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条纹斑竹鲨IRF-1基因的克隆和特征分析

open access: yes, 2011
鱼类中IRF-1基因的克隆测序目前仅局限于辐鳍鱼类[1,2],而在软骨鱼类中未见报道。IRF-1是干扰素调节因子家族的成员之一[3]。除作为干扰素的转录调节因子外[4],还具有其他功能[5—10]。作为天然免疫重要的调节因子其基因在哺乳类中得到了广泛的克隆和分析。IRF-1与其他家族成员一样,在氨基末端前115个氨基酸都具较高同源性 ...
甘小妮, 陈新文
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牙鲆热休克蛋白家族基因的克隆、鉴定及其表达分析

open access: yes, 2006
本文运用抑制性差减杂交技术,构建了灭活大菱鲆弹状病毒诱导的牙鲆囊胚培养细胞和正常对照细胞间差异表达基因的差减cDNA文库。通过构建SMART-cDNA文库并结合RACE技术,从该细胞模型系统中克隆、鉴定了10个Hsp家族基因一个鱼类蛋白质精氨酸甲基转移酶基因的全长cDNA序列和PoCctz基因的部分cDNA序列。 进一步利用Real-time PCR对11个热休克蛋白家族基因在热休克和灭活病毒诱导下的表达时序的研究表明:在灭活病毒诱导下,牙鲆Hsp基因表达特征与在热休克状态下的表达特征相似 ...
董彩文
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草鱼Sox基因的克隆及其在鱼类基因组加倍和进化研究中的意义

open access: yes, 2007
Sox基因家族已经在各种脊椎中被广泛发现,它们编码一些调节蛋白,参与许多重要的发育过程(例如性别决定和分化、心脏和中枢神经系统发育等)。Sox基因的共同特征是都包含有一个HMG盒(high mobility group,HMG box)。迄今仅在少数鱼类中报道了Sox基因,在我国重要的经济鱼类中还未见到报道。草鱼 (Ctenopharyngodon idella)是我国最重要的经济鱼类之一,也是目前世界上养殖产量最大的淡水鱼类。草鱼基因组的研究是我国水产养殖动物今后的重要对象之一。利用兼并引物 ...
俞小牧, 钟磊, 童金苟
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抗人肺癌单克隆抗体3D_3scFv基因构建及其在E.coli中的表达 [PDF]

open access: yes, 1998
由于免疫原性,鼠源性单克隆抗体在人体疾病治疗方面受到限制,运用基因重组技术,将抗体轻链、重链可变区基因连接,构建单链fV(SCfV)基因.表达制备SCfV片段,由于其分子小,免疫原性弱,有潜在应用前景.本实验将获得的抗人肺癌单克隆抗体轻重链可变区基因,通过lInkEr基因序列连接并克隆至PIg20表达载体,表达制备抗人肺癌SCfV融合蛋白.现报道如下.l材料与方法1.1抗人肺癌单克隆抗体3d_3(MCAb3d_3)重链可变区基因(VH)克隆至表达载体PIg20,以SMAⅠ ...
郭先健   +3 more
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枯草杆菌Bacillus subtilis降解3-羟基丁酮酶系统基因的分子克隆研究(英文)

open access: yes四川大学学报. 自然科学版, 2002
以粘粒 pBluescriptSK -为载体 ,构建了枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis 16 8PstI酶切的部分基因文库。用从梭状芽孢杆菌Clostridiummagnum分离的DNA片段作为异源探针 ,通过原位杂交 ,从文库中筛选出两个含有 4 .2kbpPstI DNA的重组克隆菌株 ,分别命名为 pSKP4 2 0和 pSKP4 2 1.分析研究表明 ,该克隆DNA片段包含有编码降解 3 羟基丁酮酶系的基因。限制性酶切分析证实 ,该基因片段在这两个克隆中插入载体的方向正好相反。
黄敏
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齿肋赤藓乙醛脱氢酶基因ALDH21的克隆与表达分析

open access: yes, 2010
本文采用RT-PCR方法,从齿肋赤藓(Syntrichia caninervis)总RNA中获得ALDH21基因cDNA序列,连接到pMD19-T载体上并转化E.coli DH5α,阳性克隆经PCR鉴定后测序,将测序结果与GenBank中山墙藓(Tortula ruralis)和小立碗藓(Physcomitrella patens)相关基因序列进行同源性比对。结果表明,实验成功克隆了S.caninervis的ALDH21基因的cDNA序列(GenBank登录号:GQ245973),为一个完整的ORF ...
马瑞   +4 more
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彩鲫hira基因片段的克隆及表达分析

open access: yes, 2007
hir/hira基因最先作为组蛋白基因表达的一种负调节因子从酵母中被鉴定出来。现已证实,HIRA包含一组保守的蛋白家族,广泛存在于低等真核生物、无脊椎动物和脊椎动物等多种生物体当中,为生命发育所必需。关于hira基因在动物发育过程中的具体作用研究还不是很多,为了进一步探讨hira基因在鱼类发育过程中的作用,作者根据已知hira基因保守序列设计一对简并引物,分别以彩鲫基因组DNA和卵巢cDNA为模板克隆了彩鲫hira基因(Cahira)片段,该片段基因组序列为2181bp,基因组片段含有6个内含子 ...
王玉凤, 桂建芳, 杜新征
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副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)FlaⅠ基因的合成及其克隆与鉴定

open access: yes, 2002
根据副溶血弧菌野生型菌株BB22 FlaⅠ基因cDNA序列,通过合理的引物设计、链延伸反应、PCR反应以及分子克隆等技术,成功地合成出编码极鞭毛蛋白的FlaⅠ基因全长片段,并将其克隆至pMD18-T载体质粒上 ...
周化民   +5 more
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T24膀胱癌细胞ARID1A基因的表达与细胞增殖活力相关性研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的探讨AT丰富结合域1A(ARID1A)基因的表达与膀胱癌细胞T24增殖活力的关系,为进一步基因功能研究提供基础。方法利用梯度稀释法分离获得膀胱移行癌细胞系T24的高增殖亚克隆细胞株,体外评价细胞株和亲代细胞系增殖活力差异,检测细胞周期调控基因CCND1和膀胱癌肿瘤干细胞标志因子CD44。检测染色质重建复合物SWI/SNF亚基基因ARID1A在亚克隆和亲代细胞系的转录表达水平差异。结果分离得到65个T24的亚克隆细胞株,其中T24-9亚克隆细胞株不同于亲代的梭形形态,呈细小的圆形形态 ...
吴金斌   +4 more
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简化的人纤溶酶原饼环区5基因的克隆及其在大肠杆菌中的融合表达

open access: yes四川大学学报. 自然科学版, 2006
从正常人肝脏组织中提取总RNA,合理设计引物,利用RT-PCR直接得到简化的hPK-5基因.将该基因克隆至原核表达质粒pGEX-1λT,将此重组载体转化大肠杆菌JM109,经PCR、酶切及测序鉴定阳性克隆.用IPTG诱导阳性克隆表达融和蛋白,SDS-PAGE观察表达产物.再通过Western-Blotting鉴定.简化的hPK-5基因的RT-PCR产物为264bp.通过酶切、测序等方法鉴定简化的hPK-5基因正确克隆至原核表达质粒pGEX-1λT中.重组质粒pGEX-1λT/predhPK ...
王健琪, 翟朝阳, 孙剑
doaj  

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