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抗肌萎缩蛋白基因51号外显子的筛选及其两侧内含子的亚克隆

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1994
用cDMDs探针,从人X染色体噬菌体文库中筛选并作DNA印迹杂交鉴定出含有抗肌萎缩蛋白基因51号外显子的克隆。经限制酶切图谱分析,确定KpnⅠ和HindⅡ为亚克隆位点,从而获得了与抗肌萎缩蛋白基因51号外显子相连的50和51号内含子亚克隆,为该区段的核苷酸顺序分析打下了基础。
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大鼠BDNF基因复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006
【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)目的基因的复制缺陷型重组腺病毒,并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA,使用RT—PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18-T Simple载体测序,将测序完全正确的BDNF目的基因克隆入pShuttle2中,然后利用体外连接法将BDNF目的基因克隆入Adeno—X^TM腺病毒骨架中。Lipofectamine^TM ...
王鹏   +6 more
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抗肌萎缩蛋白基因YAC克隆的筛选和鉴定

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1994
应用完整的DMDcDNA探针,从人YAC基因文库中筛选并Southern杂交鉴定5个YAC-DMD克隆,其分子量分别为900kb,800kb,650kb,450kb和450kb。这些克隆是抗肌萎缩蛋白基因特定区域DNA用之不竭的源泉,为抗肌萎缩蛋白基因结构和发病机制的研究创造了条件。
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人Ⅰ型基质金属蛋白酶基因真核表达重组质粒的构建

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001
【目的】构建人Ⅰ 型基质金属蛋白酶基因(MMP1)真核表达重组质粒, 并进行序列分析。【方法】用逆转录聚 合酶链反应扩增人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 获得目的基因片段(1 407 bp)连接至pcDNA3 载体, 并转化大肠杆菌DH5α, 筛 选阳性克隆并鉴定, 并对片断全长进行DNA 序列测定。【结果】所克隆人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 含全长MMP1 编码区, 与GeneBank 公布序列比较, 仅1 318 位的胞苷酸C 突变为腺苷酸A。并成功构建了含有MMP1 ...
彭 慧, 汪 谦, 黄洁夫
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F10基因对细胞中PCNA和Cyclin D1表达的影响

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009
【目的】 确定F10基因表达对细胞生长的影响,明确F10基因的功能。 【方法】 构建F10基因的真核表达载体,转染重组pRc-CMV2-F10质粒于肺癌细胞系A549, 筛选并获得稳定表达F10基因的细胞克隆A549-F10。通过MTT实验和流式细胞检测F10对细胞生长的影响;通过免疫组化检测细胞中增殖核抗原(PCNA)和细胞周期素D1(cyclin D1)的表达。【结果】 转基因的G418抗性克隆能够检测到F10表达。MTT和流式结果显示F10有促进细胞增殖的作用 ...
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野猪甘露聚糖结合凝集素A基因的克隆及其生物信息学分析

open access: yes野生动物学报, 2009
根据GenBank上已发表的猪甘露聚糖结合凝集素A基因序列,设计一对特异性引物,通过RT-PCR法成功地从野猪肝脏中克隆到MBL-A基因序列。该克隆基因全长为875 bp,包含MBL-A的完整开放阅读框。同源性分析显示野猪MBL-A基因与家猪核苷酸序列同源性在99%,推导的氨基酸序列同源性为100%;与其他哺乳动物相比核苷酸序列同源性在73%~83%之间,推导的氨基酸序列同源性在60%~81%之间。
孙玉刚   +4 more
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