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, 2005 以原癌基因Kras基因12位密码子的4种基因型(野生型为GGT,突变型为AGT、TGT、CGT)质粒DNA为研究模型,采用SYBRGreenⅠ为实时PCR指示剂,进行ARMS实时PCR基因分型特异性的研究.结果表明:在和模板匹配的ARMS引物3′端附近引入故意错配碱基,将ARMS引物浓度稀释10倍,并对传统三步PCR循环进行改良,即根据目的产物和引物二聚体的熔点差异,在传统延伸步骤之后增加一步恒温80℃检测荧光步骤,可消除引物二聚体的影响,使ARMS引物的特异性增强,得到清晰的基因分型结果 ...
李庆阁, 梁基选, 郑薇薇
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HBV-DNA高水平孕妇的HBV 前S和S区基因突变及基因分型
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2012 【目的】 研究HBV-DNA高水平孕妇的HBV前S(前S1和前S2)及S区的基因突变模式和基因分型,为从病毒因素探讨HBV母婴传播免疫阻断失败提供实验基础【方法】 选取血清HBsAg阳性且HBV-DNA≥105 IU/ mL的孕妇41 例,提取血清HBV-DNA,靶向设计HBV各基因型的前S及S区通用引物, 经PCR 扩增测序进行序列分析, 检测和分析前S及S区基因的突变情况,并进行基因分型【结果】 ①在 41 例样本中, 共有29例( 70.73%)样本存在前S1前S2及S区基因突变 ...
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2014 目的观察雌激素受体（ER）α和β基因多态与绝经后女性代谢综合征（MS）的关系。方法 311例无亲缘关系的绝经后MS患者和231例年龄相匹配的健康对照人群,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCRRFLP）技术,检测ERα（XbaⅠ、PvuⅡ）和β基因（RsaⅠ、AluⅠ）多态性,并采用SHEsis在线计算平台进行统计学分析。结果与对照组相比,MS患者体重、BMI、SBP、DBP以及血清FBS、GSP、TG水平显著高于对照组,而HDLC水平显著低于对照组（P0.05）;对照组和MS组RR、Rr ...
孙树凯 +5 more
doaj
Research on Multicolor Melting Curve Analysis-Based Approaches for Gene Mutations Detection [PDF]
, 2017 作为一种新型的均相实时PCR检测技术，多色探针熔解曲线技术具有简便快速、特异性好、灵敏度高、结果准确可靠、检测成本低等优点，因此被用于遗传、肿瘤及微生物等领域的检测。然而，该技术的检测对象主要是点突变（包括错义突变、移码突变、小片段缺失或插入突变等），目前尚无报道将该技术用于大片段缺失突变的检测和高GC含量的长片段PCR扩增子的检测。因此，本论文围绕多色探针熔解曲线技术在不同类型基因变异中的检测进行研究，旨在进一步证明该技术的灵活性及适用性。 第一章为绪论部分 ...
王旭东
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过氧化物酶增生物-激活受体γ2基因多态性与2型糖尿病的相关性
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的探讨PPARγ2基因多态性与2型糖尿病的关系。方法以rs1875796为遗传标记,应用多聚酶链-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术检测250例2型糖尿病患者和337例健康对照人群PPARγ2基因型。结果 Rs1875796基因型频率CC:CT:TT在2型糖尿病和正常对照组的频率分布分别为2.8%:27.2%:70.0%和2.7%:25.5%:71.8%;C等位基因和T等位基因在2型糖尿病组和正常对照组的频率分布分别为16.4%:83.6%和15.4%:84.6%,两组间的等位基因 ...
高鹏, 吴江, 杜丹华, 张颖
doaj
, 2007 目的建立快捷特异的ABO基因分型检测方法。方法根据ABO基因结构特点,设计特异性引物和四色双链探针,采用单管实时PCR方法检测ABO基因,结果与传统免疫学方法相对比。结果该方法可检出常见的3个等位基因,区分常见的6种基因型,全部检测过程可在100min内完成。110例中国人的随机个体定型结果与传统免疫学方法一致。结论实时PCR法进行ABO基因分型,简便快捷,灵敏度高 ...
夏邦勇 +4 more
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Studies on Hospital infection of methicillin-resistant Staphylococcus aureus [PDF]
医院感染的重要病原菌—— 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin resistant staphylococcus aureus，MRSA） 被称之谓超级细菌（superbug）或沉默的杀手（sillent killer），是临床治疗非常棘手的一大难题和研究热点。笔者概述了MRSA医院感染的历史及现状，及其生物学特性、耐药机制、实验室检测与分型。MRSA医院感染的预防和治疗。Resistant Staphylococcus aureus MRSA (methicillin), an ...
Liao, An-qi, Liao, Yuan-quan
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东北汉族人群抵抗素基因rs1862513（G/C）多态性与2型糖尿病相关性研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2017 目的探讨东北汉族抵抗素基因rs1862513（G/C）位点与2型糖尿病发病及临床表型相关性。方法应用连接酶反应分型法检测79例2型糖尿病患者及79例正常对照者rs1862513（G/C）多态性。结果 2型糖尿病组和对照组抵抗素rs1862513（G/C）位点基因型分布分别为GG49.5%、GC44.3%、CC6.2%和GG40.2%、GC47.4%、CC12.4%;等位基因频率分别为G型71.6%、C 28.4%和G型63.9%、C型36.1%,该位点的基因型分布和等位基因频率在两组间分布均无统计学意义（
陈珍珍 +4 more
doaj
Development of real-time PCR genotyping based on allele specific primer and displacing probe methods. [PDF]
, 2007 本论文围绕实时PCR基因分型中的引物基因分型和探针基因分型两个关键技术展开了研究，研究工作主要包括ARMS引物、硫代磷酸化修饰引物以及荧光双链置换探针用于实时PCR基因分型的研究。 第一章，以酒精代谢过程中的关键酶—乙醇脱氢酶2的基因多态性为研究对象，采用新型的荧光染料EvaGreen为实时PCR指示剂，建立了ARMS改良四步法的实时PCR分型体系。通过对传统三步PCR循环进行改良，即根据目的产物和引物二聚体的熔点差异，在传统延伸步骤之后增加一步恒温79°C检测荧光步骤，可消除引物二聚体的影响 ...
顾莹莹
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Study on melting curve analysis for genotyping [PDF]
, 2011 熔解曲线分析法(Meltingcurveanalysis)是一种PCR后产物分析技术，具有操作简单、结果判断直观等特点，已经被广泛用于突变扫描、甲基化检测等研究。熔解曲线分析技术可分为探针熔解曲线(Probemeltingcurve)和荧光染料熔解曲线(Fluorescentdyemeltingcurve)两大类。探针熔解曲线利用探针与不同的靶序列杂交后形成的双链DNA熔点（Meltingtemperature，Tm）的差异来区分不同的靶序列，是实现多重实时检测的重要途径之一 ...
张换敬
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