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The crystal structures of Histidine kinase YycG in active and inactive state [PDF]
双组分信号转导系统(Twocomponentsignaltransductionsystem,TCS)由组氨酸激酶蛋白和对应的反应调控蛋白组成,是细菌中普遍存在的高效且重要的信号转导通路。其中YycFG双组分系统是目前已知分布最广泛的重要TCS之一,普遍存在于包括金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌和粪肠球菌等常见致病菌在内的低G+C含量的革兰氏阳性菌中。YycFG双组分系统在细菌的细胞壁代谢、细胞膜形成以及一些耐药菌株的抗药性中发挥着至关重要的作用。但是,YycFG双组分系统的信号转导机制和分子结构仍然不清楚 ...
蔡永飞
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提要用D M D c l 〕N A S 探针从假肥大型肌营养不良( uD e h e n n e m u s e u la r d y s t r o p h犷, D M D ) 基因的Y A C 克隆的c o s m id 亚克隆库中筛选到9 个阳性e o s m id 克隆, S o u t he r n 杂交鉴定e o s m id c O4 61 含D M D 基因的第51 号外显子, 将该c os m 记亚克隆于p V C l ls 中, 获得含D M D 基因第50 和51 ...
doaj
Study on transcription factors c-Jun and STAT from Litopenaeus vannamei during WSSV infection [PDF]
凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)是我国对虾养殖业的主要品种。然而,病害问题一直困扰着该产业的健康发展。其中白斑综合症病毒(whitespotsyndromevirus,WSSV)是对虾的主要病原体,给对虾产业造成了巨大的经济损失。截止目前,对WSSV还缺乏有效的治疗方法。因此,研究宿主病毒相互作用机制,对寻找阻断病毒感染的靶点具有重要意义。 c-Jun是JNK信号通路下游主要底物分子,参与调控了许多基因的转录。本实验室先前研究表明,凡纳滨对虾JNK被WSSV利用 ...
姚德福
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选取IV基因型HCV及中国和台湾代表株HCV的5’NCR区保守序列合成引物,以RT-PCR从输血后非甲非乙型肝炎病人血浆中扩增一段300bp的cDNA片段作目的基因,钝端插入pUC19的SmaI切点,构建了pUHCV-NC重组质粒。对pUHCV-NC分别或混合应用HCV序列特异的内外引物和载体序列特异的通用引物进行PCR扩增,所用产物分子量均同预期相符;酶切分析查出HCV基因所带有和克隆位点融合所产生的两个外源NcoI切点也存在;证实pUHCV-NC中克隆基因是HCV的5’NCR序列且插入方向为反向 ...
doaj
目的构建人PTEN基因的真核表达载体并在COS-7细胞中高效表达。方法从人喉粘膜组织中分离总RNA,经逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)得到PTEN全基因。克隆入PTEM-T easy载体上,经过PCR、酶切鉴定为阳性的克隆,进行测序分析。然后将所获得的基因定向克隆入PCI-neo载体中构建表达载体。并将其转入COS-7细胞中进行瞬时表达。结果反转录PCR扩增后的产物,在约1.4 kb处可以看见特异性条带,序列分析表明与GenBank中的PTEN基因序列相同。PCI-PTEN真核载体转染COS ...
陈鸥 +5 more
doaj
Cloning and expreesion of three smad genes and two homologous genes of TGF-β in Trichinella spiralis [PDF]
旋毛虫是一种重要寄生虫,寄生于人、猪和鼠等多种动物体内产生致死性疾病。因旋毛虫病易感染,分布范围广泛和难治愈等特性,研究出能有效治疗旋毛虫病的制剂已成为全世界关注的热点。 哺乳动物中TGF-beta信号转导由TGF-β、Activin、inhibin、GDF、BMP和MIS等组成,TGF-beta参与细胞增殖分化、胚胎发育和骨形成的调控。在哺乳动物中TGF-beta信号途径的研究已经比较深入,但TGF-beta信号转导在旋毛虫中的报道还比较少。本文研究的smad-1和smad ...
刘燕
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目的构建人β-防御素2的融合性原核表达载体,为今后基因工程手段表达纯化及生产人β-防御素-2奠定基础。方法体外基因合成人β-防御素2(HBD-2)的基因片段,并克隆入pMD18T中间载体中,经酶切鉴定后再克隆入pET32a原核表达载体中,与载体中所固有的TrX-A形成融合基因。结果构建的融合性原核表达载体经酶切鉴定无突变发生。结论成功地构建了pET-32a-(HBD-2)。
魏洪涛, 董震, 张国利
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【目的】 确定F10基因表达对细胞生长的影响,明确F10基因的功能。 【方法】 构建F10基因的真核表达载体,转染重组pRc-CMV2-F10质粒于肺癌细胞系A549, 筛选并获得稳定表达F10基因的细胞克隆A549-F10。通过MTT实验和流式细胞检测F10对细胞生长的影响;通过免疫组化检测细胞中增殖核抗原(PCNA)和细胞周期素D1(cyclin D1)的表达。【结果】 转基因的G418抗性克隆能够检测到F10表达。MTT和流式结果显示F10有促进细胞增殖的作用 ...
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【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)目的基因的复制缺陷型重组腺病毒,并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA,使用RT—PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18-T Simple载体测序,将测序完全正确的BDNF目的基因克隆入pShuttle2中,然后利用体外连接法将BDNF目的基因克隆入Adeno—X^TM腺病毒骨架中。Lipofectamine^TM ...
王鹏 +6 more
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The role and mechanism of hnRNP A2/B1 in MCF-7 Cells [PDF]
核不均一核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)在很多肿瘤中高表达,但其在 乳腺癌发生发展中的作用还不明确。为了探究其在乳腺癌中的具体作用与机制, 我们通过CRISPR-Cas9基因编辑技术构建敲除hnRNPA2/B1的MCF-7细胞系, 检测其对生物学功能的影响,并研究hnRNPA2/B1对部分基因的可变剪接的作用。 还通过亲和纯化技术结合液质联用质谱(HPLC-MS),构建与分析hnRNPA2/B1 相互作用蛋白网络,利用生物信息学方法对hnRNPB1相互作用蛋白进行KEGG 信号通路及功能分析,
高立斌
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