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四川大学学报. 自然科学版, 2006 提取大肠杆菌(SUGL)基因组DNA,通过PCR方法从基因组扩增得到植酸酶基因ap-pA,测序结果表明该基因的ORF读框包含1440个核苷酸.将该基因重组于大肠杆菌表达载体pET-32a(+)中,导入大肠杆菌BL21(DE3),构建工程菌BL21(DE3)-pET32a-appA.对表达条件进行了优化,在30℃下,以0.1mmol/L IPTG诱导表达植酸酶,表达量达到10%以上.在37℃,用钒钼酸铵法测定了表达的植酸酶活性为40740.7U/g,同时观察不同加热温度对植酸酶活性的影响程度 ...
徐辉 +6 more
doaj
, 2011 鉴定得到嗜热四膜虫13个含有完整保守结构域的hsp70基因,对其中5个高度相似且无内含子的hsp70基因进行表达分析。在37、39和41℃热激条件下,实时荧光定量PCR结果表明,hsp70-2基因对热激响应最敏感。在四膜虫生长、饥饿和接合生殖这3种生理或发育状态下,Microarray结果显示,hsp70-4基因恒定且高表达;在热激条件下,hsp70-4基因的表达水平随着温度的升高而略微增加,证实hsp70-4基因为热休克相关蛋白hsc70基因;克隆的hsp70-4基因全长2208bp ...
冯立芳, 袁冬霞, 缪炜, 畅悦
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产甲烷菌Methanosarcina barkeri 在不同底物下的基因表达差异
, 2016 产甲烷菌产生的甲烷约占全球甲烷排放量的74%，其对生物燃气生产有着重要的意义。通过对产甲烷生理生化的大量研究，虽已初步构建出生物产甲烷代谢过程，但是对于产甲烷菌产甲烷过程中，基因的整体表达情况尚未有研究。本文利用最新的RNA-seq技术，以Methanosarcina barkeri MS作为研究材料，研究产甲烷菌利用不同类型的底物时转录组的差异。通过研究，主要获得以下结果：第一，通过M.
方晓瑜
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嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中TPH和GTPCH基因表达的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的研究嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中色氨酸羟化酶（tryptophan hydroxylase,TPH）、GTP环水化酶1（GTP cyclohydrolase1,GTPCH）基因表达的影响。方法剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,50只正常雄性Wistar大鼠随机分为对照组（C）、海洛因组（H）、海洛因补偿AMP+GMP组（HAG）、海洛因补偿AMP组（HA）、海洛因补偿GMP组（HG）,每组10只。Real-timePCR法测定各组大鼠脑组织中TPH和GTPCH1基因的表达 ...
李鸿梅 +4 more
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, 2004 一种细胞差异表达与基因测试复合微流芯片，其特征在于该芯片由细胞培养单元和分离单元构成，细胞培养单元为多孔点阵，每个孔通过微流通道与分离单元的流入端相连。可以用于不同类细胞的差异表达和/或基因比较分析；同一种细胞的差异培养分析；正常细胞、肿瘤细胞、可疑细胞的比较分析；基于细胞差异表达的药物筛选常规的细胞培养、表达、基因变异分析。本发明将细胞培养和细胞差异表达及基因分析集成在同一块芯片，减少了操作的成本，减少了传统的细胞培养及细胞差异表达及基因分析过程中的污染，提高了分析的速度 ...
周小棉, 吴大朋, 罗勇, 戴忠鹏
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, 2016 有性生殖的关键过程是通过减数分裂产生生殖细胞,而减数分裂的一个重要环节是进行基于DNA双链断裂的同源染色体重组。在同源染色体重组过程中,SPO11蛋白催化产生DNA双链断裂,从而起始同源染色体的重组。因此,研究SPO11基因缺失在减数分裂过程中所引起的基因表达变化有助于在转录组水平上了解该基因的作用。本研究通过对嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)野生型和SP011敲除细胞株在接合生殖时期2 h、3 h、4 h、5 h四个时间点的转录组进行高通量测序 ...
闫冠雄 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的用生物信息学分析新基因TSC21并进行蛋白表达及纯化。方法将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交并筛选出差异表达的基因。用生物学信息软件对该基因进行生物学信息分析。运用RT-PCR分析该基因小鼠不同组织及人不同组织中的表达。对人的TSC21基因进行cDNA克隆、蛋白表达及纯化。结果通过不同日龄小鼠睾丸的芯片信号比较筛选出一个差异表达基因（GenBank登录号:NM-028825）,全长有810bp,含有543bp的完整ORF,编码一个有180个氨基酸 ...
余振东 +6 more
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花药特异表达基因TaRAFTIN1a启动子的克隆及表达载体构建
, 2015 组织特异性启动子是植物基因工程改良的重要工具。RAFTIN是禾本科植物花药绒毡层中特异积累与花药发育相关的蛋白,其调控序列可能提供一个很好来源的花药特异性表达启动子。为了解小麦TaRAFTIN1a基因启动子的花药表达特异性,本研究分离了TaRAFTIN1a基因的启动子,生物信息学分析表明,该启动子含有3种花药特异表达元件(总计10个),1个ABRE脱落酸响应元件,TGACG-motif与CGTCA-motif茉莉酸甲酯响应元件各1个,8个ARR1AT细胞分裂素响应元件 ...
陈静, 余懋群, 徐登安, 赵纯钦
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）表皮生长因子受体（EGFR）免疫组化表达与EGFR基因突变的关系及其临床意义。方法对130例手术切除的非小细胞肺癌组织应用免疫组化方法检测EGFR表达,同时应用基因测序方法检测EGFR基因突变,研究EGFR表达与EGFR基因突变的关系。结果130例NSCLC中有38例EGFR基因突变,突变率为29.2%。EGFR阳性率为67.7%。EGFR表达与基因突变无关（P>0.05）,结论EGFR免疫组化表达与EGFR基因突变无关,不能作为筛选EGFR酪氨酸激酶抑制剂（TKI ...
尹光浩 +4 more
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, 2005 胚胎发育是基因组中各个基因在时间和空间上选择性表达的结果。为了鉴定参与鱼类早期胚胎发育和胚层分化的调控因了,分别构建了银鲫(Carassiusauratusgibelio)原肠胚和成熟卵子的SMARTcDNA文库,并采用差异筛选的方法,从银鲫原肠胚SMARTcDNA文库中筛选不同于成熟卵子的差异表达基因。通过菌斑和PCR产物的两轮斑点杂交,从大约1500个克隆中筛选出131个阳性克隆,从中选择58个克隆测序并将测得的序列进行了数据库比对分析 ...
刘静霞 ,石耀华 ,桂建芳
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