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目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTTP)70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)和中国旱獭α干扰素基因(cwIFNA5)分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
doaj
Over-expression of Xylose isomerase/Xylulokinase and Construction of O2-tolerant hydrogenase in Klebsiella oxytoca HP1 [PDF]
在石化燃料枯竭和全球气候变暖的双重危机下,氢气作为一种可再生、零排放和高热值的清洁能源载体而备受关注。关于氢能的研究主要围绕氢的制取和氢的利用两个方面展开。在众多制氢方式中,生物制氢因其生产成本低、原料来源丰富和环境污染小,从而成为制氢研究的热点。在氢的利用中,燃料电池技术一直以来都是研究的重点。氢酶是一种含金属的氧化还原酶,其广泛存在于微生物中,能够可逆地催化H+的还原和H2的氧化(2H++2e-↔H2)。无论是在氢的制取还是氢的利用中,氢酶都是氢能技术的核心之一 ...
黄钢锋
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目的克隆EB病毒早期蛋白p54的编码基因BMRF1,构建原核表达载体,为相应蛋白的表达和应用奠定基础。方法以含EB病毒的B95-8细胞培养上清为模板,PCR扩增出BMRF1基因。PCR产物经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆至原核表达载体pGEX-5T,用双酶切和DNA测序鉴定重组质粒。结果PCR扩增的特异性片段长度为1 233bp,以此构建的重组质粒pGEX-5T-BMRF1双酶切的片段大小与预期符合,重组克隆外源基因的测序结果与GenBank中的EB病毒BMRF1基因cDNA序列一致 ...
伊强 +4 more
doaj
The role and mechanism of hnRNP A2/B1 in MCF-7 Cells [PDF]
核不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)在很多肿瘤中高表达,但其在 乳腺癌发生发展中的作用还不明确。为了探究其在乳腺癌中的具体作用与机制, 我们通过CRISPR-Cas9基因编辑技术构建敲除hnRNPA2/B1的MCF-7细胞系, 检测其对生物学功能的影响,并研究hnRNPA2/B1对部分基因的可变剪接的作用。 还通过亲和纯化技术结合液质联用质谱(HPLC-MS),构建与分析hnRNPA2/B1 相互作用蛋白网络,利用生物信息学方法对hnRNPB1相互作用蛋白进行KEGG 信号通路及功能分析,
高立斌
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【目的】分离和鉴定日本血吸虫(Schistosoma japonicum , S .j )新基因。【方法】应用免疫学方法筛选S .j cDNA 文库获得阳性克隆;通过PCR 直接序列测定技术, 表达序列标签(EST)同源性检索对阳性克隆插入片段进行鉴定;采用亚克 隆技术及生物信息学等技术, 对获得的日本血吸虫精氨酸酶编码基因序列进行结构与功能的分析。【结果】获得了一个含 1 061 bp外源插入片段的阳性克隆, 其cDNA 序列含有一个840 bp 的阅读框, 编码279 个氨基酸 ...
吴忠道 +3 more
doaj
the mechanism investigation of neuronal specific protein CEND1on cell proliferation [PDF]
阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)是一种神经退行性疾病,临床表现 为渐进性的记忆力丧失以及认知障碍。大量研究阐述了AD的病理特征和微观机 制,但目前为止尚未找到有效的治疗途径,因此继续深入研究AD致病过程,对 于疾病的预防和治疗具有重要意义。研究证实,区别于正常神经元终末分化和停 止分裂的生理状态,AD病人大脑中的神经元细胞周期会发生紊乱,部分神经元 能够重新进入细胞周期。这些神经元的细胞周期被重新激活后,进入细胞凋亡途 径CRND ...
牛雅琼
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Study on selective breeding of new strains with rapid growth and growth characteristic in Marsupenaeus japonicus [PDF]
日本囊对虾(Marsupenaeusjaponicus)体色艳丽,肉质鲜美,是我国重要的养殖虾类。多年来,我国日本囊对虾育苗用的种虾过分依赖海捕资源,用于苗种生产的种虾通常未经选育和检疫,养殖生产苗种的生长较为缓慢、抗病能力差、单产低,这些问题严重制约了日本囊对虾养殖产业的发展。因此,培育生长快速的健康优质虾苗,是关系到日本囊对虾养殖产业可持续发展的重要课题。 论文以课题组选育的日本囊对虾和野生日本囊对虾为材料,通过多元统计方法比较分析了日本囊对虾选育群体和野生群体的形态差异 ...
林瑶琼
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