结果 1TNF-α处理H9C2细胞24h,miR-291b ...
隋小芳 +6 more
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重组人高密度脂蛋白B族I型清道夫受体基因腺相关病毒血 清型2/1杂合载体的构建及其在HepG2肝细胞的表达
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 构建含绿色荧光蛋白(EGFP)重组人高密度脂蛋白B族I型清道夫受体(SR-BI)基因腺相关病毒(rAAV)2/1杂合载体,观察其在HepG2肝细胞的表达65377;【方法】以pCMV.SPORT6-SR-BI质粒为模板PCR扩增目的基因cDNA,将其克隆至pSNAV2.0-IRES-EGFP-LacZa载体中,经酶切及测序鉴定后,脂质体介导转染BHK21细胞,经G418筛选得到含SR-BI基因的BHK/SR-BI-IRES-EGFP载体细胞株,用携带rep2-cap1基因的辅助病毒(rHsv ...
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[Role and mechanism of Wnt9a in human and mouse chronic wound healing]. [PDF]
Zhonghua Shao Shang Yu Chuang Mian Xiu Fu Za ZhiJia YH, Yuan YX, Hu DH, Guan H.
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[Adeno-associated virus-mediated gene therapy for genetic epilepsy: prospects and challenges]. [PDF]
Zhongguo Dang Dai Er Ke Za ZhiSun B, Wang XL, Peng J.
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慢病毒介导shRNA抑制垂体腺瘤PTTG基因表达及对细胞增殖和侵袭能力的影响
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2016 摘 要: 【目的】 观察慢病毒介导的shRNA对GH3和AtT20型垂体腺瘤中垂体肿瘤转化基因(PTTG)表达的抑制作用,以及对肿瘤细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制探讨?【方法】 筛选最佳抑制效果的干扰序列构建PTTG基因shRNA的慢病毒表达载体,转染GH3和AtT20型垂体腺瘤细胞?流式细胞仪分析细胞转染效率,RT-PCR和Western blot检测细胞PTTG基因mRNA和蛋白的表达水平,MTT和EdU法分别检测靶向PTTG的shRNA对肿瘤细胞增殖生长的抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期变化 ...
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