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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2023 目的 通过基因沉默技术构建质粒成功转染原代星形胶质细胞(Ast)抑制IL-17表达，探讨IL-17的功能。方法 在制备原代Ast基础上，应用IL-17基因沉默质粒pGenesil-1A和B,用Lipofectamine 2000转染Ast,通过荧光分析法、RT-PCR法、Western Blotting法观察IL-17基因沉默后效果。结果 携带pGenesil-1B和A的IL-17基因沉默质粒制备成功后，免疫荧光携带pGenesil-1B转染效果明显高于pGenesil-1A,其转染率可高达56.72%;
沈笑然 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的探讨klotho基因转染对脂肪间充质干细胞（ADSCs）增殖的影响。方法将含有klotho全长基因的真核质粒转染至从脂肪组织分离的ADSCs中,采用CCK-8法测定转染后细胞增殖率,western blot法检测转染后细胞周期蛋白D1的表达变化,流式细胞术检测转染前后ADSCs的细胞周期变化。结果转染klotho基因96h后AD-SCs的细胞增殖率为170.50%;流式细胞术检测结果显示,ADSCs转染klotho基因S期和G2期细胞明显增多;west-ern ...
韩冬, 徐煌, 郑永霞, 肖燕萍
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重组腺病毒介导RECK基因在大肠癌细胞中的表达及抑制癌细胞浸润能力的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的 研究重组腺病毒介导RECK基因转染大肠癌细胞后基因的表达情况,并观察转染细胞浸润能力变化。方法 构建了RECK基因的复制缺陷型重组腺病毒载体adRECK ,以adRECK转染大肠癌癌细胞株后,用RT PCR法检测RECK基因在大肠癌中的表达。并用Boyden小室测试转染细胞的侵袭性。结果 RECK基因在转染细胞中有效的表达。被转染细胞浸润能力明显下降。结论 重组腺病毒介导RECK基因能够在大肠癌细胞中有效的表达,转染病毒的大肠癌浸润能力明显下降。
杨德君 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】探讨腺病毒介导血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后目的基因表达情况及对MSCs增殖分化的影响。【方法】构建含VEGF基因的腺病毒表达载体,利用贴壁法分离培养MSCs后,用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效果和转染率,用免疫组化、Western-Blot和ELISA方法分别检测VEGF基因转染MSCs后VEGF的表达情况。【结果】腺病毒介导的VEGF基因对于MSCs具有很高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicyties of ...
华平 +6 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2004 【目的】构建神经营养素-3(NT-3)基因转染的施万细胞。【方法】NT-3基因重组腺病毒(AdvNT-3)扩增、纯化和测定后,转染体外培养的施万细胞(SCs)。用免疫细胞化学和ELISA方法分别检测NT-3基因转染SCs的NT-3表达及培养液中NT-3的含量。【结果】实验中获得的AdvNT-3中外源基因序列与大鼠NT-3的DNA序列完全一致,与未基因转染SCs相比,NT-3基因转染SCs的NT-3阳性增强,培养液中NT-3含量增高。【结论】通过腺病毒介导可以获得NT-3过量表达的基因转染SCs。
郭家松
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2015 目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）基因转染大鼠内皮祖细胞的方法,分析转染VEGF基因对内皮祖细胞生长的影响。方法分离大鼠骨髓内皮祖细胞并诱导其分化,采取FITCUEA-I和Dil-Ac-LDL双染色法验证;采用腺病毒包装VEGF165基因,按照不同比例转染内皮祖细胞后,通过荧光显微镜观察质粒自带绿色荧光蛋白验证转染效率;以未转染及转染空载体为对照;采用MTT法验证转染VEGF165基因对内皮祖细胞增殖的影响 ...
王伟 +5 more
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放疗增强对转染pAdKDR/CD/TK自杀基因系统的SW480大肠癌细胞的杀伤作用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的研究γ射线照射对含KDR启动子双自杀基因大肠癌细胞SW480的杀伤协同作用,和自杀基因及前药的放射增敏作用。方法重组腺病毒pAdKDR-TK、pAdKDR-CD和pAdKDR-TK/CD转染SW480细胞,观察γ射线对SW480细胞基因转染率的增强作用和对前药GCV、5-FC、GCV+5-FC杀伤SW480细胞的放射增敏效应,以及前药GCV、5-FC、GCV+5-FC对γ射线杀伤SW480细胞的协同增效作用。结果转染双自杀基因的大肠癌细胞射线组比对照组转染率有明显升高 ...
刘志毅, 金虎, 翟春亮, 刘明
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的将全长外源多药耐药基因转入间充质干细胞使其外源基因得以表达。方法从胎盘组织中分离培养间充质干细胞,构建携带全长外源多药耐药基因的逆转录病毒,将此逆转录病毒转染间充质干细胞,绿色荧光显微镜检测外源基因的表达,western blot检测MDR1基因表达产物。结果绿色荧光显微镜可观测到转染后间充质干细胞有绿色荧光蛋白的表达,western blot检测到全长多药耐药基因编码的p-糖蛋白的表达。结论mdr1逆转录病毒载体可有效转染人胎盘源MSC,转染的外源基因可充分表达。
王博蔚 +3 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】提高阳离子脂质体介导的肺癌细胞基因转染效率。【方法】采用表达E .coli β -半乳糖苷酶的pCMVβ 报 告基因质粒及组化染色评价阳离子脂质体的转染效率。优化脂质体介导肺癌细胞基因转染效率的条件包括:脂质体∶DNA 电 荷比率, DNA 转染剂量, 阳离子脂质体的类型。【结果】当阳离子脂质体∶DNA 电荷比率(+/ -)为3∶1 时, pCMVβ 的剂量为 4 μg/ 孔(24 孔板)时, 阳离子脂质体DOSPER 介导肺癌细胞株SPC-A-1 转染效率最高, 达(11.9 ±0.9)%
李 芳, 区敬华, 童大跃
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的观察单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-TK）丙氧鸟苷（GCV）自杀基因系统联合IL-12基因对人宫颈癌hela细胞系体外杀伤作用。方法采用脂质体转染法将HSV-TK及IL-12联合基因转染hela细胞,并将其用于体外实验,观察GCV对转染联合基因的Hela的杀伤作用及旁观者效应等。结果加入GCV后体外培养联合基因转染的Hela细胞,24 h后细胞明显发生形态上改变,正常对照组细胞生长旺盛;随着GCV剂量的加大,转染联合基因的Hela细胞的存活率呈逐渐下降的趋势 ...
李楷滨, 王立岩, 盛敏佳
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