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, 2007 用RACE-PCR方法从原肠期SMART文库中扩增到银鲫pou2基因的全长cDNA,其全长为2421bp,开放阅读框为1416bp,编码471个氨基酸,与斑马鱼pou2基因的氨基酸序列一致性高达91.0%。我们用RT-PCR和整体原位杂交的方法研究了银鲫pou2基因在胚胎发育过程中的时空表达图式。RT-PCR结果显示,银鲫pou2基因有母源转录本,其合子基因在高囊胚期强烈表达,在50%下包期和90%下包期也有高量的转录本,但在100%下包期表达量急剧降低,至体节期时已经完全检测不到其转录本 ...
桂建芳 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的筛选与弱精子症发生相关的基因。方法采集正常男性和弱精患者精液精子,非连续梯度离心法分离纯化精子,收集95%percoll以下和57%与76%Percoll层之间的精子,以排除生精细胞和白细胞的污染。将纯化后精子的cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片杂交。筛选出差异表达的基因,利用生物信息学方法对该基因进行分析。用RT-PCR验证该基因在正常男性和弱精患者精液精子中的差异表达,并用RT-PCR方法分析该基因在人不同组织（心、肝、脾、肺、肾、胃、脑、睾丸）中的表达。结果分析芯片杂交结果 ...
李如凯, 郭龙华
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, 2007 从蛙虹彩病毒(Rana gryliovirus,RGV)基因组中克隆了含凋亡相关结构域的新基因-cop(Caspaserecruit ment domain only protein,COP)基因的全部编码区,成功构建了重组表达载体,进行了原核表达,并在鲤鱼上皮瘤细胞(Epithelioma papulosumcyprini,EPC)中进行了亚细胞定位.序列分析表明,RGVcop基因全长288 bp,编码一个长为95 aa,分子量为10.4×103的推定蛋白.二级结构预测表明其含有5个 ...
柯飞, 张奇亚, 赵哲
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的用生物信息学分析新基因TSC21并进行蛋白表达及纯化。方法将不同发育阶段的小鼠睾丸组织cDNA探针与Affymetrix全基因组芯片进行杂交并筛选出差异表达的基因。用生物学信息软件对该基因进行生物学信息分析。运用RT-PCR分析该基因小鼠不同组织及人不同组织中的表达。对人的TSC21基因进行cDNA克隆、蛋白表达及纯化。结果通过不同日龄小鼠睾丸的芯片信号比较筛选出一个差异表达基因（GenBank登录号:NM-028825）,全长有810bp,含有543bp的完整ORF,编码一个有180个氨基酸 ...
余振东 +6 more
doaj
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2017 【目的】通过生物信息学的方法发现特发性肺纤维化（IPF）的致病基因并为进一步研究提供靶点。【方法】从 GEO数据库中下载基因芯片数据集GSE53845、GSE24206、GSE10667，并使用GEO2R分析工具筛选出正常组织与IPF的差异 表达基因。在DAVID数据库中对差异表达基因进行GO分析和KEGG通路富集分析，以便找到IPF发病过程中差异表达基 因主要参与的生物功能及其集中的信号通路。为了研究差异表达基因与蛋白之间的作用关系，使用 STRING 和 CYTO ...
黄鑫炎, 郭禹标
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人类Foxm1b基因的原核表达、抗体制备及其对肝癌细胞中Foxm1b蛋白的识别
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】构建人类Foxm1b基因的原核表达载体，表达并纯化蛋白，制备多克隆抗体，并用此抗体检测肝癌细胞中Foxm1b基因的表达，为进一步研究Foxm1b基因的功能奠定基础。【方法】从GenBank中下载人类Foxm1b基因全长cDNA序列并用Pegene软件分析其可能的抗原表位，设计引物．应用RT—PCR获得含抗原表位的Foxm1b基因片段，重组人原核表达载体pET-28a，在大肠杆菌BL-21（DE31中诱导表达，应用亲和层析法获得纯度较高的原核表达蛋白并免疫大鼠制备多克隆抗体 ...
唐保东 +4 more
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, 1991 <正> 近五年来,通过显微注射技术,已将各种克隆基因片段导入了不同种的鱼类受精卵中,目的是探讨培育能稳定遗传外源基因的鱼类新品系的可行性,为鱼类定向育种开辟新途径。已发表的研究报告证明,外源基因导入鱼类受精卵后均可与受体基因组整合,部分实验显示外源基因可以表达,且其表达产物具有生物活性。目前有关检测外源基因表达的实验大多采用放射免疫方法或观察其整体生物学效应 ...
谢岳峰, 朱作言, 邹钧, 刘东
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, 2007 脊椎动物的Prox 1基因;与果蝇的转录因子prospero同源。该基因在晶体和眼睛中的表达模式表明;Prox1基因可能对眼睛的发育和功能的形成有重要作用。纯合的Prox1基因缺失的小鼠视网膜中的水平细胞发育不全;而且晶体纤维细胞不能正常延伸。为了探讨Prox 1基因在金鱼晶体发生过程中的表达模式;我们从金鱼眼睛SMART库中克隆了Prox1 cDNA ...
马冬梅, 桂建芳, 朱华平
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, 1988 鲤鱼（♀）* 鲫鱼、草鱼（♀）* 团头鲂和草鱼（♀）* 鲤鱼是三个有代表性的远缘杂交组合，它们的发育成功性依次降低，鲤鲫杂种能正常发育至成体，且雌性可育；草团杂交能得到成体杂种，但成活率不高，且完全不育；而草鲤杂种在孵出期前后全部死亡，是一个致死杂种。本人观察三个杂种发育过程的形态学变化，并对草团杂种的胚胎和成体染色体进行了比较研究，发现早期胚胎（原肠胚）的大多数细胞为二倍体（其中也存在三倍体），而成活的草团杂种都是三倍体。在自然条件下，形成三倍体的机率很小。杂种发育过程的同工酶分析发现：草团杂种中 ...
傅洪拓
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建HSV-TK单基因和TK/hIL12融合基因的真核表达载体。方法 PCR扩增质粒pGT60-hIL12中HSV-TK与hIL12治疗基因片段,同时引入pcDNA3.1（+）多克隆酶切位点,构建HSV-TK单基因及其与hIL12融合基因的真核表达载体。结果 DNA测序分析、限制性双酶切鉴定证实构建的真核表达载体中治疗基因的序列、大小和方向正确。结论成功构建了pcDNA3.1-TK和pcDNA3.1-TK/hIL12真核表达载体,为进一步探索HSV-TK与hIL12基因的协同抗瘤作用提供实验基础。
杜晓媛 +5 more
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