Results 61 to 70 of about 10,612 (205)
目的克隆人尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)基因,制备和鉴定针对人uPA的单克隆抗体,检测uPA在乳腺癌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MDA231总RNA中扩增克隆uPA基因,构建可表达uPA蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达GST-His-uPA融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养,并进行三次亚克隆筛选出单克隆细胞株,
赵桂梅 +3 more
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Functional Characterization of AtST39 in Stress Response and AtMPA Mediating Pollen Development [PDF]
基因芯片显示番茄细菌性叶斑病原菌Pseudomonassyringaepv.tomatoDC3000(PstDC3000),干旱、冷和盐等逆境处理及在开花关键基因lfy突变体中都能够上调AtST39(At3g46110)基因表达;AtMPA(At1g05577)在拟南芥单核花粉粒向三核花粉发育的过程中特异性表达。但是AtST39参与胁迫和AtMPA在介导花粉发育的分子机制知之甚少。我们主要对AtST39进行了探索研究,结果如下: (1)NCBI数据库显示YWC基因家族共有185个蛋白家族成员 ...
肖世民
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【目的】为探索腺病毒载体在基因治疗中的应用及其表达目的抗原的有效性。【方法】用 BamHⅠ 、EcoRⅠ双切 质粒 pBluscript KS+ -HBs, 回收 S 基因片段, 定向克隆插入质粒 pACCMVpL 中相应的酶切位点, 通过快速抽提酶切鉴定筛选 重组质粒。【结果】挑取的 8 个克隆经 BamHⅠ 、EcoRⅠ酶切鉴定, 有 950 bp 的目的基因片段, 证明为重组体。【结论】成功 构建表达 HBsAg 基因的重组腺病毒载体。
周 智 +4 more
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随着科学技术的发展,重金属离子污染越来越严重,严重危及人类健康和安全。如何降低重金属对人体危害已成为目前亟待解决安全性问题之一。金属硫蛋白(MT)作为高效的天然解毒剂,一直是生物学与医学领域中基础研究和应用研究的热点之一,并在医学、化妆品、保健食品添加剂、环保等方面得到了广泛的应用。目前,国内市场上常见的MT多数是从兔肝脏中提纯,由于MT原料需求特别,MT原料来源已成为制约该领域发展的瓶颈之一。利用原核大肠杆菌作为表达宿主,采用基因重组和发酵技术是获得大量高纯MT的重要途径之一 ...
阎光宇
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Research on Roles of Nucleophosmin in Human Osteosarcoma Cells [PDF]
Nucleophosmin作为重要的核仁磷酸化蛋白,在细胞的生命活动过程中发挥多种功能,并在多种肿瘤细胞中发生表达与细胞定位的变化。为探究Nucleophosmin在人成骨肉瘤细胞MG63中的功能作用与分子机制,本论文在成功制备Nucleophosmin兔多克隆抗体的基础上,通过构建正常定位以及胞质定位的Nucleophosmin表达载体,结合免疫共沉淀(Co-IP)、GST-pulldown、免疫荧光共定位、免疫亲和纯化和液相色谱-串联质谱联用技术(LC-MS/MS ...
石静娴
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用cDMDs探针,从人X染色体噬菌体文库中筛选并作DNA印迹杂交鉴定出含有抗肌萎缩蛋白基因51号外显子的克隆。经限制酶切图谱分析,确定KpnⅠ和HindⅡ为亚克隆位点,从而获得了与抗肌萎缩蛋白基因51号外显子相连的50和51号内含子亚克隆,为该区段的核苷酸顺序分析打下了基础。
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【目的】构建携 HBx 基因的逆转录病毒载体, 为研究 HBx 基因与肝癌生物学行为间的关系提供基础。【方法】采 用 PCR 技术从 HBV 全基因组中扩增 HBx 基因; 将 HBx 基因亚克隆至质粒 pLNSX, 构建质粒 pLNSHBx,磷酸钙-DNA 共沉淀 法将重组体导入包装细胞系 PA317, 检测培养上清病毒滴度。【结果】应用 PCR 技术成功地从 HBV 基因组中克隆出全长 HBx 基因, 并经序列分析证实; 建立了产病毒细胞株 PA317/HBx,检测其培养上清病毒滴度为 8.
闵 军, 刘彦文, 陈积圣
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Dynamic Analysis of Protein’s Conformational Transition by the Single Molecular Manipulation of Magnetic Tweezers [PDF]
磁镊技术可以在单分子的尺度上对生物大分子进行长时间的稳定力学拉伸实验,因此对于研究蛋白质的构象转变动力学问题提供了最为直接有效的方法和手段。本课题选用肌联蛋白作为单分子实验的目标蛋白。肌联蛋白是一种典型的力学性蛋白。它连接肌小节的两端,在肌肉的被动弹性及肌肉收缩中扮演极其重要的角色。之前关于肌联蛋白的单分子力学研究主要是基于AFM单分子力谱。然而,由于AFM设备本身在稳定性方面的限制,其之前研究的力学范围多集中于100pN以上。因此,肌联蛋白在0-100pN区间的动力学数据至今仍是一片空白 ...
袁国华
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应用完整的DMDcDNA探针,从人YAC基因文库中筛选并Southern杂交鉴定5个YAC-DMD克隆,其分子量分别为900kb,800kb,650kb,450kb和450kb。这些克隆是抗肌萎缩蛋白基因特定区域DNA用之不竭的源泉,为抗肌萎缩蛋白基因结构和发病机制的研究创造了条件。
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