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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】分离和鉴定日本血吸虫(Schistosoma japonicum , S .j )新基因。【方法】应用免疫学方法筛选S .j cDNA 文库获得阳性克隆;通过PCR 直接序列测定技术, 表达序列标签(EST)同源性检索对阳性克隆插入片段进行鉴定;采用亚克 隆技术及生物信息学等技术, 对获得的日本血吸虫精氨酸酶编码基因序列进行结构与功能的分析。【结果】获得了一个含 1 061 bp外源插入片段的阳性克隆, 其cDNA 序列含有一个840 bp 的阅读框, 编码279 个氨基酸 ...
吴忠道 +3 more
doaj
, 2006 以斜带石斑鱼囊胚期胚胎和尾芽期胚胎分别作为检验组和驱动组,构建了石斑鱼囊胚期胚胎和尾芽期胚胎的抑制性差减杂交cDNA文库。以α-tubulin作为检测指标,显示差减效率分别高达28和27。分别取囊胚期胚胎和尾芽期胚胎各192和960个PCR阳性克隆进行斑点杂交,得到15个囊胚期和131个尾芽期的斑点杂交阳性克隆。测序和数据库比对分析表明,囊胚期15个阳性克隆中有11个已知基因的cDNA片段和没有同源性的4个cDNA片段;而在尾芽期的131个阳性克隆中 ...
李名友, 桂建芳, 周莉, 汲广东
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, 2006 鳜（Siniperca chuatsi）是我国一种重要的淡水养殖鱼类，但是各种疾病的发生严重影响着其产量，免疫防治是控制疾病的重要而有效的途径。细胞凋亡是鱼类非特异性免疫调节的一个重要方面，本文对鳜凋亡相关基因进行了克隆鉴定及功能研究。 通过构建SMART cDNA文库并结合RACE技术首次在鳜中克隆到三个凋亡相关基因，并采用PCR和Genome Walking的方法克隆这三个基因及其启动子区域。鳜肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（ScTRAIL）基因cDNA全长1359 bp，5′和3 ...
高原
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】为探索腺病毒载体在基因治疗中的应用及其表达目的抗原的有效性。【方法】用 BamHⅠ 、EcoRⅠ双切 质粒 pBluscript KS+ -HBs, 回收 S 基因片段, 定向克隆插入质粒 pACCMVpL 中相应的酶切位点, 通过快速抽提酶切鉴定筛选 重组质粒。【结果】挑取的 8 个克隆经 BamHⅠ 、EcoRⅠ酶切鉴定, 有 950 bp 的目的基因片段, 证明为重组体。【结论】成功 构建表达 HBsAg 基因的重组腺病毒载体。
周 智 +4 more
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, 2003 转基因动物整合位点克隆及相关序列特征研究是探索外源基因整合机制和整合稳定性的重要手段。转基因整合位点序列的克隆方法主要有:个体基因组文库筛选法、反向PCR法、热不对称交互式PCR法和质粒回收法。4种方法各有优缺点,可根据不同条件选用。克隆到的整合位点序列表明 ...
吴波,朱作言
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】构建携 HBx 基因的逆转录病毒载体, 为研究 HBx 基因与肝癌生物学行为间的关系提供基础。【方法】采 用 PCR 技术从 HBV 全基因组中扩增 HBx 基因; 将 HBx 基因亚克隆至质粒 pLNSX, 构建质粒 pLNSHBx,磷酸钙-DNA 共沉淀 法将重组体导入包装细胞系 PA317, 检测培养上清病毒滴度。【结果】应用 PCR 技术成功地从 HBV 基因组中克隆出全长 HBx 基因, 并经序列分析证实; 建立了产病毒细胞株 PA317/HBx,检测其培养上清病毒滴度为 8.
闵 军, 刘彦文, 陈积圣
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】克隆并测定恶性疟原虫海南株(FCC1/ HN)肝期抗原1 基因(LS A-1 )3′端序列, 比较FCC1/ HN 株与国 外分离株LS A-1 3′端序列的差异。【方法】应用PCR 技术从FCC1/HN 株基因组DNA 中扩增LS A-1 3′端序列, 用T-A 克隆 法将其克隆入pMD18-T 载体。阳性克隆的重组质粒经酶切及PCR 扩增鉴定后, 用双脱氧链末端终止法进行基因序列测定。 应用DNAS TAR 软件进行不同分离株LS A-1 3′端序列的同源性分析。【结果】PCR ...
单志新 +5 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】构建人Ⅰ 型基质金属蛋白酶基因(MMP1)真核表达重组质粒, 并进行序列分析。【方法】用逆转录聚 合酶链反应扩增人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 获得目的基因片段(1 407 bp)连接至pcDNA3 载体, 并转化大肠杆菌DH5α, 筛 选阳性克隆并鉴定, 并对片断全长进行DNA 序列测定。【结果】所克隆人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 含全长MMP1 编码区, 与GeneBank 公布序列比较, 仅1 318 位的胞苷酸C 突变为腺苷酸A。并成功构建了含有MMP1 ...
彭 慧, 汪 谦, 黄洁夫
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1996 选取ＩＶ基因型ＨＣＶ及中国和台湾代表株ＨＣＶ的５’ＮＣＲ区保守序列合成引物，以ＲＴ－ＰＣＲ从输血后非甲非乙型肝炎病人血浆中扩增一段３００ｂｐ的ｃＤＮＡ片段作目的基因，钝端插入ｐＵＣ１９的ＳｍａＩ切点，构建了ｐＵＨＣＶ－ＮＣ重组质粒。对ｐＵＨＣＶ－ＮＣ分别或混合应用ＨＣＶ序列特异的内外引物和载体序列特异的通用引物进行ＰＣＲ扩增，所用产物分子量均同预期相符；酶切分析查出ＨＣＶ基因所带有和克隆位点融合所产生的两个外源ＮｃｏＩ切点也存在；证实ｐＵＨＣＶ－ＮＣ中克隆基因是ＨＣＶ的５’ＮＣＲ序列且插入方向为反向 ...
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青稞B-hordein基因对小麦面粉加工特性的影响及新B-hordein基因的克隆
, 2014 B组醇溶蛋白（B-hordein）是大麦的主要贮藏蛋白之一，其种类、数量和分布是影响大麦酿造、食用及饲养品质的重要因素之一，与大麦营养品质和加工品质密切相关。B组醇溶蛋白的结构与小麦低分子量谷蛋白（low-moleculer-weight glutenin subunit, LMW-GS）相似，推测其对小麦品质具有类似LMW-GS的功能。 本研究以“转B-hordein基因小麦”高代品系和其受体材料为研究对象，初步分析青稞B-hordein对转基因小麦面粉加工特性的影响。同时，从野生大麦和青稞中克隆B ...
马兴芹
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