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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1996 选取ＩＶ基因型ＨＣＶ及中国和台湾代表株ＨＣＶ的５’ＮＣＲ区保守序列合成引物，以ＲＴ－ＰＣＲ从输血后非甲非乙型肝炎病人血浆中扩增一段３００ｂｐ的ｃＤＮＡ片段作目的基因，钝端插入ｐＵＣ１９的ＳｍａＩ切点，构建了ｐＵＨＣＶ－ＮＣ重组质粒。对ｐＵＨＣＶ－ＮＣ分别或混合应用ＨＣＶ序列特异的内外引物和载体序列特异的通用引物进行ＰＣＲ扩增，所用产物分子量均同预期相符；酶切分析查出ＨＣＶ基因所带有和克隆位点融合所产生的两个外源ＮｃｏＩ切点也存在；证实ｐＵＨＣＶ－ＮＣ中克隆基因是ＨＣＶ的５’ＮＣＲ序列且插入方向为反向 ...
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的构建人PTEN基因的真核表达载体并在COS-7细胞中高效表达。方法从人喉粘膜组织中分离总RNA,经逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）得到PTEN全基因。克隆入PTEM-T easy载体上,经过PCR、酶切鉴定为阳性的克隆,进行测序分析。然后将所获得的基因定向克隆入PCI-neo载体中构建表达载体。并将其转入COS-7细胞中进行瞬时表达。结果反转录PCR扩增后的产物,在约1.4 kb处可以看见特异性条带,序列分析表明与GenBank中的PTEN基因序列相同。PCI-PTEN真核载体转染COS ...
陈鸥 +5 more
doaj
Study on transcription factors c-Jun and STAT from Litopenaeus vannamei during WSSV infection [PDF]
, 2016 凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)是我国对虾养殖业的主要品种。然而，病害问题一直困扰着该产业的健康发展。其中白斑综合症病毒(whitespotsyndromevirus，WSSV)是对虾的主要病原体，给对虾产业造成了巨大的经济损失。截止目前，对WSSV还缺乏有效的治疗方法。因此，研究宿主病毒相互作用机制，对寻找阻断病毒感染的靶点具有重要意义。 c-Jun是JNK信号通路下游主要底物分子，参与调控了许多基因的转录。本实验室先前研究表明，凡纳滨对虾JNK被WSSV利用 ...
姚德福
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）目的基因的复制缺陷型重组腺病毒，并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA，使用RT—PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18-T Simple载体测序，将测序完全正确的BDNF目的基因克隆入pShuttle2中，然后利用体外连接法将BDNF目的基因克隆入Adeno—X^TM腺病毒骨架中。Lipofectamine^TM ...
王鹏 +6 more
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Cloning and expreesion of three smad genes and two homologous genes of TGF-β in Trichinella spiralis [PDF]
, 2015 旋毛虫是一种重要寄生虫,寄生于人、猪和鼠等多种动物体内产生致死性疾病。因旋毛虫病易感染，分布范围广泛和难治愈等特性，研究出能有效治疗旋毛虫病的制剂已成为全世界关注的热点。 哺乳动物中TGF-beta信号转导由TGF-β、Activin、inhibin、GDF、BMP和MIS等组成，TGF-beta参与细胞增殖分化、胚胎发育和骨形成的调控。在哺乳动物中TGF-beta信号途径的研究已经比较深入，但TGF-beta信号转导在旋毛虫中的报道还比较少。本文研究的smad-1和smad ...
刘燕
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 确定F10基因表达对细胞生长的影响,明确F10基因的功能。 【方法】 构建F10基因的真核表达载体,转染重组pRc-CMV2-F10质粒于肺癌细胞系A549, 筛选并获得稳定表达F10基因的细胞克隆A549-F10。通过MTT实验和流式细胞检测F10对细胞生长的影响;通过免疫组化检测细胞中增殖核抗原(PCNA)和细胞周期素D1(cyclin D1)的表达。【结果】 转基因的G418抗性克隆能够检测到F10表达。MTT和流式结果显示F10有促进细胞增殖的作用 ...
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建人β-防御素2的融合性原核表达载体,为今后基因工程手段表达纯化及生产人β-防御素-2奠定基础。方法体外基因合成人β-防御素2（HBD-2）的基因片段,并克隆入pMD18T中间载体中,经酶切鉴定后再克隆入pET32a原核表达载体中,与载体中所固有的TrX-A形成融合基因。结果构建的融合性原核表达载体经酶切鉴定无突变发生。结论成功地构建了pET-32a-（HBD-2）。
魏洪涛, 董震, 张国利
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野生动物学报, 2009 根据GenBank上已发表的猪甘露聚糖结合凝集素A基因序列,设计一对特异性引物,通过RT-PCR法成功地从野猪肝脏中克隆到MBL-A基因序列。该克隆基因全长为875 bp,包含MBL-A的完整开放阅读框。同源性分析显示野猪MBL-A基因与家猪核苷酸序列同源性在99%,推导的氨基酸序列同源性为100%;与其他哺乳动物相比核苷酸序列同源性在73%～83%之间,推导的氨基酸序列同源性在60%～81%之间。
孙玉刚 +4 more
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