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, 2010 本文采用RT-PCR方法,从齿肋赤藓(Syntrichia caninervis)总RNA中获得ALDH21基因cDNA序列,连接到pMD19-T载体上并转化E.coli DH5α,阳性克隆经PCR鉴定后测序,将测序结果与GenBank中山墙藓(Tortula ruralis)和小立碗藓(Physcomitrella patens)相关基因序列进行同源性比对。结果表明,实验成功克隆了S.caninervis的ALDH21基因的cDNA序列(GenBank登录号:GQ245973),为一个完整的ORF ...
马瑞 +4 more
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, 2008 为了研究重要功能基因在多倍体基因组中的演化情况,通过分子克隆的方法从四倍体大鳞结鱼(Tordouronensis)中获得13条Sox基因序列,分别为SoxB,SoxC和SoxE组成员.对大鳞结鱼Sox基因系统进化分析的结果支持鱼类特异的基因组重复的假说,同时表明,基因Sox19可能为真骨鱼特有的Sox基因家族成员.序列分析显示,与其他物种相比大鳞结鱼中Sox基因的碱基替代,绝大多数为同义替代.结果表明,所得到的Sox基因序列均受到净化选择,同时由多倍化所造成的重复基因对Sox4a ...
李俊兵 +3 more
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, 2006 鳜（Siniperca chuatsi）是我国一种重要的淡水养殖鱼类，但是各种疾病的发生严重影响着其产量，免疫防治是控制疾病的重要而有效的途径。细胞凋亡是鱼类非特异性免疫调节的一个重要方面，本文对鳜凋亡相关基因进行了克隆鉴定及功能研究。 通过构建SMART cDNA文库并结合RACE技术首次在鳜中克隆到三个凋亡相关基因，并采用PCR和Genome Walking的方法克隆这三个基因及其启动子区域。鳜肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（ScTRAIL）基因cDNA全长1359 bp，5′和3 ...
高原
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枯草杆菌Bacillus subtilis降解3-羟基丁酮酶系统基因的分子克隆研究(英文)
四川大学学报. 自然科学版, 2002 以粘粒 pBluescriptSK -为载体 ,构建了枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis 16 8PstI酶切的部分基因文库。用从梭状芽孢杆菌Clostridiummagnum分离的DNA片段作为异源探针 ,通过原位杂交 ,从文库中筛选出两个含有 4 .2kbpPstI DNA的重组克隆菌株 ,分别命名为 pSKP4 2 0和 pSKP4 2 1.分析研究表明 ,该克隆DNA片段包含有编码降解 3 羟基丁酮酶系的基因。限制性酶切分析证实 ,该基因片段在这两个克隆中插入载体的方向正好相反。
黄敏
doaj
, 2013 随着草鱼养殖规模的扩大,草鱼的病毒性疾病极大地影响着草鱼的产量。开展鱼类病毒免疫反应相关功能基因的研究意义重大。研究首先通过同源克隆的方法从草鱼中克隆到了一段Prkrip1基因的EST序列,进一步通过RACE、长片段PCR和Genome walking的方法获得了该基因的全长cDNA序列、基因组DNA序列和启动子区序列。氨基酸序列分析显示,Prkrip1含有3个核定位信号和一个双链RNA结合区,并具有与PKR结合的保守N端区;荧光报告基因的表达证实我们所克隆到的启动子区是有活性的 ...
汪亚平, 董锋, 廖兰杰, 朱作言
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, 2007 Sox基因家族已经在各种脊椎中被广泛发现,它们编码一些调节蛋白,参与许多重要的发育过程(例如性别决定和分化、心脏和中枢神经系统发育等)。Sox基因的共同特征是都包含有一个HMG盒(high mobility group,HMG box)。迄今仅在少数鱼类中报道了Sox基因,在我国重要的经济鱼类中还未见到报道。草鱼 (Ctenopharyngodon idella)是我国最重要的经济鱼类之一,也是目前世界上养殖产量最大的淡水鱼类。草鱼基因组的研究是我国水产养殖动物今后的重要对象之一。利用兼并引物 ...
俞小牧, 钟磊, 童金苟
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T24膀胱癌细胞ARID1A基因的表达与细胞增殖活力相关性研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的探讨AT丰富结合域1A（ARID1A）基因的表达与膀胱癌细胞T24增殖活力的关系,为进一步基因功能研究提供基础。方法利用梯度稀释法分离获得膀胱移行癌细胞系T24的高增殖亚克隆细胞株,体外评价细胞株和亲代细胞系增殖活力差异,检测细胞周期调控基因CCND1和膀胱癌肿瘤干细胞标志因子CD44。检测染色质重建复合物SWI/SNF亚基基因ARID1A在亚克隆和亲代细胞系的转录表达水平差异。结果分离得到65个T24的亚克隆细胞株,其中T24-9亚克隆细胞株不同于亲代的梭形形态,呈细小的圆形形态 ...
吴金斌 +4 more
doaj
, 2011 报道了短尾蝮蛇Gloydius brevicaudus干扰素调节因子2基因(IRF-2)的克隆和cDNA全序列测定分析。目前除在爬行类外,IRF-2基因在大部分的脊椎动物如鱼类、两栖类、鸟类和哺乳类都有报道。为了获得爬行类IRF-2基因的全序列,从短尾蝮蛇的肾、脾、肝和肠4种组织中使用Trizol试剂盒提取了总RNA。从已知的IRF-2基因序列比对设计了简并引物来扩增保守片段。最后使用RACE方法得到IRF-2的cDNA全序列。结果显示短尾蝮蛇的IRF-2基因开放阅读框包含有978个核苷酸 ...
甘小妮, 陈新文
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野生动物学报, 2007 根据GenBank上已发表的H6N2亚型的非结构蛋白基因（NS）序列,设计一对特异性引物,成功从本实验室分离、保存的H6N2禽流感病毒分离株A／Mallard／SanJiang/151／06（H6N2）中克隆到NS基因序列。该克隆基因全长860bp,编码NS1和NS2两种非结构蛋白,与其他H6N2亚型的NS基因进行同源性比较,同源性为71．1％～97．2％,推导的氨基酸序列同源性为62．0％～94．6％。
张智明, 李晓冰, 华育平
doaj
斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)GnRH Ⅱ基因的克隆及启动子分析
, 2013 促性腺激素释放激素(Gonadotrophin-releasing hormone,GnRH)是调控脊椎动物生殖的关键因子之一。文章克隆了经济鱼类斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)GnRHⅡ基因的cDNA、基因组序列及其启动子,发现GnRHⅡ基因启动子中与组织特异性表达相关的区域位于距转录起始点上游2005 bp～956 bp之间。以GnRHⅡ启动子驱动绿色荧光蛋白在斑马鱼胚胎中表达的结果显示,GnRHⅡ神经元主要分布在中脑附近和眼部 ...
陈戟, 罗余山, 朱作言, 胡炜
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