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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1994 用ｃＤＭＤｓ探针，从人Ｘ染色体噬菌体文库中筛选并作ＤＮＡ印迹杂交鉴定出含有抗肌萎缩蛋白基因５１号外显子的克隆。经限制酶切图谱分析，确定ＫｐｎⅠ和ＨｉｎｄⅡ为亚克隆位点，从而获得了与抗肌萎缩蛋白基因５１号外显子相连的５０和５１号内含子亚克隆，为该区段的核苷酸顺序分析打下了基础。
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的克隆人尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plasminogen activator,uPA）基因,制备和鉴定针对人uPA的单克隆抗体,检测uPA在乳腺癌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MDA231总RNA中扩增克隆uPA基因,构建可表达uPA蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达GST-His-uPA融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞（SP2/0）融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养,并进行三次亚克隆筛选出单克隆细胞株,
赵桂梅 +3 more
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, 2006 Sox基因是一类进化中高度保守的转录因子家族，在细胞命运决定及动物的许多发育过程中都发挥着作用。 在本研究中，我们克隆了斜带石斑鱼（Epinephelus coioides）Sox3基因(EcSox3)，银鲫(Carassius auratus gibelio)Sox3基因 (CagSox3), 并制备了EcSOX3, EcSOX9 和 CagSOX3 的多克隆抗体。 在石斑鱼胚胎发育过程中， EcSox3从高囊胚期开始转录。胚胎整体原位杂交和免疫荧光定位显示 ...
姚波
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, 2005 用RACE PCR获得了鳜白介素-1β(IL-1β)的全长cDNA.鳜IL-1β的cDNA全长为1298 nt(核苷酸),其5′非编码区包含UTR 93 nt;3′非编码区包含452 nt;其开放阅读框内包含753 nt,翻译成251个氨基酸.将鳜IL-1β克隆到原核表达载体pET-32a上,在大肠杆菌Rosetta- gami(DE3 ...
王改玲,孙宝剑,王高学,聂品
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1996 提要用D M D c l 〕N A S 探针从假肥大型肌营养不良( uD e h e n n e m u s e u la r d y s t r o p h犷, D M D ) 基因的Y A C 克隆的c o s m id 亚克隆库中筛选到9 个阳性e o s m id 克隆, S o u t he r n 杂交鉴定e o s m id c O4 61 含D M D 基因的第51 号外显子, 将该c os m 记亚克隆于p V C l ls 中, 获得含D M D 基因第50 和51 ...
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】为探索腺病毒载体在基因治疗中的应用及其表达目的抗原的有效性。【方法】用 BamHⅠ 、EcoRⅠ双切 质粒 pBluscript KS+ -HBs, 回收 S 基因片段, 定向克隆插入质粒 pACCMVpL 中相应的酶切位点, 通过快速抽提酶切鉴定筛选 重组质粒。【结果】挑取的 8 个克隆经 BamHⅠ 、EcoRⅠ酶切鉴定, 有 950 bp 的目的基因片段, 证明为重组体。【结论】成功 构建表达 HBsAg 基因的重组腺病毒载体。
周 智 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1994 应用完整的ＤＭＤｃＤＮＡ探针，从人ＹＡＣ基因文库中筛选并Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交鉴定５个ＹＡＣ－ＤＭＤ克隆，其分子量分别为９００ｋｂ，８００ｋｂ，６５０ｋｂ，４５０ｋｂ和４５０ｋｂ。这些克隆是抗肌萎缩蛋白基因特定区域ＤＮＡ用之不竭的源泉，为抗肌萎缩蛋白基因结构和发病机制的研究创造了条件。
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】构建携 HBx 基因的逆转录病毒载体, 为研究 HBx 基因与肝癌生物学行为间的关系提供基础。【方法】采 用 PCR 技术从 HBV 全基因组中扩增 HBx 基因; 将 HBx 基因亚克隆至质粒 pLNSX, 构建质粒 pLNSHBx,磷酸钙-DNA 共沉淀 法将重组体导入包装细胞系 PA317, 检测培养上清病毒滴度。【结果】应用 PCR 技术成功地从 HBV 基因组中克隆出全长 HBx 基因, 并经序列分析证实; 建立了产病毒细胞株 PA317/HBx,检测其培养上清病毒滴度为 8.
闵 军, 刘彦文, 陈积圣
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, 2007 从蛙虹彩病毒(Rana gryliovirus,RGV)基因组中克隆了含凋亡相关结构域的新基因-cop(Caspaserecruit ment domain only protein,COP)基因的全部编码区,成功构建了重组表达载体,进行了原核表达,并在鲤鱼上皮瘤细胞(Epithelioma papulosumcyprini,EPC)中进行了亚细胞定位.序列分析表明,RGVcop基因全长288 bp,编码一个长为95 aa,分子量为10.4×103的推定蛋白.二级结构预测表明其含有5个 ...
柯飞, 张奇亚, 赵哲
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】克隆并测定恶性疟原虫海南株(FCC1/ HN)肝期抗原1 基因(LS A-1 )3′端序列, 比较FCC1/ HN 株与国 外分离株LS A-1 3′端序列的差异。【方法】应用PCR 技术从FCC1/HN 株基因组DNA 中扩增LS A-1 3′端序列, 用T-A 克隆 法将其克隆入pMD18-T 载体。阳性克隆的重组质粒经酶切及PCR 扩增鉴定后, 用双脱氧链末端终止法进行基因序列测定。 应用DNAS TAR 软件进行不同分离株LS A-1 3′端序列的同源性分析。【结果】PCR ...
单志新 +5 more
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