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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 ［目的 l 构建人肝豆状核变性病ATP7B基因野生型及常见突变型的小鼠肝脏特异性表达载体 ALB-ATP7B, 为制备转基因小鼠及相关基因治疗作准备。【方法】定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及 Hisl069Gln两种ATP7B基因突变体，定向克隆将小鼠白蛋白启动子ALB序列及野生和突变的ATP7B基因亚克 隆至真核表达载体kbpala上， 得到可在小鼠肝脏特异性表达的人ATP7B基因正常及突变型真核表达载体 ALB-ATP7B。【结果】经测序及酶切鉴定证实， 真核表达载体ALB ...
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸（dTTP）70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因（EGFP）和中国旱獭α干扰素基因（cwIFNA5）分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
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, 2017 小麦穗发芽(Pre-harvest sprouting,PHS)严重降低籽粒产量、品质和种用价值。种子休眠与穗发芽抗性关系非常密切,是受多个基因控制和环境影响的复杂性状。本研究通过对灌浆期小麦进行5天的短期高温处理,了解高温胁迫对小麦籽粒休眠以及相关基因表达的影响。结果发现,高温诱导显著地普遍降低种子休眠水平,仅极少数品种表现温度不敏感的强休眠特性。高温条件下,主效休眠和穗发芽抗性基因Vp1-B、PM19-A1和TaPHS1的表达持续下降且极显著低于对照水平,而温度不敏感型休眠品种的PM19 ...
付青平, 陈静, 张紫晋, 王威
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的观察苯乙酸（PA）诱导分化胶质瘤细胞C6过程中,同源盒基因HoxA1,A2,A3和HoxA4基因mRNA水平表达的变化。方法应用逆转录PCR（RT-PCR）及图像分析法,分组检测原代培养的大鼠星形胶质细胞及应用PA前后胶质瘤细胞C6中HoxA,A2,A3和HoxA4基因mRNA水平表达。结果HoxA1和A4基因在正常大鼠脑组织中弱表达,在胶质瘤C6细胞中存在明显表达;HoxA2基因在正常大鼠脑组织中未见表达,在胶质瘤C6细胞中存在明显表达 ...
田宇 +4 more
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, 2005 本文在荧光定量PCR优化的基础上,利用该技术考察了不同浓度的重金属镉和铜对嗜热四膜虫金属硫蛋白基因(MTT1)诱导表达的变化规律。结果表明MTT1基因的表达对镉离子的诱导更灵敏,且在一定阈值浓度(≤35.2μmol/L)范围内,镉离子浓度升高会增加MTT1基因表达量,超过该阈值后表达量迅速下降;镉与铜同时诱导时MTT1基因的表达情况与镉单独诱导的类似,但阈值浓度减小为22μmol/L,表明二者的联合毒性为协同作用。镉离子浓度低于22μmol/L时 ...
俞婷 +4 more
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SYK基因激活对人胃癌SGC7901细胞株VEGF表达的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的利用去甲基化酶5-氮-2’-脱氧胞苷（5-aza-CDR）对脾酪氨酸激酶（Syk）基因激活的作用,观察Syk基因的激活对人胃癌SGC-7901细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,从而研究Syk基因的激活对人胃癌SGC-7901细胞生长和转移的影响。方法检测用5-aza-CDR处理后的人胃癌SGC7901细胞株的生长情况、SYK基因的表达水平及血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达水平,与未接触5-aza-CDR的对照组进行对比。结果经5-aza-CDR处理过的人胃癌SGC ...
于庆功 +5 more
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, 2004 【目的】构建人resistin基因原核表达载体并观察其表达,为开展对resistin的研究打下实验基础。【方法】酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患者腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出re-sistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和原核表达载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体通过T4DNA连接酶进行定向连接,用核酸内切酶EcoRI、KpnI酶切和测序方法鉴定出重组表达质粒 ...
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抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1和PPARγ mRNA表达的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的观察抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1（Transcription Sp1,）和过氧化物酶体增殖体激活受体（Peroxisome Proliferator-Activated Receptorγ,PPARγ）mRNA表达的影响。方法把pc DNA3.1抵抗素基因真核表达载体转染入HepG2肝细胞,用RT-PCR方法进行Sp1和PPARγ)mRNA表达的检测。结果抵抗素基因转染HepG2细胞后,Sp1的表达明显增强,P0.05。结论抵抗素基因转染HepG2细胞后,可明显增强Sp1的表达 ...
金正贤, 赵虹, 杜珍武, 张桂珍
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斑马鱼nr1d4a和nr1d4b基因的表达及其对不同环境刺激的响应
, 2014 研究获得了斑马鱼 nr1d4a 和 nr1d4b 基因的 cDNA,进行了序列比对和系统进化分析,并采用实时定量RT-PCR （qPCR）方法研究了其表达模式及对不同环境刺激的转录反应。研究发现,斑马鱼nr1d4a和nr1d4b是由基因复制产生的旁系同源基因,具有高度保守的DNA结合结构域和配体结合结构域。斑马鱼nr1d4a和nr1d4b的表达模式具有明显的差别。nr1d4a在胚胎发育早期的表达量很低,72 hpf时开始显著升高；而nr1d4b具有较高水平的母源性表达,6 hpf时的表达量明显降低 ...
崔宗斌 +4 more
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四川大学学报. 自然科学版, 2006 提取大肠杆菌(SUGL)基因组DNA,通过PCR方法从基因组扩增得到植酸酶基因ap-pA,测序结果表明该基因的ORF读框包含1440个核苷酸.将该基因重组于大肠杆菌表达载体pET-32a(+)中,导入大肠杆菌BL21(DE3),构建工程菌BL21(DE3)-pET32a-appA.对表达条件进行了优化,在30℃下,以0.1mmol/L IPTG诱导表达植酸酶,表达量达到10%以上.在37℃,用钒钼酸铵法测定了表达的植酸酶活性为40740.7U/g,同时观察不同加热温度对植酸酶活性的影响程度 ...
徐辉 +6 more
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