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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】构建人Ⅰ 型基质金属蛋白酶基因(MMP1)真核表达重组质粒, 并进行序列分析。【方法】用逆转录聚 合酶链反应扩增人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 获得目的基因片段(1 407 bp)连接至pcDNA3 载体, 并转化大肠杆菌DH5α, 筛 选阳性克隆并鉴定, 并对片断全长进行DNA 序列测定。【结果】所克隆人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 含全长MMP1 编码区, 与GeneBank 公布序列比较, 仅1 318 位的胞苷酸C 突变为腺苷酸A。并成功构建了含有MMP1 ...
彭 慧, 汪 谦, 黄洁夫
doaj
, 2006 采用RT-PCR方法,从鲢、鲤、鲫三种鱼类肝脏总RNA中克隆出了谷胱甘肽转移酶Pi型(GST Pi) cDNA序列,推导了其编码的氨基酸序列。三种鱼类GST Pi的ORF全长627 bp,编码208个氨基酸。翻译起始密码均为ATG,终止密码子均为TGA。鱼类与哺乳动物、两栖类爪蟾以及节肢动物丝虫之间GST Pi氨基酸序列相似度平均值分别为50％、33％、15％左右 ...
谢平, 孙玉华
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 确定F10基因表达对细胞生长的影响,明确F10基因的功能。 【方法】 构建F10基因的真核表达载体,转染重组pRc-CMV2-F10质粒于肺癌细胞系A549, 筛选并获得稳定表达F10基因的细胞克隆A549-F10。通过MTT实验和流式细胞检测F10对细胞生长的影响;通过免疫组化检测细胞中增殖核抗原(PCNA)和细胞周期素D1(cyclin D1)的表达。【结果】 转基因的G418抗性克隆能够检测到F10表达。MTT和流式结果显示F10有促进细胞增殖的作用 ...
doaj
, 2006 以斜带石斑鱼囊胚期胚胎和尾芽期胚胎分别作为检验组和驱动组,构建了石斑鱼囊胚期胚胎和尾芽期胚胎的抑制性差减杂交cDNA文库。以α-tubulin作为检测指标,显示差减效率分别高达28和27。分别取囊胚期胚胎和尾芽期胚胎各192和960个PCR阳性克隆进行斑点杂交,得到15个囊胚期和131个尾芽期的斑点杂交阳性克隆。测序和数据库比对分析表明,囊胚期15个阳性克隆中有11个已知基因的cDNA片段和没有同源性的4个cDNA片段;而在尾芽期的131个阳性克隆中 ...
李名友, 桂建芳, 周莉, 汲广东
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1996 选取ＩＶ基因型ＨＣＶ及中国和台湾代表株ＨＣＶ的５’ＮＣＲ区保守序列合成引物，以ＲＴ－ＰＣＲ从输血后非甲非乙型肝炎病人血浆中扩增一段３００ｂｐ的ｃＤＮＡ片段作目的基因，钝端插入ｐＵＣ１９的ＳｍａＩ切点，构建了ｐＵＨＣＶ－ＮＣ重组质粒。对ｐＵＨＣＶ－ＮＣ分别或混合应用ＨＣＶ序列特异的内外引物和载体序列特异的通用引物进行ＰＣＲ扩增，所用产物分子量均同预期相符；酶切分析查出ＨＣＶ基因所带有和克隆位点融合所产生的两个外源ＮｃｏＩ切点也存在；证实ｐＵＨＣＶ－ＮＣ中克隆基因是ＨＣＶ的５’ＮＣＲ序列且插入方向为反向 ...
doaj
猪囊尾蚴铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/ZnSOD)基因的克隆和表达
, 2006 目的克隆猪囊尾蚴胞质含铜/锌的超氧化物歧化酶基因(Cu/ZnSOD),并比较其与其它寄生蠕虫相应基因结构的相似性。方法通过获取其它生物Cu/ZnSOD基因的保守区域,设计保守引物,用于扩增该寄生虫的Cu/ZnSOD基因。结果Cu/ZnSOD基因编码一15.6kDa的蛋白,该蛋白的推导序列中含有这类酶的活性和二级结构所需要的所有保守的氨基酸残基,并且与其它寄生虫的相应序列有高达70.6%的相似度。抑制剂研究试验表明所克隆的SOD属于Cu/ZnSOD,该蛋白在大肠杆菌中得以成功表达,表达产物具有SOD活性。
李爱华, Tong Soo Kim
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, 2004 根据棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(Helicoverpaarmigerasinglenucleocapsidnucleopolyhedrovirus,HaSNPV)fp25k基因的序列,设计引物,引入适当的酶切位点,利用PCR扩增出基因片段。将该基因片段克隆至原核表达载体pProEXHTb,经IPTG诱导,在大肠杆菌DH5α中获得了高效表达,表达产物的大小为32kDa。纯化蛋白产物免疫家兔制备抗血清。该抗血清可与原核表达的GST ...
吴东,邓菲,胡志红,袁丽,孙修炼
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, 2007 壳寡糖能有效的诱导植物产生抗病性。本实验室以枯斑三生烟草（Nicotiana tabacum var. samsun NN）为材料,应用mRNA差异显示技术获得96条差异条带,本论文实验从差异条带的筛选着手进行了以下工作： 1.壳寡糖诱导抗性相关基因的筛选。对11个通过mRNA差异显示获得的cDNA条带进行了筛选,结果得到枯斑三生烟的11个没有报道过的cDNA的3’端序列,其中一个cDNA片段与本塞姆氏烟草SKP1 (Nb SKP1)高度同源,因有NbSKP1蛋白与抗病相关的报道,故对其进行深入研究 ...
张付云
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EcbCSL101菌株hrpN基因的克隆__省略_in_EcbCSL101_蛋白
, 2008 胡萝卜软腐欧文氏菌甜菜亚种(Erwinia carotovora subsp.betavasculorum)EcbCSL101菌株具有很强胞外酶分泌活性,接种非寄主植物烟草引起过敏反应。Southern blotting结果表明EcbCSL101菌株中含有hrpN基因。PCR扩增含EcbCSL101完整开放阅读框的DNA片段并克隆到表达载体pET28a(+)中。核苷酸序列分析表明,EcbCSL101菌株的hrpN基因的ORF为1113bp,编码36.65 kD HarpinEcbCSL101蛋白 ...
崔亚亚 +3 more
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, 2016 小麦是世界重要的粮食作物，是人们摄取碳水化合物和蛋白质的重要来源。随着社会经济的发展和生活水平的提高，人们对以小麦为原材料加工的各种精制面食、保健品和营养食品的要求日益增高。蛋白质含量是影响小麦营养和加工品质的重要因素。研究报道，NAM和AAP6基因是控制小麦籽粒蛋白含量的关键基因之一。本研究以实验室收集的小麦材料（包括核心种质资源、育成品种、地方品种、四倍体和人工合成六倍体）为研究对象，同源克隆了小麦籽粒蛋白含量相关的关键基因NAM和TaAAP6-D,并分析它们的等位变异，结合籽粒蛋白含量等相关性状 ...
朱娉
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