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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的比较三种非病毒载体转染方法转染人鼻咽CNE-2细胞。方法分别采用脂质体转染法、电穿孔转染法、磷酸钙纳米颗粒转染法将pEGFP-N1质粒DNA转染人鼻咽癌CNE-2细胞,转染24 h后荧光显微镜观察EGFP的表达,计算转染率;MTT实验比较各转染方法对CNE-2细胞的细胞毒性。结果脂质体转染组的转染率为（51.9±2.8）%;电穿孔转染组的转染率为（42.8±2.6）%;磷酸钙纳米颗粒转染组的转染率为（48.1±2.3）%。经统计学分析,三种方法转染CNE-2细胞的转染率相互之间有显著的差异 ...
温见翔, 余振东, 吴波, 黄达娜
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的探讨内毒素（LPS）相关受体CD14、Toll样受体4（TLR4）和MD-2基因共转染人小肠上皮细胞株（HIC）的最佳转染条件。方法用核糖核酸酶保护法（RPA）检测基因转染效率,分别研究质粒DNA的量、FuGENE 6转染试剂与质粒DNA的比例、转染试剂-质粒DNA复合物与靶细胞的作用时间及培养液中血清存在与否对转染效果的影响。结果FuGENE 6转染试剂转染HIC的最佳转染条件是:每种质粒DNA的量为2.0μg（使用6 cm培养皿）、转染试剂与质粒DNA的比例为4∶1、转染试剂 ...
张道杰, 蒋建新, 陈永华
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】探讨高效阳离子脂质体介导外源基因转染体外生长的小鼠脾细胞的方法。【方法】用新型阳离子脂质 体DOSPER 包裹携带lac Z 报告基因的质粒pCAGGS-lacZ 按3 种方法转染小鼠脾细胞, ①常规方法直接转染;②脾细胞经刀 豆球蛋白A(Con A)活化后再按常规方法转染;③用黏附辅助脂质体法(adhesion-assisted lipofection , AAL)转染脾细胞。转染 效率用X-gal 染色法测定。【结果】上述3 ...
何承伟
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】探讨蛋白酶体筇亚单位（PSMB5）基因过表达对氧化条件下晶状体上皮细胞的影响。【方法】构建重组质粒pcDNA3．1-PSMB5并将其转染人人晶状体上皮细胞株SRAO1／04中，形成稳定表达，同时设pcDNA3．1空载体为对照组。RT—PCR法及Western blot法分别检测PSMB5基因及蛋白的表达情况。H2O2分别作用PSMB5转染细胞及空载体转染细胞，MTT法检测细胞增殖能力的变化。【结果】转染后用G418筛选3周后，获得PSMB5转染及空载体转染的G418抗性的细胞克隆 ...
张铁英 +3 more
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外源性表达VEGF165b对人膀胱癌裸鼠移植瘤生长影响的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2014 目的建立人膀胱癌T24细胞裸鼠移植瘤模型,探讨外源性表达VEGF165b对其生长的影响及其机制。方法分别移植未转染和转染VEGF165b表达载体的人膀胱癌T24细胞到裸鼠膀胱内,28d使处死动物,称量肿瘤重量,测定肿瘤体积。Western blot法检测肿瘤VEGF165b、p-VEGFR2、AKT、p-AKT蛋白表达。结果转染pcDNA-VEGF165b组肿瘤重量和体积与未转染组和转染pcDNA3.0组相比明显降低（P0.05）。Western blot结果显示,转染pcDNA ...
张金 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2015 目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因转染大鼠内皮祖细胞的方法,分析转染VEGF基因对内皮祖细胞生长的影响。方法分离大鼠骨髓内皮祖细胞并诱导其分化,采取FITCUEA-I和Dil-Ac-LDL双染色法验证;采用腺病毒包装VEGF165基因,按照不同比例转染内皮祖细胞后,通过荧光显微镜观察质粒自带绿色荧光蛋白验证转染效率;以未转染及转染空载体为对照;采用MTT法验证转染VEGF165基因对内皮祖细胞增殖的影响 ...
王伟 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的探讨klotho基因转染对脂肪间充质干细胞（ADSCs）增殖的影响。方法将含有klotho全长基因的真核质粒转染至从脂肪组织分离的ADSCs中,采用CCK-8法测定转染后细胞增殖率,western blot法检测转染后细胞周期蛋白D1的表达变化,流式细胞术检测转染前后ADSCs的细胞周期变化。结果转染klotho基因96h后AD-SCs的细胞增殖率为170.50%;流式细胞术检测结果显示,ADSCs转染klotho基因S期和G2期细胞明显增多;west-ern ...
韩冬, 徐煌, 郑永霞, 肖燕萍
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siRNA抑制人卵巢癌SKOV-3细胞MDM2的表达及细胞增殖的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2021 目的研究siRNA对人卵巢癌细胞SKOV-3细胞MDM2基因表达的抑制作用及对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法体外合成2对针对MDM2基因的siRNA,经脂质体转染导入SKOV-3细胞;转染siRNA MDM2(简称si-MDM2)转染阴性对照质粒到SKOV-3,并设只加转染试剂作空白对照组,采用MTT法检测si-MDM2对细胞增殖的抑制作用。流式细胞仪检测细胞凋亡,并用Real-time PCR和Western blot分别从mRNA水平和蛋白水平检测si-MDM2对MDM2的抑制作用。结果 ...
王莹, 贾志勇, 赵燕颖
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超声介导微泡破裂法对VEGF体外转染成纤维细胞蛋白表达影响的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的利用ELISA检测法观察诊断剂量的超声介导微泡破裂法对VEGF体外转染成纤维细胞蛋白表达的影响并探讨该种转染方法的最佳超声条件。方法实验分组:单纯VEGF质粒转染组;超声+造影剂微泡+VEGF质粒转染组,该组并根据MI（机械指数）分为三组1.2;1.4;1.6。转染后利用ELISA法对各组成纤维细胞的VEGF蛋白表达进行定量检测;利用锥虫蓝染色法比较不同超声强度对细胞活性的影响。结果VEGF质粒转染成纤维细胞后,24h开始即有较高水平的VEGF蛋白表达,表达量于48 h7、2 h呈下降趋势;超声 ...
赵丽荣, 王小丛, 杨松青, 刘彬
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】探讨腺病毒介导血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后目的基因表达情况及对MSCs增殖分化的影响。【方法】构建含VEGF基因的腺病毒表达载体,利用贴壁法分离培养MSCs后,用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效果和转染率,用免疫组化、Western-Blot和ELISA方法分别检测VEGF基因转染MSCs后VEGF的表达情况。【结果】腺病毒介导的VEGF基因对于MSCs具有很高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicyties of ...
华平 +6 more
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