从江浙蝮蛇毒腺中抽提总RNA,RT-PCR进行体外扩增,获得江浙蝮蛇蛇毒蛋白C激活因子基因,克隆至pGEx-5x-3载体中.对3个重组克隆分别作DNA全序列分析,通过遗传密码推导出相应的氨基酸序列.与其它已知的丝氨酸蛋白酶型蛇毒蛋白的氨基酸作比较,其中许多位置上氨基酸有很强的同源性.该基因的成功克隆,不仅推导出江浙蝮蛇蛇毒蛋白C激活因子的蛋白质序列,也为进一步开展江浙蝮蛇蛇毒蛋白C激活因子蛋白质工程的研究工作打下良好的基础.
WANGYun-gui(王云贵) +4 more
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Characterization and cloning and expression of Polyphenol Oxidase (PPO) from Canarium album [PDF]
多酚氧化酶(EC.1.14.18.1)广泛存在于动物、植物和微生物体内,是一种由核基因编码的含铜金属酶。它是果蔬储藏和加工过程中酶促褐变的重要酶类,能够催化酚类物质的氧化。以橄榄(长营)为原料提取多酚氧化酶进行了分离纯化,得到比活力为1834U/mg的多酚氧化酶粗酶液。研究橄榄多酚氧化酶的理化性质,酶的pH和最适温度分别为6.0和30℃,酶在低于60℃和在pH4.0~8.0范围内较稳定;在30℃、pH6.0条件下,多酚氧化酶催化L-DOPA氧化反应的Km为3.884mmol/L ...
王会芳
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Clone、construction and expression of Synechocystis sp.PCC 6803 Acetyl- CoA carboxylase gene for fat production [PDF]
在化石燃料日益枯竭、环境污染逐渐威胁人类生存的今天,生物柴油在提供可再生能源的同时还可以减少温室气体,从而受到世界各国的广泛重视。蓝藻为光合自养微生物,是大气碳循环主要贡献者,其生物柴油产量是油料作物的8~24倍。乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-coenzymeAcarboxylase,ACCase)是生物体内脂肪生物合成的关键酶,研究发现,过量表达ACCase能够促进生物体脂肪的合成。相对于蓝藻,大肠杆菌具有遗传背景清楚、生长速度快等特点 ...
周赞虎
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Identification of Rice Dwarf Mutant and Fine Mapping of mhd1 Gene [PDF]
株高是水稻株型重要的组成因子,直接关系到水稻的产量,株高过高易引起植株倒伏导致减产,适当矮化则可以达到抗倒、增产的目的。虽然目前已经鉴定不少与水稻矮秆相关的基因,但是能够在生产上实际应用的矮秆主基因仍以sd1为主。因此,寻找和创造能在生产上利用的矮秆种质资源以及研究矮化相关机制具有重要的理论和实践意义。 本研究的材料源于籼稻品种闽恢3301经EMS诱变产生的小粒矮秆突变体,暂命名为mhd1(Minhui3301dwarf1)。mhd1表现出多个异常表型,包括植株矮化、叶片直立变宽、叶色深绿、穗和谷粒较小,
陈伟刚
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Study on Gene Cloning, Expression and Characterization of Stylicin and Invertebrate Lysozyme in Marsupenaeus japonicus [PDF]
日本囊对虾(Musupenaeusjaponicus)是我国沿海重要养殖对虾品种,具有非常高的经济价值。近年来日本囊对虾养殖规模受病害影响停滞不前,尤其是白斑综合症病毒(WSSV)等病毒性对虾病对日本囊对虾养殖产业造成严重的经济损失。目前,对虾病毒病的预防和治疗的方法效果均十分有限,而滥用乱用药物易诱发水质污染和药物残留等严重问题。因此,尽快找到环保高效的治疗方法与策略,成为当前海水对虾养殖产业迫切需要解决的重要科学问题。抗菌肽(AMPs)是对虾抵御病原入侵的一类重要的非特异性免疫成分,其抗细菌、真菌 ...
刘洪涛
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Ecological Function and Environmental Adaptation Mechanisms of Pelagic Archaea in Typical Areas of China Seas [PDF]
浮游古菌是海洋微型生物的重要组成之一。在真光层以下的深海大洋,海洋泉古菌MarineGroupI(MGI)类群的生物量可占总原核生物量的20%。最近,环境基因组学研究的突破性进展和海洋泉古菌MGI类群纯培养株系的获得揭示出大部分MGI类群都是氨氧化古菌(Ammonia-OxidizingArchaea,AOA)。由于MGI类群是海洋中数量最为丰富的微型生物之一,其必然在海洋碳、氮循环中起着重要作用,目前AOA已成为环境微生物生态学的研究热点之一 ...
胡安谊
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目的构建人紧密连接蛋白claudin-6的cDNA真核表达载体。方法应用RT-PCR、T-A克隆、限制性内切酶切及亚克隆等技术将claudin-6基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中。结果酶切鉴定、PCR扩增以及序列分析表明已经将claudin-6基因全长序列克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中。结论获得了人claudin-6基因的全长cDNA片段,构建了claudin-6原核克隆载体和真核表达载体。实验中发现,中国人claudin-6基因的461位点碱基为A ...
吴琼 +7 more
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The cloning, functional Analysis and identification of SNPs associated with growth traits of three digestive enzymes in Haliotis diversicolor [PDF]
杂色鲍(Haliotisdiversicolor)是我国南方的养殖鲍种,具有重要的经济价值。研究与杂色鲍生长相关的基因及其表达规律,并筛查与生长性状相关联的SNP位点,对于深入了解生长性状调控的分子机制,培育具有优良性状的新品种具有重要意义。鲍鱼是植食性软体动物,以海藻为主要的食物和能量来源,而鲍鱼消化液中比较突出的多糖降解酶是褐藻胶裂解酶、纤维素酶、甘露聚糖酶β-1,3-葡聚糖酶和淀粉酶。因此本研究将褐藻胶裂解酶、纤维素酶和淀粉酶的三个基因作为杂色鲍生长性状相关的候选基因,通过基因克隆、饵料对酶活影响、
曹怀峰
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【目的】扩增日本血吸虫26 ku 谷胱甘肽硫-转移酶(Sj26GST)基因片段, 构建其重组原核载体, 以研制SjGST 重 组克隆。【方法】根据已知基因序列设计一对引物, 运用RT-PCR 技术扩增Sj26GST 目的基因cDNA 片段, 将其克隆到pBluescript( KS)质粒中, 并经酶切、PCR 和测序鉴定。【结果】获得GS T-pBluescript(KS)重组克隆。【结论】本实验获得Sj26GST 重 组克隆, 为进一步研制基因工程蛋白疫苗作准备。
李 焱 +7 more
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Molecular cloning, expression of heat shock protein 60 (HSP60) gene in Marsupenaeus japonicus and the association of its polymorphisms with thermal tolerance [PDF]
日本囊对虾(Marsupenaeusjaponicus)是我国重要经济养殖虾类,但其在南方地区存在着高温度夏死亡率较高的养殖难题。因此,急需了解日本囊对虾的耐热性状及耐温的分子机制,为此,我们开展了日本囊对虾MjHSP60基因的克隆、表达分析及其多态性与耐热性状相关性的研究,获得了如下主要结果: 1.MjHSP60基因克隆 在日本囊对虾MjHSP60cDNA序列基础上克隆到了该基因DNA全序列。日本囊对虾MjHSP60基因全长4055bp,结构与拟穴青蟹一致,均由8个外显子及7个内含子构成 ...
李丽君
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