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腺病毒载体介导的大鼠DNA 多聚酶β重组体的构建及其在PC12 细胞中的表达
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2005 【目的】为探讨DNA多聚酶β在神经细胞损伤中的作用与机制，构建其重组腺病毒载体，并在PC12细胞中表达。【方法】RT-PCR获取大鼠DNA多聚酶β(POLβ)的编码序列，TA克隆测序，酶切POLβ基因并连入穿梭质粒pAdTrack-CMV，电转至含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183。重组腺病毒质粒(pAd-polβ)和Lipofectamine2000转染293细胞，用重组腺病毒感染PC12细胞。【结果】10个TA克隆中有3个克隆的序列与GENE BANK中大鼠POLβ ...
钟建辉
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2015 流行性腮腺炎（简称腮腺炎）是由腮腺炎病毒（Mumps Virus,MuV）感染引起的急性呼吸道传染病,经空气飞沫传播,全年均可发病,以冬春季高发,人类是该病毒的惟一宿主,好发于儿童和青少年,传染性仅次于麻疹和水痘,是一种在全球流行的急性传染病,临床以腮腺非化脓性肿胀、疼痛伴发热为主要症状。2004-2006年我国的腮腺炎爆发占公共卫生事件的20%左右[1,2 ...
李宏宇 +4 more
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重构腺相关病毒转导 PDX- 1 对 C2C12 分化为胰岛素分泌细胞的作用
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 【目的】重构含有 PDX- 1 的腺相关病毒载体 , 将 PDX- 1 转导入 C2C12 细胞 , 观察胰岛素分泌量的改变。【方法】应用 PCR 方法将 PDX- 1 从 pZL1 质粒中克隆出来, 安装到Stratagene 公司的腺相关病毒(AAV Helper- Free System)表达系统中 , 转染 HEK293 细胞 , 培养 72 h, 提取病毒悬液 , 转导 PDX- 1 进入 C2C12 细胞中, 检测细胞培养液中的胰岛素含量。【结果】①用 X- gal 染色系统检测 ...
陈黎红
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的研究重组腺病毒载体感染小鼠神经瘤细胞（N2a）的感染效率及重组腺病毒介导的人鞘氨醇激酶-1（sphingosine kinase-1,SPK1）基因在N2a细胞表达特性。方法用流式细胞仪检测感染效率,用激光共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白的表达;用Western blot方法检测SPK1蛋白的表达。结果 N2a细胞的感染效率和绿色荧光蛋白表达量在一定范围内随着病毒感染复数（Multiplicity of infection,MOI）的增加而增高,MOI为100时感染效率达峰值为（99.57±0.133）%
杨阳 +6 more
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FKBP12．6重组腺病毒载体的构建及其心肌细胞感染效率测定
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 【目的】构建携带FKBP12．6基因的重组腺病毒载体以研究FKBP12．6在心力衰竭时心室肌电重构中的作用。【方法】将平端化的FKBP12．6片段连接到穿梭质粒pAdTrack-CMV构建重组穿梭质粒pAdTrack／FKBP12．6，用Xho I单酶切进行鉴定。采用电穿孔法将线性化pAdTrack／P12．6转化AdEasier-1细菌。产生重组腺病毒质粒pAdEasy-1／FKBP12．6。采用脂质体介导法用线性化pAdEasy-1／FKBP12．6转染293细胞，从病变的293细胞分离 ...
李德, 伍卫, 周淑娴
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 病毒性心肌炎是病毒侵犯心脏引起心肌炎性病变为主要表现的疾病[1]。以肠道病毒如柯萨基B族病毒、流感病毒、风疹病毒、水痘病毒、腺病毒等引起的心肌炎最多见[2]。本病以学龄前期及学龄儿童多见,其起因是机体有病毒的入侵 ...
张艳 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）目的基因的复制缺陷型重组腺病毒，并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA，使用RT—PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18-T Simple载体测序，将测序完全正确的BDNF目的基因克隆入pShuttle2中，然后利用体外连接法将BDNF目的基因克隆入Adeno—X^TM腺病毒骨架中。Lipofectamine^TM ...
王鹏 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2021 继发性甲状旁腺功能亢进症（SHPT）是慢性肾脏病（CKD）患者最常见的并发症之一,以甲状旁腺激素（PTH）水平升高和甲状旁腺腺体增生为主要表现[1]。随着透析龄延长,SHPT的发病率越高,有研究显示长期进行透析的患者出现SHPT的概率超过50%[2]。PTH是一种尿毒症毒素,其受体PTH-1广泛分布于骨骼、肾脏、皮肤、胰腺、心脏及循环系统等[3]。目前研究表明,PTH与其受体结合,不仅可导致肾性骨病、瘙痒、神经系统损害等,
张圆圆, 刘晓斌, 王凉
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携带人可溶性TRAIL基因的重组腺病毒在肺癌细胞中的转染效率及表达特性研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的研究重组腺病毒感染肺腺癌细胞A549的转染效率及重组腺病毒介导的人可溶性肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体（hTRAIL95-281）基因的体外表达。方法用不同感染滴度（MOI）（0-10 000 VP/cell）的重组腺病毒Ad-CMV-EGFP转染A549细胞后48 h收集细胞,经流式细胞仪检测其转染效率,并在共聚焦荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;用MOI为5 000 VP/cell的Ad-CMV-EGFP感染肿瘤细胞后不同时间（24 h、48 h、72 h和96 h）收集细胞 ...
朴春姬, 田梅, 杨巍, 李修义
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2005 【目的】构建人神经营养素-3(neurotrophin-3,NT-3)受体(即酪氨酸蛋白激酶受体C, tyrosine protein kinase C, TrkC)基因重组的腺病毒表达载体。【方法】从人脑组织mRNA 中扩增TrkC 基因全长cDNA, 定向克隆于穿梭质粒pShuttle 中, 获得一个带有CMV 启动子的表达盒。再将表达盒与腺病毒骨架DNA ( Adeno-X viral DNA) 体外连接, 形成重组腺病毒质粒(pAd-TrkC)。用pAd-TrkC 转染人胚肾293 ...
王俊梅 +6 more
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