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Molecular cloning of the cDNA encoding prophenoloxidase from larvae of Pieris rapae and inhibitory effects of compounds on its activity [PDF]
, 2010 酚氧化酶(phenoloxidase，PO，EC.1.14.18.1)在昆虫的变态发育和免疫系统中起着重要的作用，是昆虫生命活动中的重要调节酶，该酶主要参与吞噬和黑化过程，以及伤口愈合和角质硬化。PPO(prophenoloxidase)是无活性的酶原，通过蛋白级联反应激活形成PO。在本研究中，我们首次克隆了来自菜青虫（鳞翅目：粉蝶科）五龄幼虫的PPO1和PPO2的cDNA全长序列。主要实验结果如下： 1.PrPPO1的cDNA全长为3307bp，编码蛋白由682个氨基酸组成，分子量为78.5kDa ...
周晶晶
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1996 选取ＩＶ基因型ＨＣＶ及中国和台湾代表株ＨＣＶ的５’ＮＣＲ区保守序列合成引物，以ＲＴ－ＰＣＲ从输血后非甲非乙型肝炎病人血浆中扩增一段３００ｂｐ的ｃＤＮＡ片段作目的基因，钝端插入ｐＵＣ１９的ＳｍａＩ切点，构建了ｐＵＨＣＶ－ＮＣ重组质粒。对ｐＵＨＣＶ－ＮＣ分别或混合应用ＨＣＶ序列特异的内外引物和载体序列特异的通用引物进行ＰＣＲ扩增，所用产物分子量均同预期相符；酶切分析查出ＨＣＶ基因所带有和克隆位点融合所产生的两个外源ＮｃｏＩ切点也存在；证实ｐＵＨＣＶ－ＮＣ中克隆基因是ＨＣＶ的５’ＮＣＲ序列且插入方向为反向 ...
doaj
Study on the immune response patterns, enzymatic properties and apoptosis inducing functions of three cathepsins from Scylla paramamosain [PDF]
, 2017 拟穴青蟹（Scyllaparamamosain）是我国东南沿海地区重要的海水养殖蟹类，具备高营养价值和经济价值，但在养殖过程中容易遭受各种病害侵袭。近几年来，为了更好地进行病害防治，人们对青蟹自身免疫机制的研究逐渐增多。组织蛋白酶是一类溶酶体蛋白酶，广泛参与机体的各种生理过程，包括细胞内蛋白质降解、酶原和激素原的激活、免疫调节、炎症反应、细胞外基质重塑等，因此探索拟穴青蟹组织蛋白酶的功能特性对于深入了解甲壳动物先天性免疫防御机制具有重要意义。目前对于组织蛋白酶的研究多集中于哺乳动物 ...
朱可欣
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1996 提要用D M D c l 〕N A S 探针从假肥大型肌营养不良( uD e h e n n e m u s e u la r d y s t r o p h犷, D M D ) 基因的Y A C 克隆的c o s m id 亚克隆库中筛选到9 个阳性e o s m id 克隆, S o u t he r n 杂交鉴定e o s m id c O4 61 含D M D 基因的第51 号外显子, 将该c os m 记亚克隆于p V C l ls 中, 获得含D M D 基因第50 和51 ...
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建人β-防御素2的融合性原核表达载体,为今后基因工程手段表达纯化及生产人β-防御素-2奠定基础。方法体外基因合成人β-防御素2（HBD-2）的基因片段,并克隆入pMD18T中间载体中,经酶切鉴定后再克隆入pET32a原核表达载体中,与载体中所固有的TrX-A形成融合基因。结果构建的融合性原核表达载体经酶切鉴定无突变发生。结论成功地构建了pET-32a-（HBD-2）。
魏洪涛, 董震, 张国利
doaj
The crystal structures of Histidine kinase YycG in active and inactive state [PDF]
, 2015 双组分信号转导系统（Twocomponentsignaltransductionsystem，TCS）由组氨酸激酶蛋白和对应的反应调控蛋白组成，是细菌中普遍存在的高效且重要的信号转导通路。其中YycFG双组分系统是目前已知分布最广泛的重要TCS之一，普遍存在于包括金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌和粪肠球菌等常见致病菌在内的低G+C含量的革兰氏阳性菌中。YycFG双组分系统在细菌的细胞壁代谢、细胞膜形成以及一些耐药菌株的抗药性中发挥着至关重要的作用。但是，YycFG双组分系统的信号转导机制和分子结构仍然不清楚 ...
蔡永飞
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 确定F10基因表达对细胞生长的影响,明确F10基因的功能。 【方法】 构建F10基因的真核表达载体,转染重组pRc-CMV2-F10质粒于肺癌细胞系A549, 筛选并获得稳定表达F10基因的细胞克隆A549-F10。通过MTT实验和流式细胞检测F10对细胞生长的影响;通过免疫组化检测细胞中增殖核抗原(PCNA)和细胞周期素D1(cyclin D1)的表达。【结果】 转基因的G418抗性克隆能够检测到F10表达。MTT和流式结果显示F10有促进细胞增殖的作用 ...
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的构建人PTEN基因的真核表达载体并在COS-7细胞中高效表达。方法从人喉粘膜组织中分离总RNA,经逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）得到PTEN全基因。克隆入PTEM-T easy载体上,经过PCR、酶切鉴定为阳性的克隆,进行测序分析。然后将所获得的基因定向克隆入PCI-neo载体中构建表达载体。并将其转入COS-7细胞中进行瞬时表达。结果反转录PCR扩增后的产物,在约1.4 kb处可以看见特异性条带,序列分析表明与GenBank中的PTEN基因序列相同。PCI-PTEN真核载体转染COS ...
陈鸥 +5 more
doaj
Molecular cloning of membrane-bound hydrogenase gene and construction of deletion-mutant of Chromatium vinosum [PDF]
, 2005 氢酶是微生物氢代谢的关键酶，它催化分子氢的氧化或质子的还原。酒色着色菌（Chromatiumvinosum)是一种光合细菌，具有产氢速率高，光合作用不产氧的优点，在生物制氢方面具有良好的应用潜力。C.vinosumDSM185含有可溶性氢酶（SH）和膜结合态氢酶（MBH），在生理条件下分别主要表现出催化产氢和催化吸氢。本研究首次对C.vinosum膜结合态氢酶的基因进行了克隆和测序；构建了膜结合态氢酶缺失突变株，作为光合产氢研究的出发菌株和表达耐氧氢酶突变体的受体菌株。以C.vinosum总DNA为模板，
梁翼
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 【目的】 构建GATA-3基因正义?反义重组质粒,为进一步研究GATA-3在T细胞发育分化中的作用提供基础?【方法】 采用PCR技术扩增GATA-3基因,通过酶切?连接?转化等分子生物学技术,将该全长基因亚克隆至表达载体pCDNA3,构建质粒后转染大肠杆菌,并在大肠杆菌中扩增?同时用脂质体法感染大鼠脑细胞?【结果】 从大鼠脑细胞中成功地克隆出全长1335 bp的GATA-3基因,并经序列分析筛选证实GATA-3基因以正向?反向重组转染入载体,且在大肠杆菌中得到扩增,同时用RT ...
杨培增, 黄祥坤, 纪淑兴
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