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, 2010 采用生物信息学方法首次对非洲爪蟾短型肽聚糖识别蛋白(xePGRP-S)基因进行了克隆,并对其在胚胎发育和成年爪蟾各组织中的表达状况进行了分析。xePGRP-ScDNA全长720bp,开放阅读框为549bp,编码182个氨基酸。序列比对显示xePGRP-S与其他物种PGRP-S的序列相似性在42.4%—50.5%之间。RT-PCR显示在非洲爪蟾胚胎发育至3d时可以明显检测到xePGRP-S的表达,之后呈持续性表达,且在所检测的心、肝、脾、肺、肾 ...
昌鸣先 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 【目的】研究大鼠急性局灶性脑缺血时缺血组织与非缺血组织中基因表达的差异,克隆出与脑缺血相关的基因。【方法】应用荧光差异显示PCR(FDDPCR)从同一例大鼠大脑皮层缺血组织和非缺血组织中筛选出有表达差异的基因片段,经反向Northernblot杂交,将杂交阳性的片段且经RT-PCR反复验证,选取差异明显的片段进行克隆测序;经生物信息学分析处理,选取同源性低的EST片段R6,利用cDNA5’端快速扩增PCR(5’RACE法)进行基因全长的克隆。【结果】利用5’RACE法成功地克隆EST片段R6至编码区 ...
臧林泉
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The phosphorylation of BAG3 by CDK5 and its roles in astrocytes [PDF]
, 2016 细胞周期素依赖性蛋白激酶5（Cyclin-DependentKinase5，CDK5)是细胞周期蛋白依赖性丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族中的一个成员，在神经系统的发育中发挥了至关重要的作用。CDK5的调节亚基P35、P39是神经系统特异性表达的蛋白，因此赋予了CDK5在神经系统中特异的激酶活性，使CDK5在调控神经递质传递，神经元凋亡等方面发挥了重要作用。对于CDK5的研究一直集中在对其新底物的发现和鉴定上，至今为止有40余个CDK5的底物被鉴定出来。作为脯氨酸依赖性蛋白激酶，CDK5可以特异磷酸化包含有 ...
张冠云
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】构建以基因佐剂hGM-CSF基因为基础的真核表达质粒pIGM-CSF,并在宫颈癌细胞HeLa中表达与鉴定。【方法】采用聚合酶链反应从载体pORF-hGM-CSF中,扩增出hGM-CSF基因,克隆到双顺反子真核表达载体pIRES的多克隆位点B（MCSB）中,构建pIGM-CSF真核表达载体。然后采用脂质体转染法将其转染HeLa细胞,用RT-PCR在RNA水平和ELISA在蛋白水平检测其在真核细胞中的表达。【结果】所克隆hGM-CSF基因片段经测序完全正确;重组质粒转染Hela细胞后,检测有hGM ...
卢燕茹, 江振友
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Roles of AC-cathB-1, a Cathepsin B-like Cysteine Protease of Angiostrongylus cantonensis, in Host Gut Invasion [PDF]
, 2015 广州管圆线虫是引起嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎和脑膜脑炎的主要病原生物，该病也因此被命名为广州管圆线虫病。广州管圆虫属于管圆线虫属，中间宿主为软体动物，终末宿主为啮齿类动物，人因误食未煮熟的携带其第三期幼虫（L3）的软体动物而意外感染，L3污染的其他食物或水源也可导致感染。近年来，随着人们饮食习惯的改变和水陆交通日趋发达，该病的流行呈上升趋势。然而，我们在其诊断和治疗方面仍缺乏有效手段，因此对其的进一步研究很有必要。 小肠壁作为机体防御病原体入侵的天然屏障之一 ...
龙瀛
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】构建人瘦素基因 cDNA 克隆, 并进行序列分析。【方法】用逆转录聚合酶链反应扩增人瘦素基因 cDNA , 获得片段( 640 bp)连接至 pUC19 载体, 并转化大肠杆菌 DH5α。以末端终止法进行序列测定。【结果】所克隆的人瘦素 cDNA 含全长的人瘦素基因编码区,仅 287 位的腺苷酸被鸟苷酸代替, 导致 96 位编码谷氨酰胺的密码子 CAA 改变为编码精氨酸的 CGA, 其意义尚待阐明。【结论】以逆转录聚合酶链反应方法成功地构建了人瘦素基因 cDNA 克隆。
徐明彤, 钟光恕, 傅祖植
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The cloning，expression and characterization of the Marsupenaeus japonicus ML gene (MjML) [PDF]
, 2016 日本囊对虾(Marsupenaeusjaponicus)是我国四大养殖对虾品种之一，具有重要的经济价值。日本囊对虾幼体发育过程复杂，受精卵孵化后需要经过无节幼体，溞状幼体，糠虾幼体和仔虾4个发育阶段，发育过程中蜕皮频繁，蜕皮周期较短。近年来，随着日本囊对虾养殖规模的逐步扩大，各种细菌性疾病对其养殖业的发展造成了巨大的影响，并造成了严重的经济损失。 ML(MD-2-relatedLipid-recognition)家族为一类具有保守ML单结构域的蛋白质，能够直接和脂类结合 ...
徐伊桦
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Yap Regulates ATF6-Mediated Unfolded Protein Response [PDF]
, 2015 Hippo信号通路最早在果蝇里发现，是在进化上高度保守的一条激酶级联的通路，当Hippo通路的缺失会造其下游调控因子Yap或Taz的激活，促进细胞增殖，抑制细胞凋亡，从而导致器官增大和肿瘤产生。此外，大量文献阐述了内质网压力和肿瘤产生具有相关性。本实验室研究表明，Hippo通路的缺失或Yap蛋白的激活会引起内质网应激信号通路的激活和内质网的增大，并通过内质网应激反应导致肝脏器官增大和肿瘤生成。 当Hippo激酶，在高等动物的同源物为Mst1和Mst2激酶的缺失或Yap激活时 ...
蔡亚波
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Engineering Ferritin Nanoparticles for Theranostic Probes Development [PDF]
, 2016 疾病的诊断治疗学在近年来得到了巨大关注和广泛研究，以蛋白质为基础的纳米材料具有优异生物相容性、生物降解性、灵活的可修饰性等特点，在癌症的诊疗一体化研究上发挥着巨大作用。鉴于发展以蛋白质为核心的新型诊疗一体化探针具有重要的可应用和临床转化意义，我们在本论文中研究设计了多种以铁蛋白为核心的纳米材料，并着重探究了各种材料在诊疗一体化中的应用。主要内容概括如下： 第一章，我们简要介绍了肿瘤诊断治疗技术的发展和现状，着重探讨了肿瘤诊断治疗一体化的研究现状 ...
王占通
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】克隆人地中海贫血基因β654, 并进行序列分析, 为下游转基因小鼠模型的建立奠定工作基础。【方法】 以PCR 法扩增获得人β654 基因, 将其克隆入卸除了人β 基因的质粒pBGT51 中, 酶切、反向点杂交及测序法鉴定重组质粒。 【结果】所构建的重组质粒中含人β654 基因, 其引入方向正确, 序列分析结果正确。【结论】构建所得的重组质粒可用于下游 的转基因工作。
方小武, 曾瑞萍, 胡 彬
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