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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的观察胰腺癌细胞中Runx3基因表达的情况,探讨其出现表达异常的机制。方法 （1）RT-PCR检测胰腺癌Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞及正常胰腺组织中Runx3mRNA表达情况（2）Western blotting检测胰腺癌Panc-1、BxPC-3、AsPC-1细胞中Runx3蛋白表达情况;（3）甲基化特异性PCR（MSP）检测胰腺癌Panc-1、BxPC-3、As-PC-1细胞及正常胰腺组织中Runx3基因启动子区CpG岛的甲基化水平。结果 （1）Panc-1、BxPC-3、AsPC-
邱志东 +3 more
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, 2013 作为空间辐射的一种主要成分,紫外辐射可广泛引起陆地植物与水生生物细胞及其组份的破坏.荧光定量PCR技术广泛应用于各类胁迫环境下,研究目的基因的转录水平.在荧光定量PCR中选用合适的内参基因,能够更加准确地校正和标准化目的基因转录水平.本实验研究了辐射条件下水生生物莱茵衣藻6个传统内参基因18 S rRNA,GAPDH,β-actin,β-tubulin,EF1-α和UBC基因表达的稳定性.经GeNorm软件研究分析,在辐射条件下,莱茵衣藻18S rRNA基因表达最不稳定,而选用β ...
李双双 +4 more
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, 2004 通过构建依赖NADPH的乙酰乙酰CoA还原酶基因(phbB)的衣藻表达载体, 用石英砂VOTEX转化技术, 将phbB基因导入细胞壁缺陷的莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii cc-849)中, 用含有10 mg/mL的Zeomycin的平板培养基进行筛选和实验室保持培养, 得到了表达phbB基因的转基因藻株. PCR和Southern blot结果显示phbB基因已整合到莱茵衣藻基因组中.
王潮岗,胡章立,胡炜,雷安平
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甘蓝型油菜G蛋白β亚基过量表达载体和RNA干扰载体的构建及遗传转化
四川大学学报. 自然科学版, 2013 构建了含甘蓝型油菜G蛋白β亚基BnGB1基因的过量表达载体pFGC5941-BnGB1和RNA干扰(RNAi)载体pFGC5941-Ri-BnGB1,将构建的两个载体分别经根癌农杆菌介导,转化甘蓝型油菜"R197"下胚轴外植体,经过外植体的预培养、共培养以及选择培养后,获得再生植株24株.经PCR鉴定,其中有1株为BnGB1基因过量表达转基因植株,2株为BnGB1基因RNA干扰转基因植株.RT-PCR结果显示,相对于野生型"R197"油菜,过表达转基因植株中的BnGB1基因的表达量提高 ...
张艺琼, 刘洋, 王茂林
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 ［目的 l 构建人肝豆状核变性病ATP7B基因野生型及常见突变型的小鼠肝脏特异性表达载体 ALB-ATP7B, 为制备转基因小鼠及相关基因治疗作准备。【方法】定点突变法获取人群中常见的Arg778Leu及 Hisl069Gln两种ATP7B基因突变体，定向克隆将小鼠白蛋白启动子ALB序列及野生和突变的ATP7B基因亚克 隆至真核表达载体kbpala上， 得到可在小鼠肝脏特异性表达的人ATP7B基因正常及突变型真核表达载体 ALB-ATP7B。【结果】经测序及酶切鉴定证实， 真核表达载体ALB ...
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的本研究旨在探讨E1A基因对乳腺癌细胞凋亡的影响,为乳腺癌E1A基因治疗的可行性提供理论和实验依据。方法①构建E1A基因真核表达质粒pEGFP-E1A:通过酶切反应获得E1A基因,琼脂糖凝胶回收后,连接入pEGFP-C1载体EcoRⅠ和BamHⅠ位点中。②E1A基因转染乳腺癌细胞系:脂质体介导将E1A基因转入乳腺癌细胞系SK-BR-3细胞株,经筛选获得稳定表达E1A基因的转染试验组细胞。③RT-PCR检测E1A基因的mRNA表达、west-ern-blot检测E1A蛋白表达。流式细胞仪观察细胞凋亡率 ...
杨新宇 +3 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2005 【目的】探讨MDM2 基因在不同应激状态下对T 细胞性白血病细胞株Jurkat 增殖、凋亡和基因表 达的影响。【方法】采用RNA 干扰下调白血病细胞株Jurkat MDM2 基因表达后, 用Western blot、流式细胞术等 方法检测Jurkat 细胞在不同应激状态下的变化。【结果】无应激状态下, MDM2 基因表达下降后, Jurkat 细胞增 殖减慢, 细胞周期表现一定程度的G1-S 阻滞; E2F1 表达明显降低超过78%, p65 表达下调超过58%; 细胞损 伤后 ...
朱有凯 +5 more
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, 2006 本文运用抑制性差减杂交技术，构建了灭活大菱鲆弹状病毒诱导的牙鲆囊胚培养细胞和正常对照细胞间差异表达基因的差减cDNA文库。通过构建SMART-cDNA文库并结合RACE技术，从该细胞模型系统中克隆、鉴定了10个Hsp家族基因一个鱼类蛋白质精氨酸甲基转移酶基因的全长cDNA序列和PoCctz基因的部分cDNA序列。 进一步利用Real-time PCR对11个热休克蛋白家族基因在热休克和灭活病毒诱导下的表达时序的研究表明：在灭活病毒诱导下，牙鲆Hsp基因表达特征与在热休克状态下的表达特征相似 ...
董彩文
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的研究急性白血病患儿WT1和bcl-2基因表达情况及其相关性,探讨两者与儿童急性白血病发病机制和预后的关系。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定56例急性白血病患儿及12例对照患儿的WT1基因表达,同时采用免疫荧光流式细胞术观察40例急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿抗凋亡基因bcl-2的表达。结果56例急性白血病患儿中38例WT1基因表达阳性,较对照组明显为高（P0.05）;WT1表达阳性患儿的完全缓解率（CR）低于表达阴性患儿 ...
李焱, 陈浩
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, 2007 hir/hira基因最先作为组蛋白基因表达的一种负调节因子从酵母中被鉴定出来。现已证实,HIRA包含一组保守的蛋白家族,广泛存在于低等真核生物、无脊椎动物和脊椎动物等多种生物体当中,为生命发育所必需。关于hira基因在动物发育过程中的具体作用研究还不是很多,为了进一步探讨hira基因在鱼类发育过程中的作用,作者根据已知hira基因保守序列设计一对简并引物,分别以彩鲫基因组DNA和卵巢cDNA为模板克隆了彩鲫hira基因(Cahira)片段,该片段基因组序列为2181bp,基因组片段含有6个内含子 ...
王玉凤, 桂建芳, 杜新征
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