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空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因的克隆表达 [PDF]
, 2011 目的克隆空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因,构建其原核表达载体,诱导表达及纯化蛋白,为基因工程疫苗的研制打下基础。方法扩增空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因,构建pGEM-T-cjaA克隆载体,以EcoRI和XhoI为酶切位点构建pGEX-4T-1-cjaA原核表达载体。表达载体转化E.coli BL21后诱导表达,SDS-PAGE鉴定表达产物,用Glutathione Sepharose4B纯化重组蛋白。结果成功构建pGEX-4T-1-cjaA表达载体,并获得浓度为10μg ...
李鑫 +8 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 确定F10基因表达对细胞生长的影响,明确F10基因的功能。 【方法】 构建F10基因的真核表达载体,转染重组pRc-CMV2-F10质粒于肺癌细胞系A549, 筛选并获得稳定表达F10基因的细胞克隆A549-F10。通过MTT实验和流式细胞检测F10对细胞生长的影响;通过免疫组化检测细胞中增殖核抗原(PCNA)和细胞周期素D1(cyclin D1)的表达。【结果】 转基因的G418抗性克隆能够检测到F10表达。MTT和流式结果显示F10有促进细胞增殖的作用 ...
doaj
, 2011 报道了短尾蝮蛇Gloydius brevicaudus干扰素调节因子2基因(IRF-2)的克隆和cDNA全序列测定分析。目前除在爬行类外,IRF-2基因在大部分的脊椎动物如鱼类、两栖类、鸟类和哺乳类都有报道。为了获得爬行类IRF-2基因的全序列,从短尾蝮蛇的肾、脾、肝和肠4种组织中使用Trizol试剂盒提取了总RNA。从已知的IRF-2基因序列比对设计了简并引物来扩增保守片段。最后使用RACE方法得到IRF-2的cDNA全序列。结果显示短尾蝮蛇的IRF-2基因开放阅读框包含有978个核苷酸 ...
甘小妮, 陈新文
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易变山羊草抗禾谷孢囊线虫基因中核苷酸结合位点区(NBS)的克隆及序列分析
, 2001 大部分已克隆的植物抗病基因都包含有核苷酸结合位点区 (NBS)和富含亮氨酸的重复序列区 (LRR) .利用来自节节麦的抗禾谷孢囊线虫基因Cre3位点NBS区保守序列设计特异引物 ,从含有来自易变山羊草的抗禾谷孢囊线虫基因的小麦品系E 10的基因组中PCR扩增得到一条约 5 30bp的单一条带 .将扩增条带克隆和序列分析发现 ,该克隆 (Rccn4 )的编码区长 5 2 8bp ,含一个不完整的开放读码框 ,没有起始密码子、终止密码子和内含子结构 ,它编码一个 176个氨基酸残基的蛋白质 ,分子量为 2
余懋群 +1 more
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, 2008 为了研究重要功能基因在多倍体基因组中的演化情况,通过分子克隆的方法从四倍体大鳞结鱼(Tordouronensis)中获得13条Sox基因序列,分别为SoxB,SoxC和SoxE组成员.对大鳞结鱼Sox基因系统进化分析的结果支持鱼类特异的基因组重复的假说,同时表明,基因Sox19可能为真骨鱼特有的Sox基因家族成员.序列分析显示,与其他物种相比大鳞结鱼中Sox基因的碱基替代,绝大多数为同义替代.结果表明,所得到的Sox基因序列均受到净化选择,同时由多倍化所造成的重复基因对Sox4a ...
李俊兵 +3 more
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斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)GnRH Ⅱ基因的克隆及启动子分析
, 2013 促性腺激素释放激素(Gonadotrophin-releasing hormone,GnRH)是调控脊椎动物生殖的关键因子之一。文章克隆了经济鱼类斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)GnRHⅡ基因的cDNA、基因组序列及其启动子,发现GnRHⅡ基因启动子中与组织特异性表达相关的区域位于距转录起始点上游2005 bp～956 bp之间。以GnRHⅡ启动子驱动绿色荧光蛋白在斑马鱼胚胎中表达的结果显示,GnRHⅡ神经元主要分布在中脑附近和眼部 ...
陈戟, 罗余山, 朱作言, 胡炜
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, 2007 从蛙虹彩病毒(Rana gryliovirus,RGV)基因组中克隆了含凋亡相关结构域的新基因-cop(Caspaserecruit ment domain only protein,COP)基因的全部编码区,成功构建了重组表达载体,进行了原核表达,并在鲤鱼上皮瘤细胞(Epithelioma papulosumcyprini,EPC)中进行了亚细胞定位.序列分析表明,RGVcop基因全长288 bp,编码一个长为95 aa,分子量为10.4×103的推定蛋白.二级结构预测表明其含有5个 ...
柯飞, 张奇亚, 赵哲
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齿肋赤藓AP2/ERF转录因子家族基因Scsoloist的克隆与功能分析
, 2016 植物为了适应环境，进化出了一系列的抗逆机制，而转录因子在其中起到非常重要的作用。AP2/ERF作为植物特有的转录因子参与了植物的抗胁迫信号途径，引起了众多的关注。但是对AP2/ERF转录因子的研究主要集中在DREB，ERF，RAV以及AP2亚家族，而对Soloist亚族报道极少。仅两篇文献报道Soloist亚族基因不仅参与了非生物胁迫还参与了生物胁迫的调控。为了更深入的了解Soloist亚族基因的功能，本研究克隆得到了极端耐干藓类植物齿肋赤藓（Syntrichia caninervis ...
李士敏
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胡萝卜软腐欧文氏菌CSSY002菌株hrpN基因的克隆、鉴定及其表达产物Harpin蛋白的活性分析
, 2007 从感染软腐病的胡萝卜组织中分离出胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜亚种(Erwinia carotovora subsp.carotovora)CSSY002菌株.用该菌株接种非寄主植物烟草不能引起过敏反应.构建CSSY002菌株的基因组文库,应用α-P32标记的hrpN基因作探针,通过菌落原位杂交技术从该文库中筛选到1.5~2.0kb的hrpN-like阳性克隆,进一步将该片段亚克隆到pBluescript-II SK(+)载体中,进行核苷酸序列测定.结果表明,hrpN-like基因 ...
张珏, 汤承, 曹茂林, 吴伯骥
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, 2013 为寻找新型植物抗菌肽,通过生物信息学的手段在全基因组范围内进行油菜抗菌肽基因的预测和分析,初步筛选出与已知抗菌肽具有类似序列结构特征的候选基因BnPCD842895。BnPCD842895基因长度为189bp,编码48个氨基酸,通过overlap PCR方法,将合成的抗菌肽基因克隆到pET30a-EDDIE-GFP表达载体上。将大肠杆菌中表达得到的包涵体融合蛋白在体外复性,并通过融合蛋白EDDIE的自我剪切,从而获得不增加任何多余氨基酸的抗菌肽产物 ...
周瑢 +10 more
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