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以人甲胎蛋白启动子控制表达HIV-1vpr基因的重组腺病毒诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡作用的研究
目的研究人甲胎蛋白(AFP)启动子控制表达HIV-1 vpr基因的重组腺病毒对AFP(+)肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡的作用,评估以该策略利用vpr进行肿瘤特异性基因治疗的可行性。方法将以AFP启动子控制HIV-1vpr表达的重组腺病毒rvAdAFP-vpr和空白载体rvAd-null分别感染AFP(+)的肝癌细胞BEL-7402和AFP(-)的肝癌细胞SMMC-7721,利用流式细胞仪检测Vpr的特异性表达和细胞周期分布,用细胞荧光染色和线粒体膜电位检测等方法观察细胞凋亡。结果与对照病毒rvAd ...
魏强 +5 more
doaj
The study of angiopoient-1 in repair inflammatory injury of Endothelial progenitor cells [PDF]
目的:体外研究携带血管生成素-1(angiopoient-1,Ang-1)基因的慢病毒载体感染内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)的方法。检测Ang-1修饰的EPCs诱导炎症后细胞间黏附因子1(intercellularadhesionmolecule-1,ICAM-1)、血管细胞黏附因子1(vascularcelladhesionmolecule-1,VCAM-1)的表达水平,评价Ang-1对炎症损伤后EPCs的修复作用。 方法:体外分离 ...
宋晶金
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两种不同AFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒获得及鉴定
目的 构建及包装由全长 5 1kbAFP启动子和低氧反应元件 (HRE)与 0 3kbAFP启动子两者组合的杂合0 3kbAFP启动子控制下表达HIVvpr基因的两种重组非复制型腺病毒。方法 采用细菌内同源重组腺病毒载体制备方法和PacI酶切、PCR、SouthernBlot鉴定方法。结果 构建及包装出由这两种AFP启动子控制下表达HIVvpr基因的重组非复制型腺病毒 ,经PacI酶切、PCR和SouthernBlot基因整合分析证明构建成功。结论 我们成功构建了的全长5 ...
魏强 +4 more
doaj
Generation of Corneal Epithelial-like Cells from Human Induced Pluripotent Stem Cells (iPSCs) Derived from Ocular Surface Cells [PDF]
目的诱导患者来源的眼表细胞产生iPS细胞,并诱导这种病人特异的iPS细胞向角膜上皮干细胞定向分化。 方法采用患者来源的翼状胬肉基质成纤维细胞(PSF)和人结膜上皮细胞(HCjE),通过逆转录病毒载体介导将OCT4、SOX2、c-MYC和KLF4等4种转录因子导入细胞中,经过一系列的条件诱导过程,诱导这两种细胞转化成iPS细胞。然后采用碱性磷酸酶染色、RT-PCR检测、免疫荧光染色、基因芯片分析等方法对所诱导的iPS细胞进行鉴定。最后采用IV型胶原加KSFM培养基单独培养 ...
方小为
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New advances in basic research, clinical diagnosis and treatment of pancreatic cancer in 2024 [PDF]
Pancreatic cancer is a highly malignant tumor, and its incidence rate has been slowly increasing since 2000. Although the improvement of diagnosis and treatment has led to an increase in the five-year survival rate of pancreatic cancer compared to 50 ...
WANG Ting, QIN Yi, XU Xiaowu, YU Xianjun
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[目的 l 采用Cre-LoxP同源重组系统构建并鉴定携带人胰岛素样生长因子-1 (human insulin-like growth factor-I, hIGF-1)目的基因的复制缺陷重组腺病毒,为椎间盘退变的h!GF-1基因治疗奠定基础。[方法】 PCR合成h!GF-1基因,用pMD18-T载体克隆h!GF-1目的基因,酶切、测序并进行NCBI BLAST相似性在线分析。将pMD18-T- hIGF-1和pDNR-lr质粒分别行EcoR I和BamH I双酶切,DNA连接酶连接双酶切产物 ...
黄宗强
doaj
The Study on the high effective protective immunogens [PDF]
在革兰氏阴性菌的防治中,抗生素的方法存在不少问题和缺点,而疫苗防治的方法比抗生素防治方法更为安全有效且具有广阔的开发前景。具有良好免疫原性并且在种属间存在交叉反应性的革兰氏阴性菌外膜蛋白(OMPs)作为疫苗侯选成分是近来的研究热点。本研究采用免疫蛋白质组学的研究手段,对大肠杆菌K12的免疫原性OMPs以及与嗜水气单胞菌有交叉免疫原性的铜绿假单胞菌OMPs进行筛选和鉴定。再采用基因克隆、原核表达、重组蛋白纯化、免疫动物制备抗血清的方法和体外抑菌实验,分析它们当中具有自身保护作用和交叉保护作用的免疫原 ...
纪念念
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目的利用腺病毒载体Ad-GINS2感染NB4细胞,观察其对NB4细胞增殖的影响。方法通过AdGINS2感染NB4细胞,利用荧光显微镜观察NB4细胞的感染情况,利用PCR和Western blotting技术检测GINS2基因的转录和翻译水平;MTT方法检测NB4细胞增殖情况。结果 PCR检测结果显示,与空载组和未处理组相比,GINS2的表达水平明显增加 ...
高艳军 +5 more
doaj
Ang-1 gene affect the inflammation of endothelial progenitor cells through NF-Kappa B signaling pathway [PDF]
基因修饰后的干细胞治疗动脉粥样硬化是近年来出现的动脉粥样硬化治疗的新策略。通过基因修饰可以增强干细胞修复血管的能力。本课题组前期实验中,我们发现Ang-1能够抑制TNF-a诱导的内皮祖细胞炎症反应,增强EPC细胞修复血管损伤的能力,但其具体的生物学机制并不明确。有研究发现在仓鼠的卵巢细胞中Ang-1通过Tie-2受体磷酸化招募ABIN-2蛋白抑制NF-kappaB信号传导通路,达到抑制炎症反应的作用。在内皮祖细胞中,Ang-1与NF-kappaB信号传导通路之间的是否同样存在这种联系目前并未见报道。为此,
刘一叶
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反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生物学行为的影响
目的探讨反义miRNA-21/rAV-Tumstatin病毒载体对裸鼠膀胱癌生长及转移的影响。方法通过构建裸鼠原位膀胱癌移植瘤模型并灌注携带基因的腺病毒载体,观察肿瘤生长及盆腔淋巴结转移情况,同时采用免疫组化法检测肿瘤细胞增殖和凋亡指数。结果肿瘤大小:治疗组为(14.60±5.31)mm2,对照组为(58.92±7.16)mm2 ...
李然伟 +4 more
doaj

