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HBsAg真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2007
目的构建HBsAg真核表达载体,转染CHO细胞并检测其表达。方法通过PCR法扩增出乙肝表面抗原的S基因和dhfr基因,分别克隆到T载体上,然后分别将S基因和dhfr基因克隆到pCI载体上,将pCI载体的CMV启动子替换为hEF-1α启动子。对新构建的pEF1-αS-dhfr真核表达载体进行酶切和测序鉴定。用脂质体法转染CHO(dhfr-)细胞,并用ELISA法检测HBsAg表达。结果hEF-1α启动子、S基因和dhfr基因经测序与Genbank报道一致。真核表达载体pEF1-αS ...
张艳, 时成波, 郭丽, 范洪学
doaj  

非洲爪蟾Type II 和Type III 干扰素基因的克隆和表达分析

open access: yes, 2009
干扰素(interferon, IFN)作为重要的抗病毒免疫因子,自1957年首次报道以来,在哺乳类免疫反应中的作用得到阐明。哺乳类中的IFN主要分为三种类型:type I IFN(IFN-α/β)、type II IFN(IFN-γ)和type III IFN(IFN-λ)。近年来,低等脊椎动物如鱼类中的IFN的相关报道逐渐增多。两栖类作为水生脊椎动物向陆生脊椎动物、变温动物向恒温动物进化的过渡类群,在进化生物学上具有十分重要的意义。然而关于两栖类的IFN及其相关基因还知之甚少。因此 ...
齐志涛
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急性白血病MAGE-A3基因表达的临床意义

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009
【目的】 探讨MAGE-A3基因在急性白血病(AL)的表达及临床意义65377; 【方法】 初发AL 93例, 其中急性淋巴细胞白血病(ALL)27例65380;急性髓细胞白血病(AML)66例,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MAGE-A3基因的表达,观察该基因表达与初治患者治疗效果关系65377;【结果】 93例AL中MAGE-A3基因阳性表达45例,总阳性率48.4%,其中在ALL65380;AML的阳性率分别为51.9%和47.0%,两组比较无统计学差异65377 ...
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对小鼠子宫内膜及胚胎LIF基因表达的研究

open access: yes四川大学学报. 自然科学版, 2000
利用 RT- PCR方法 ,对妊娠的小鼠和非妊娠小鼠子宫内膜、妊娠的小鼠胚胎的 LIF基因表达进行了研究 .孕鼠子宫内膜全部存在 LIF基因的表达 ,3例非妊娠小鼠子宫内膜 L IF基因的表达阳性 ,2只小鼠胚胎中有 L ...
翁亚光   +4 more
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β-连环蛋白在卵巢癌组织中的表达

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2007
目的探讨β-连环蛋白(β-cat)在卵巢癌组织中的表达及意义。方法①应用4097点基因芯片对5例卵巢癌及5例正常卵巢组织进行基因表达谱分析,筛查差异表达基因。②对60例卵巢癌组织、24例卵巢瘤组织及24例正常卵巢组织石蜡标本进行免疫组织化学方法染色,检测β-cat的表达情况,分析β-cat的表达与临床分期及组织分级的相关性。结果①基因芯片筛查出卵巢癌差异表达基因58个,其中基因表达增高(上调趋势)30个,基因表达降低(下调趋势)28个,β-cat为表达增高基因。②β ...
张晓霞   +4 more
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鲤鲫人工多倍体谱系中同工酶和蛋白的基因表达

open access: yes, 2002
通过对红鲤、红鲫、镜鲤、鲤鲫杂种二倍体一代 ,二代 ,鲤鲫杂种三倍体 ,鲤鲫复合三倍体 ,鲤鲫杂种四倍体一代 ,二代的同工酶及蛋白电泳谱型和扫描数据分析表明 :在鲤鲫人工多倍体谱系中 ,亲代的等位基因在杂交子代中共有四种表达模式 :( 1 )两亲本基因在子代中共同表达 ,即共显表达 ;( 2 )父本的基因表达受到部分或完全的抑制 ,即母本的基因优先得到表达 ;( 3)母本的基因表达受到抑制 ,父本的基因得到表达 ;( 4 )双亲本的基因表达均受到一定程度的抑制或都不表达。其中第一种表达模式是主要的模式。
王小虎,叶玉珍,吴清江
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应用RNAi技术沉默survivin基因对肝癌细胞系BEL-7404生长的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2011
目的为研究生存素survivin基因的功能及肝细胞癌(HCC)的基因治疗策略。构建针对survivin基因的siR-NA的表达载体,转染肝癌细胞系BEL-7404后评价其对survivin基因表达的抑制作用。方法依据survivin基因设计siRNA片断,构建pGenesil-1/survivin表达载体,脂质体LipofectamineTM 2000转染BEL-7404细胞。实时定量聚合酶链反应从基因转录水平检测survivin基因的表达率,应用免疫组织化学的方法检测肝癌细胞系BEL ...
廖艳   +5 more
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棉铃虫病毒HaSNPVfp25k基因的克隆表达及抗体制备

open access: yes, 2004
根据棉铃虫单核衣壳核多角体病毒(Helicoverpaarmigerasinglenucleocapsidnucleopolyhedrovirus,HaSNPV)fp25k基因的序列,设计引物,引入适当的酶切位点,利用PCR扩增出基因片段。将该基因片段克隆至原核表达载体pProEXHTb,经IPTG诱导,在大肠杆菌DH5α中获得了高效表达,表达产物的大小为32kDa。纯化蛋白产物免疫家兔制备抗血清。该抗血清可与原核表达的GST ...
吴东,邓菲,胡志红,袁丽,孙修炼
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RNAi沉默RhoC基因对肝癌细胞生长和转移潜力的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的研究RhoC基因沉默对肝癌细胞生长和转移潜力的影响。方法基因重组法构建小干扰RNA表达载体,沉默肝癌细胞RhoC基因表达;平板克隆实验检测细胞生长潜力,半定量RT-PCR法检测细胞周期蛋白和MMPs表达水平。结果RNAi组克隆形成百分数显著低于对照组(20.33±5.42%和70.58±10.10 ...
谢淑丽   +5 more
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抑制hIL-1β基因表达的植物成分的研究

open access: yes, 2003
目的 寻求能够抑制hIL - 1β基因表达的植物活性成分 ,为新药开发提供先导化合物。 方法 采用一步法RT -PCR对hIL - 1β基因的表达进行定量 ,追踪植物的活性成分。 结果 找到了两个活性成分 ,并已鉴定出为两个不饱和脂肪酸。结论 ...
彭树林   +1 more
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