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花药特异表达基因TaRAFTIN1a启动子的克隆及表达载体构建
, 2015 组织特异性启动子是植物基因工程改良的重要工具。RAFTIN是禾本科植物花药绒毡层中特异积累与花药发育相关的蛋白,其调控序列可能提供一个很好来源的花药特异性表达启动子。为了解小麦TaRAFTIN1a基因启动子的花药表达特异性,本研究分离了TaRAFTIN1a基因的启动子,生物信息学分析表明,该启动子含有3种花药特异表达元件(总计10个),1个ABRE脱落酸响应元件,TGACG-motif与CGTCA-motif茉莉酸甲酯响应元件各1个,8个ARR1AT细胞分裂素响应元件 ...
陈静, 余懋群, 徐登安, 赵纯钦
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的构建HBsAg真核表达载体,转染CHO细胞并检测其表达。方法通过PCR法扩增出乙肝表面抗原的S基因和dhfr基因,分别克隆到T载体上,然后分别将S基因和dhfr基因克隆到pCI载体上,将pCI载体的CMV启动子替换为hEF-1α启动子。对新构建的pEF1-αS-dhfr真核表达载体进行酶切和测序鉴定。用脂质体法转染CHO（dhfr-）细胞,并用ELISA法检测HBsAg表达。结果hEF-1α启动子、S基因和dhfr基因经测序与Genbank报道一致。真核表达载体pEF1-αS ...
张艳, 时成波, 郭丽, 范洪学
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、高迁移率族蛋白A1(HMGA1)基因在喉鳞状细胞癌(LSCC)中表达情况,观察喉癌Hep2细胞中应用PI3K抑制后HMGA1表达变化,分析LSCC中HMGA1表达在多个临床病理参数组别中的影响。方法采用免疫组化SP法检测47例LSCC组织和21例癌旁正常组织中PI3K和HMGA1基因蛋白水平表达情况,逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)检测PI3K抑制剂(wortmannin)预处理与未处理组的人喉癌Hep2细胞中HMGA1基因mRNA水平表达量 ...
张云龙 +5 more
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, 2006 本文运用抑制性差减杂交技术，构建了灭活大菱鲆弹状病毒诱导的牙鲆囊胚培养细胞和正常对照细胞间差异表达基因的差减cDNA文库。通过构建SMART-cDNA文库并结合RACE技术，从该细胞模型系统中克隆、鉴定了10个Hsp家族基因一个鱼类蛋白质精氨酸甲基转移酶基因的全长cDNA序列和PoCctz基因的部分cDNA序列。 进一步利用Real-time PCR对11个热休克蛋白家族基因在热休克和灭活病毒诱导下的表达时序的研究表明：在灭活病毒诱导下，牙鲆Hsp基因表达特征与在热休克状态下的表达特征相似 ...
董彩文
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的将全长外源多药耐药基因转入间充质干细胞使其外源基因得以表达。方法从胎盘组织中分离培养间充质干细胞,构建携带全长外源多药耐药基因的逆转录病毒,将此逆转录病毒转染间充质干细胞,绿色荧光显微镜检测外源基因的表达,western blot检测MDR1基因表达产物。结果绿色荧光显微镜可观测到转染后间充质干细胞有绿色荧光蛋白的表达,western blot检测到全长多药耐药基因编码的p-糖蛋白的表达。结论mdr1逆转录病毒载体可有效转染人胎盘源MSC,转染的外源基因可充分表达。
王博蔚 +3 more
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, 2004 通过构建依赖NADPH的乙酰乙酰CoA还原酶基因(phbB)的衣藻表达载体, 用石英砂VOTEX转化技术, 将phbB基因导入细胞壁缺陷的莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii cc-849)中, 用含有10 mg/mL的Zeomycin的平板培养基进行筛选和实验室保持培养, 得到了表达phbB基因的转基因藻株. PCR和Southern blot结果显示phbB基因已整合到莱茵衣藻基因组中.
王潮岗,胡章立,胡炜,雷安平
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应用RNAi技术沉默survivin基因对肝癌细胞系BEL-7404生长的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的为研究生存素survivin基因的功能及肝细胞癌（HCC）的基因治疗策略。构建针对survivin基因的siR-NA的表达载体,转染肝癌细胞系BEL-7404后评价其对survivin基因表达的抑制作用。方法依据survivin基因设计siRNA片断,构建pGenesil-1/survivin表达载体,脂质体LipofectamineTM 2000转染BEL-7404细胞。实时定量聚合酶链反应从基因转录水平检测survivin基因的表达率,应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞系BEL ...
廖艳 +5 more
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新发现的Livin基因在结直肠癌组织中mRNA表达及其临床意义
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的研究Livin基因在结直肠癌组织表达及其意义。方法采用逆转录聚合酶链式扩增反应对30例结直肠癌组织3、0例癌旁正常组织及10例正常成人大肠组织中Livin mRNA的表达进行检测。结果10例正常成人大肠组织中Livin基因均无表达。结直肠癌及癌旁正常组织Livin基因表达阳性率均为100%,但癌旁正常组织Livin基因表达量较癌组织表达量明显下降,（P0.05）。结论Livin基因表达升高与结直肠癌密切相关,可能参与结直肠癌的发生。
李日恒 +6 more
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, 2005 胚胎发育是基因组中各个基因在时间和空间上选择性表达的结果。为了鉴定参与鱼类早期胚胎发育和胚层分化的调控因了,分别构建了银鲫(Carassiusauratusgibelio)原肠胚和成熟卵子的SMARTcDNA文库,并采用差异筛选的方法,从银鲫原肠胚SMARTcDNA文库中筛选不同于成熟卵子的差异表达基因。通过菌斑和PCR产物的两轮斑点杂交,从大约1500个克隆中筛选出131个阳性克隆,从中选择58个克隆测序并将测得的序列进行了数据库比对分析 ...
刘静霞 ,石耀华 ,桂建芳
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的研究RhoC基因沉默对肝癌细胞生长和转移潜力的影响。方法基因重组法构建小干扰RNA表达载体,沉默肝癌细胞RhoC基因表达;平板克隆实验检测细胞生长潜力,半定量RT-PCR法检测细胞周期蛋白和MMPs表达水平。结果RNAi组克隆形成百分数显著低于对照组（20.33±5.42%和70.58±10.10 ...
谢淑丽 +5 more
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