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斑马鱼DrSpin-1基因的克隆和特征分析

open access: yes, 2012
Spin蛋白家族是具有Spin/Ssty保守结构域并在配子发生过程中发挥关键作用的一类分子。研究利用简并引物PCR,从斑马鱼成熟卵母细胞SMART cDNA文库中筛选到260 bp的DrSpin-1和DrSpin-2部分序列,经序列同源性比对,斑马鱼DrSpin-1的部分氨基酸序列与银鲫CagSpin一致性高达81%。利用RACEPCR从该cDNA文库中获得斑马鱼DrSpin-1的全长cDNA序列。序列分析表明,DrSpin-1全长cDNA为1082 bp,开放阅读框771 bp,编码257个氨基酸 ...
桂建芳, 王晓磊, 孙敏
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暗纹东方鲀生长激素基因克隆与同源性分析

open access: yes, 2010
克隆获得暗纹东方鲀GH基因,该基因包含6个外显子和5个内含子,在此基础上获得其cDNA序列,共有591bp,编码196个氨基酸。将该cDNA序列转换成蛋白质序列后,结合NCBI数据库中得到的其它24种脊椎动物生长激素基因的蛋白质序列,运用MEGA3.1,以UPGMA法构建东方鲀等25种脊椎动物的生长激素基因进化树,14种鱼类中除了鳗鲡和鳝鱼外聚为一大类,其它动物中哺乳动物、反刍动物、家禽、爬行动物、人以及鳗鲡等聚为另一大类,暗纹东方鲀与红鳍东方鲀生长激素基因的氨基酸同源性达到100%,与斗鱼、杜父鱼 ...
吴旭, 李钟杰, 严美姣
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鲤鱼sGnRH基因克隆及其在成熟个体的表达分析

open access: yes, 2004
采用RACE方法 ,从鲤鱼脑组织克隆了两个差异的sGnRH(salmonGnRH ,[Trp7Leu8]GnRH)cDNAs ,即cDNA1和cDNA2 ,其长度分别为 393和 4 78bp。两个cDNAs都包括一个 2 85bp开放阅读框 ,编码的sGnRH前体为 94个氨基酸残基 ,由一个信号肽、sGnRH十肽和一个由蛋白水解位点 (Gly Lys Arg)连接的促性腺激素释放激素相关肽共 3部分组成。用内含子捕获得到相应的两个差异sGnRH基因 ,即sGnRHgene1和 gene2 ...
黎双飞,胡炜,汪亚平,孙永华,陈尚萍,朱作言
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彩鲫Ran基因全长cDNA的克隆及其组织表达特异性分析

open access: yes, 2003
根据Ran的保守区序列设计简并引物 ,结合SMARTcDNA合成及RACE PCR技术 ,克隆到彩鲫(Carassiusauratuscolorvariety)的Ran基因的cDNA全长 ,其编码区全长为 6 4 8bp ,编码 2 15个氨基酸。采用BLAST程序在NCBI数据库中对其进行同源基因搜索 ,结果表明 ,其推测的编码氨基酸序列与斑马鱼和鲑鱼的Ran基因编码的氨基酸序列的同源性分别高达 98%和 97%。还对其编码区全长序列进行了原核表达 ,以经纯化的表达蛋白免疫家兔 ...
李常健,刘军,石耀华,杨书婷,桂建芳
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牙鲆精氨酸转甲基酶基因的克隆与原核表达

open access: yes, 2004
蛋白质的甲基化如同磷酸化;在RNA加工中;涉及到翻译后的调控;mRNA成熟;转移和稳定;也是细胞因子受体的一种重要的信号传导机制。根据抑制性差减杂交方法建立的牙鲆正常囊胚细胞和受灭活弹状病毒诱导的囊胚细胞之间的差减文库;利用斑点杂交方法筛选出牙鲆精氨酸转甲基酶基因的480bp大小片段;根据该序列设计合成特异引物;应用RACE-PCR方法分别扩增该基因的5’末端和3’末端;经过序列拼接得到全长基因。序列分析表明:所克隆的牙鲆精氨酸转甲基酶基因cDNA长1671bp;编码341个氨基酸 ...
张奇亚   +4 more
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黄鳝DEAD-box家族PL10基因的克隆与序列分析

open access: yes, 2005
通过PCR克隆的方法,从黄鳝(Monopterus albus)中得到两个PL10 基因的cDNA片段Mo PL10A和Mo PL10B,长度均为1.127 kb,推测其编码375个氨基酸的蛋白片段.结合其他PL10类同源物序列,对这两条cDNA进行了分析和初步的功能推测.根据此片段的氨基酸序列构建的系统发育树与形态分类结果一致.在不同组织中的RT PCR结果表明Mo PL10A和Mo ...
彭茂宇,宋平,桂建芳
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LncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖及迁移能力的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2019
目的研究lncRNA FOXD2-AS1对胶质瘤细胞增殖及迁移的作用。方法利用脂质体转染小干扰RNA以沉默lncRNA FOXD2-AS1基因,通过MTT、平板克隆形成实验和transwell小室等实验方法检测胶质瘤细胞的增殖及迁移。结果对照组在96h增殖率为19.8%±1.09%、20.3%±1.12%,沉默lncRNA FOXD2-AS1基因后的增殖率为7.59%±0.615%、17.9%±0.720%,差异有统计学意义。对照组的克隆形成数为119.3±11.0、162.3±50.2 ...
上官文兵   +3 more
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泥鳅肌肉生长抑制素基因片断的克隆及其表达

open access: yes, 2007
肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是动物肌肉生长发育的负调控因子。以泥鳅肌肉cDNA为模板,采用RT-PCR方法克隆了泥鳅MSTN基因的主要片段,其长度为815bp,编码271个氨基酸残基。泥鳅MSTN具有MSTN的共同特征,有蛋白酶水解位点RIRR和保守的半胱氨酸残基。RT-PCR分析表明该基因在肌肉中显著表达,在眼中也有微弱表达,而在其他所检测组织(脑、鳃、心脏、肝脏、肠、精巢、卵巢)未见表达。此结果表明泥鳅MSTN基因除对肌肉生长发育有调控作用以外 ...
陈伟伟   +4 more
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鼠白细胞介素-2 受体 α 、β链基因反义 RNA 真核表达质粒的构建

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000
【目的】构建鼠 IL-2R α与β 链基因的反义 RNA 真核表达质粒, 为反义 RNA 基因治疗细胞免疫相关疾病作准备。 【方法】用限制性内切酶从克隆载体上切下鼠 IL-2R α与β 链cDNA 及鼠 IL-2启动子, 克隆入真核表达质粒 pcDNA3 的多克隆 位点上,用酶切或 PCR 法鉴定正反连接。【结果】得到 4 个反向连接的重组质粒: pcAnti-mIL-2Rα , pcAnti-mIL-2Rβ ,pcAntim IL-2Rα β 及 pciAnti-mIL-2Rα β 。前三者由CMV ...
何承伟, 马涧泉
doaj  

铁皮石斛尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因的克隆与表达分析

open access: yes, 2014
铁皮石斛(Dendrobium officinale)为兰科石斛属多年生附生草本植物,被认为是石斛中的上品,在我国已经有两千多年的用药历史,多糖作为其主要有效成分具有免疫调节、抗氧化、抗肿瘤等多种功效,而目前对其生物合成途径还知之甚少。尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UDP-Glucose pyrophosphorylase,UGPase),是糖代谢的重要酶类之一,具有重要的生理学功能。本文以铁皮石斛组培苗为材料,利用简并引物及RACE技术克隆铁皮石斛尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因(UGP ...
孙晶
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