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阳离子脂质体介导的外源基因转染小鼠脾细胞的方法学探讨 [PDF]
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】探讨高效阳离子脂质体介导外源基因转染体外生长的小鼠脾细胞的方法。【方法】用新型阳离子脂质 体DOSPER 包裹携带lac Z 报告基因的质粒pCAGGS-lacZ 按3 种方法转染小鼠脾细胞, ①常规方法直接转染;②脾细胞经刀 豆球蛋白A(Con A)活化后再按常规方法转染;③用黏附辅助脂质体法(adhesion-assisted lipofection , AAL)转染脾细胞。转染 效率用X-gal 染色法测定。【结果】上述3 ...
何承伟
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 【目的】构建神经营养素-3(NT-3)基因转染的施万细胞。【方法】NT-3基因重组腺病毒(AdvNT-3)扩增、纯化和测定后,转染体外培养的施万细胞(SCs)。用免疫细胞化学和ELISA方法分别检测NT-3基因转染SCs的NT-3表达及培养液中NT-3的含量。【结果】实验中获得的AdvNT-3中外源基因序列与大鼠NT-3的DNA序列完全一致,与未基因转染SCs相比,NT-3基因转染SCs的NT-3阳性增强,培养液中NT-3含量增高。【结论】通过腺病毒介导可以获得NT-3过量表达的基因转染SCs。
郭家松
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阳离子脂质体介导的肺癌细胞基因转染效率的比较研究 [PDF]
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】提高阳离子脂质体介导的肺癌细胞基因转染效率。【方法】采用表达E .coli β -半乳糖苷酶的pCMVβ 报 告基因质粒及组化染色评价阳离子脂质体的转染效率。优化脂质体介导肺癌细胞基因转染效率的条件包括:脂质体∶DNA 电 荷比率, DNA 转染剂量, 阳离子脂质体的类型。【结果】当阳离子脂质体∶DNA 电荷比率(+/ -)为3∶1 时, pCMVβ 的剂量为 4 μg/ 孔(24 孔板)时, 阳离子脂质体DOSPER 介导肺癌细胞株SPC-A-1 转染效率最高, 达(11.9 ±0.9)%
李 芳, 区敬华, 童大跃
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腺病毒介导血管内皮细胞生长因子基因体外转染骨髓间充质干细胞 [PDF]
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】探讨腺病毒介导血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后目的基因表达情况及对MSCs增殖分化的影响。【方法】构建含VEGF基因的腺病毒表达载体,利用贴壁法分离培养MSCs后,用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效果和转染率,用免疫组化、Western-Blot和ELISA方法分别检测VEGF基因转染MSCs后VEGF的表达情况。【结果】腺病毒介导的VEGF基因对于MSCs具有很高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicyties of ...
华平 +6 more
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转染 p53 抑癌基因体外抑制 K562 细胞克隆的形成 [PDF]
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1999 目的: 构建 p53 表达质粒, 研究 p53基因对白血病细胞 K562 细胞生长的抑制作用。方法: 以 T4 连接酶把 2 160 bp 的 p53 cDNA 片段插入 pRc/CMV 质粒, 重组构建 pRc/p53 表达质粒,以 Lipofectin 介导pRc/p53 质粒转染K562 细胞,以甲 基纤维素半固体培养方法作 K562 细胞体外克隆培养, 观察转染 p53 基因后 K562 细胞克隆形成改变。结果: p53 cDNA 质粒 转染的 K562 细胞, 体外培养克隆形成能力明显减低 ...
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C-Myc／Fas基因转染对人颊癌细胞移植瘤的影响 [PDF]
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 【目的】探讨C-Myc／Fas基因BcaCD885细胞裸鼠移植瘤内转染的抑瘤效果，了解分子机制。【方法】构建人颊癌BcaCD885细胞裸鼠移植瘤模型，实验动物分3组，每组16只。分别瘤内注射脂质体、脂质体，pBK-fas、以及脂质体／pBK-Fas／pcDNA3-C-Myc共聚物，观测移植瘤增殖，绘制生长曲线。转染72h后每组处死6只动物，RT-PCR检测移植瘤细胞FasmRNA表达。流式细胞术（Flowcytometry，FCM）检测Fas蛋白表达和移植瘤细胞凋亡、增殖水平。【结果】Fas转染、C ...
侯劲松 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 【目的】 用流式细胞仪(FCM)快速检测外源性血管内皮生长因子基因(VEGF基因)在大鼠原代培养肝细胞转染表达,根据结果优化其转染表达条件?【方法】 以加强型黄色荧光素蛋白(EYFP)为标记,用FCM快速检测重组质粒pIRES-EYFP/VEGF121在大鼠原代培养肝细胞中转染表达,根据结果优化pIRES-EYFP/VEGF121转染表达条件?【结果】 pIRES-EYFP/VEGF121得以成功构建,并转染大鼠原代培养肝细胞;优化的转染表达条件:在细胞数密度0.1×106/mL,质粒孵育时间30 ...
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 【目的】研究丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)对肝门部胆管癌细胞(QBC939)细胞凋亡及细胞周期的影响。【方法】将包含HCV-C基因的真核表达质粒pcDNAHCV-C和空载体,利用脂质体介导将其转染QBC939,经G418筛选获得稳定转染HCV-C的QBC939细胞(QBC939HCV-C+),RT-PCR和免疫荧光法检测HCV-C蛋白表达,MTT法检测QBC939HCV-C+细胞、空白质粒转染QBC939(QBC939pcDNA)细胞和未转染QBC939细胞生长增生率;流式细胞术(FACS ...
李志花
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rAAV1-EGFP和rAAV2-EGFP转染犬骨髓间充质 干细胞的比较
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 研究不同血清型腺相关病毒(rAAV)载体介导的增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)对体外培养犬骨髓间充质干细胞(MSC)的转染效率及其毒性作用65377;【方法】 应用密度梯度离心法及贴壁筛选法分离培养犬MSC,倒置显微镜及Giemsa染色观察细胞形态,透射电镜观察其超微结构,流式细胞仪鉴定其表面标记物65377;取第3代MSC,以MOI为104 ~ 105 v.g./cell 的rAAV1-EGFP 和rAAV2-EGFP进行转染,3 d65380;7 d65380;21 ...
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, 2008 目的为非病毒载体阳离子类脂的研究提供参考。方法以阳离子脂质体Lipofectamine 2000为载体,通过DNA延滞试验和质粒转染试验,研究Lipofectamine 2000对不同细胞（HeLa cell、B16 cell、MCF-7 cell和SW-480 cell）的转染效率,将其与其他转染试剂Sofast和DOTAP进行比较,并探讨细胞种类对Lipofectamine 2000转染效率的影响。结果随着复合物中转染试剂比例的增加,DNA延滞作用明显增强。当Lipofectamine ...
段艳() +5 more
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