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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】构建含乙型肝炎病毒(HBV)编码核心蛋白(HBcAg)的核心(C)基因的真核表达重组体, 以进行核酸免疫及 相关研究。【方法】以含HBV(ayw 亚型)全基因序列的质粒pHBV1 为模板, 用PCR 的方法获得编码HBcAg 的C 基因片段 (nt1889 ～ 2457), 该基因片段两端设计了BamH Ⅰ 和EcoRⅠ 的限制性内切酶位点, 以便通过定向克隆将其插入真核表达质粒 载体pcDNA3 相应的多克隆位点。【结果】经BamH Ⅰ 和EcoRⅠ 酶切后琼脂糖凝胶电泳鉴定 ...
韦 嘉 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1990 将α-心钠素（α-hANF）基因克隆到PUC18载体上,经菌落原位杂交筛选鉴定出有α-hANF基因的克隆株。用BamⅡ和BamH Ⅰ消化并分离纯化得到含5′端部分α-hANF基因及PUC18载体的F1片段。用DNA合成仪合成3′端部分α-hANF基因的F2接头,在基因3′端加入谷氨酸的密码子GAA,作为表达产物用内肽酶Glu-C专一裂解的位置,并去掉基因3′端的终止信号TGA,将原BamH Ⅰ接头改为EcoR Ⅰ接头。最后,将F1和F2片段与α-hANF基因酶促连接后进行转化 ...
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重组pDC316-MCMV／hNIS真核表达质粒的构建及在肿瘤细胞的功能
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】克隆人的钠／碘同向转运体（hNIS）基因可编码序列，并研究其在非甲状腺肿瘤细胞内的功能表达。【方法】利用逆转录和聚合酶链反应（RT-PCR）从毒性弥漫性甲状腺肿（又称Graves病）病人的甲状腺组织中扩增得到NIS的可编码区基因，并克隆到T载体，测序后亚克隆到腺病毒载体穿梭质粒pDC316载体上，获得重组真核表达质粒载体pDC316-MCMV／hNIS。采用脂质体转染的方法，把pDC316-MCMV／hNIS重组质粒（实验组）或pDC316空质粒（对照组）分别导人到胰腺癌细胞株CAPAN-Ⅱ细胞、
周泉波 +5 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1999 目的: 构建携带人神经生长因子( hNGF)基因的真核细胞表达载体, 为应用 NGF 进行老年性痴呆(AD)等疾病基 因治疗打基础。方法: 应用基因重组技术将 hNGF cDNA 克隆到逆转录病毒载体 pLXSN 中 ,用限制性内切酶酶切分析重组质粒 pLNGFSN 中 hNGF 基因的插入方向,用 PCR、斑点杂交和 Southern 杂交对重组质粒 pLNGFSN 作进一步鉴定。结果: hNGF cDNA 已正确地克隆到逆转录病毒载体 pLXSN 中,而构建成重组逆转录病毒载体 pLNGFSN ...
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[Application of the variant allele frequency of myeloid-associated gene mutations in myelodysplastic syndrome]. [PDF]
Zhonghua Xue Ye Xue Za ZhiShang MY, Su L.
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2013 【目的】 分析预测申克孢子丝菌ｃＤＮＡ中编号为Ｌｏｃｕｓ＿１６８＿Ｃｏｎｔｉｇ＿１序列编码的基因及蛋白质结构、功能特征，并进行分子克隆。 【方法】 利用ＮＣＢＩ及Ｅｘｐａｓｙ网站提供的ＢＬＡＳＴｘ、ＳｉｇｎａｌＩＰ、ＩｎｔｅｒＰｒｏ Ｓｃａｎ等生物信息学软件分析其序列，判断其是否为全长编码序列、同源序列名称，并分析其结构、定位及功能等；将其中的全长编码区利用ＰＣＲ方法进行扩增后克隆到ｐＥＴ－３０ａ（＋）载体，测序验证。 【结果】 该序列是亚精胺合成酶（ＳＰＤＳ）的同源基因，全长序列为１０６２ ｂｐ ...
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