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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 【目的】 构建GATA-3基因正义?反义重组质粒,为进一步研究GATA-3在T细胞发育分化中的作用提供基础?【方法】 采用PCR技术扩增GATA-3基因,通过酶切?连接?转化等分子生物学技术,将该全长基因亚克隆至表达载体pCDNA3,构建质粒后转染大肠杆菌,并在大肠杆菌中扩增?同时用脂质体法感染大鼠脑细胞?【结果】 从大鼠脑细胞中成功地克隆出全长1335 bp的GATA-3基因,并经序列分析筛选证实GATA-3基因以正向?反向重组转染入载体,且在大肠杆菌中得到扩增,同时用RT ...
杨培增, 黄祥坤, 纪淑兴
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, 2010 果糖-1,6-二磷酸酶(EC 3.1.3.11)是糖异生中的关键限速酶之一,在糖代谢中起重要作用。哺乳动物存在肝脏型和肌肉型两种果糖-1,6-二磷酸酶同工酶,分别由Fbp1和Fbp2编码。银鲫作为我国重要的经济养殖鱼类,尚无果糖-1,6-二磷酸酶基因的有关资料,其组织分布特征和胚胎发育模式亦不清楚。本研究采用RACE方法从银鲫原肠胚SMART cDNA文库中扩增了果糖-1,6-二磷酸酶基因的全长cDNA,其长度为1170 bp,编码337个氨基酸残基,多重序列比对和系统发育分析表明该基因为肝脏型果糖 ...
桂建芳, 王锐, 肖青
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Cloning, expression, and functional analysis of the CaRIN gene, encoding a MADS-box transcription factor from pepper [PDF]
[Objective] The study aims to explore the expression and function of the RIN gene, encoding a MADS-box, and analyze its impact on the metabolism of carotenoids in pepper. [Methods] Based on the fruit development transcriptome of pepper, the full-length
DUAN Minjie +5 more
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野生动物学报, 2009 根据GenBank上已发表的猪甘露聚糖结合凝集素A基因序列,设计一对特异性引物,通过RT-PCR法成功地从野猪肝脏中克隆到MBL-A基因序列。该克隆基因全长为875 bp,包含MBL-A的完整开放阅读框。同源性分析显示野猪MBL-A基因与家猪核苷酸序列同源性在99%,推导的氨基酸序列同源性为100%;与其他哺乳动物相比核苷酸序列同源性在73%～83%之间,推导的氨基酸序列同源性在60%～81%之间。
孙玉刚 +4 more
doaj
Molecular cloning of the cDNA encoding prophenoloxidase from larvae of Pieris rapae and inhibitory effects of compounds on its activity [PDF]
, 2010 酚氧化酶(phenoloxidase，PO，EC.1.14.18.1)在昆虫的变态发育和免疫系统中起着重要的作用，是昆虫生命活动中的重要调节酶，该酶主要参与吞噬和黑化过程，以及伤口愈合和角质硬化。PPO(prophenoloxidase)是无活性的酶原，通过蛋白级联反应激活形成PO。在本研究中，我们首次克隆了来自菜青虫（鳞翅目：粉蝶科）五龄幼虫的PPO1和PPO2的cDNA全长序列。主要实验结果如下： 1.PrPPO1的cDNA全长为3307bp，编码蛋白由682个氨基酸组成，分子量为78.5kDa ...
周晶晶
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的用基因工程技术表达2′,5′腺苷酸酶（2-5AS）蛋白为抗原制备单克隆抗体,供荧光素标记抗体流式细胞术检测细胞内2-5AS应用。方法将2-5AS基因片段插入到带有His.Tag的pET-30a（+）质粒,并转化到宿主菌E.coli.BL21（DE3）,ITPG诱导表达,Ni柱纯化,获得2-5AS蛋白后制备单克隆抗体。结果插入片段酶切测序证实,插入的片段与目的片段序列相符;Ni柱纯化过程中可见目的蛋白的洗脱峰;经Tricine-SDS-PAGE电泳,Western Blotting鉴定,得到表达蛋白 ...
宋玉国, 谭冲, 黄建文, 毕胜利
doaj
Genetic analysis and gene mapping of panicle branches stay-green trait in rice [PDF]
, 2016 水稻是重要的粮食作物之一，全球一半以上的人口以大米为主食。随着世界人口的增长，人们正面临着越来越严重的粮食危机。如何增加水稻产量一直是作物育种以及植物学研究的重要目标。近年来水稻遗传育种工作者发现了一些成熟期叶片的叶绿素不降解或仅少量降解而使叶片仍保持绿色的持绿型水稻品种，研究发现其叶片持绿性状多数属多基因控制的数量遗传，少数属隐性主效基因控制的质量性状遗传，相关基因大多已被鉴定及克隆。迄今为止，尚未见穗枝梗持绿性状的研究报道。佳辐占系本课题组育成的优质高产早稻品种，已在生产上大面积推广应用 ...
王永杰
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Study on the immune response patterns, enzymatic properties and apoptosis inducing functions of three cathepsins from Scylla paramamosain [PDF]
, 2017 拟穴青蟹（Scyllaparamamosain）是我国东南沿海地区重要的海水养殖蟹类，具备高营养价值和经济价值，但在养殖过程中容易遭受各种病害侵袭。近几年来，为了更好地进行病害防治，人们对青蟹自身免疫机制的研究逐渐增多。组织蛋白酶是一类溶酶体蛋白酶，广泛参与机体的各种生理过程，包括细胞内蛋白质降解、酶原和激素原的激活、免疫调节、炎症反应、细胞外基质重塑等，因此探索拟穴青蟹组织蛋白酶的功能特性对于深入了解甲壳动物先天性免疫防御机制具有重要意义。目前对于组织蛋白酶的研究多集中于哺乳动物 ...
朱可欣
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丙型肝炎病毒基因高变区（E1，E2／NS1）的分子克隆及基因型鉴定
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1995 对广东省一个患者血清中的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因高变区进行分子克隆及基因型鉴定。采用微粒吸附法提取ＨＣＶＲＮＡ，随机引物逆转录后进行聚合酶链反应（ＰＣＲ）。所用引物位于Ｅ１，Ｅ２／ＮＳ１区，扩增产物８０６ｂｐ，产物提纯后定向插入ｐＢＶ２２０质粒载体，重组体转染ＤＨ５α菌株，筛选菌落经增殖后碱变性法提取质粒，再通过ＰＣＲ及酶切法鉴定阳性克隆。我们还用酶切法对此株克隆的基因型作了初步鉴定，证明属于１组Ⅱ型。
doaj
Molecular cloning of membrane-bound hydrogenase gene and construction of deletion-mutant of Chromatium vinosum [PDF]
, 2005 氢酶是微生物氢代谢的关键酶，它催化分子氢的氧化或质子的还原。酒色着色菌（Chromatiumvinosum)是一种光合细菌，具有产氢速率高，光合作用不产氧的优点，在生物制氢方面具有良好的应用潜力。C.vinosumDSM185含有可溶性氢酶（SH）和膜结合态氢酶（MBH），在生理条件下分别主要表现出催化产氢和催化吸氢。本研究首次对C.vinosum膜结合态氢酶的基因进行了克隆和测序；构建了膜结合态氢酶缺失突变株，作为光合产氢研究的出发菌株和表达耐氧氢酶突变体的受体菌株。以C.vinosum总DNA为模板，
梁翼
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