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目的已有研究显示HER2基因过表达乳腺癌细胞对曲妥珠单抗(TZB)产生抵抗性与LC3的过表达相关,本研究通过RNAi沉默耐TZB的SKBR3(SKBR3-TR)细胞LC3的表达,探讨HER2阳性乳腺癌对TZB抵抗的机制。方法以SKBR3乳腺癌细胞及SKBR3-TR细胞为研究对象,检测两组细胞中LC3表达情况。以SKBR3-TR细胞为研究对象,通过慢病毒载体沉默SKBR3-TR细胞LC3的表达,实时定量PCR(Realtime20PCR)、蛋白免疫印迹检测LC3mRNA、蛋白的表达及水平,通过CCK ...
万广稳 +5 more
doaj
目的研究过表达miRNA-291b-3p对诱导H9C2细胞胰岛素抵抗的影响。方法 1用10ng/ml TNF-α处理心肌细胞系H9C2细胞24h,通过Real time PCR检测miR-291b-3p表达水平,Western blot分析AKT/GSK信号通路活性,用蒽酮法检测细胞糖原水平;2构建miR-291b-3p mimics腺病毒载体,感染H9C2细胞48h,分析miR-291b-3p水平、AKT/GSK信号通路活性和糖原水平的变化。结果 1TNF-α处理H9C2细胞24h,miR-291b ...
隋小芳 +6 more
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重组人高密度脂蛋白B族I型清道夫受体基因腺相关病毒血 清型2/1杂合载体的构建及其在HepG2肝细胞的表达
【目的】 构建含绿色荧光蛋白(EGFP)重组人高密度脂蛋白B族I型清道夫受体(SR-BI)基因腺相关病毒(rAAV)2/1杂合载体,观察其在HepG2肝细胞的表达65377;【方法】以pCMV.SPORT6-SR-BI质粒为模板PCR扩增目的基因cDNA,将其克隆至pSNAV2.0-IRES-EGFP-LacZa载体中,经酶切及测序鉴定后,脂质体介导转染BHK21细胞,经G418筛选得到含SR-BI基因的BHK/SR-BI-IRES-EGFP载体细胞株,用携带rep2-cap1基因的辅助病毒(rHsv ...
doaj
腺病毒载体介导人BMP-2与VEGF-165对骨髓间充质干细胞形态特征及增殖能力影响的实验研究
目的探讨携带骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)与血管内皮生长因子165(vascular endothelial growth factor 165,VEGF-165)双基因的腺病毒载体转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后对细胞形态特征及增殖能力的影响。方法选取4只新西兰大白兔抽取骨髓液,分离鉴定获得第3代BMSCs做为实验对象,实验分成4组:Ad-BMP-2-VEGF ...
张聪 +5 more
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慢病毒介导Shh基因转染对甲状腺乳头状癌细胞生物学性状的影响
目的将Shh基因用慢病毒载体转染甲状腺乳头状癌(PTC)原代细胞中,观察Shh对PTC细胞体外生物学性状的影响。方法在建立慢病毒载体pGC-FU-Shh-GFP转染PTC细胞,稳定过表达Shh蛋白模型基础上,设立转染实验组和阴性对照组。MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,Transwell实验检测细胞迁移能力,检测Sonic hedgehog通路相关基因mRNA与蛋白表达变化,与阴性对照组检测结果进行比较。结果高表达Shh细胞生长曲线较陡直,生长速度较阴性对照组显著提高 ...
边学海 +6 more
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慢病毒介导shRNA抑制垂体腺瘤PTTG基因表达及对细胞增殖和侵袭能力的影响
摘 要: 【目的】 观察慢病毒介导的shRNA对GH3和AtT20型垂体腺瘤中垂体肿瘤转化基因(PTTG)表达的抑制作用,以及对肿瘤细胞增殖和侵袭能力的影响及其机制探讨?【方法】 筛选最佳抑制效果的干扰序列构建PTTG基因shRNA的慢病毒表达载体,转染GH3和AtT20型垂体腺瘤细胞?流式细胞仪分析细胞转染效率,RT-PCR和Western blot检测细胞PTTG基因mRNA和蛋白的表达水平,MTT和EdU法分别检测靶向PTTG的shRNA对肿瘤细胞增殖生长的抑制作用,流式细胞仪检测细胞周期变化 ...
doaj
Vpr抑制人大肠癌细胞株HT-29增殖及调节存活素表达的研究
目的观察I型人类免疫缺陷病毒蛋白R(Viral protein R、Vpr)在体外对大肠癌细胞HT-29增殖抑制及探索Vpr对HT-29细胞存活素(Survivin)表达的调节作用。方法应用腺病毒转染系统将Vpr基因以不同感染复数转染至HT-29细胞。MTT法检测Vpr对HT-29细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡变化。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹(western blot)法检测mRNA水平和蛋白水平上Survivin的表达。结果实验组可见Vpr蛋白的表达 ...
张汉超, 马波
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[Molecular imprinting strategies and advances targeting biomembranes]. [PDF]
Yuan XT, Wang L, Chen LX, Hu LH.
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[Recent advances in antibody-drug conjugates for metastatic castration-resistant prostate cancer]. [PDF]
Xu J, Ma Y, Hu P, Yao J, Chen H, Ma Q.
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【目的】 探索野生型PTEN基因对卵巢癌细胞生物学特性的影响?【方法】 将野生型PTEN基因克隆到pAdxsi腺病毒载体并感染SKOV3细胞?荧光镜下检测腺病毒载体对SKOV3细胞的感染效率;用CCK-8法检测细胞增殖的抑制效率;RT-PCR与WB分别检测PTEN mRNA与蛋白表达水平变化;免疫化学法与间接荧光法检测PTEN在细胞内的定位及细胞内NEDD4-1和RAD51等分子表达?
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