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重组腺病毒介导RECK基因在大肠癌细胞中的表达及抑制癌细胞浸润能力的实验研究
目的 研究重组腺病毒介导RECK基因转染大肠癌细胞后基因的表达情况,并观察转染细胞浸润能力变化。方法 构建了RECK基因的复制缺陷型重组腺病毒载体adRECK ,以adRECK转染大肠癌癌细胞株后,用RT PCR法检测RECK基因在大肠癌中的表达。并用Boyden小室测试转染细胞的侵袭性。结果 RECK基因在转染细胞中有效的表达。被转染细胞浸润能力明显下降。结论 重组腺病毒介导RECK基因能够在大肠癌细胞中有效的表达,转染病毒的大肠癌浸润能力明显下降。
杨德君 +4 more
doaj
Background – Autosomal recessive ichthyosis leads to structural or biochemical changes that impair skin barrier function. Hypothesis/Objectives – To assess (1) the phenotype and genotype in a litter of Jack Russell Terriers with autosomal recessive congenital ichthyosis (ARCI), and (2) the defective skin barrier and determine if a topical ceramide can ...
Elizabeth Mauldin +7 more
wiley +1 more source
Gelatin-siloxane nanoparticles decorated with functional biomolecules as non-viral vectors for in vitro trial on gene expression level [PDF]
明胶-硅氧烷纳米粒子(GSNPs)是本课题组之前开发的一种有机-无机杂化纳米粒子。它具有很好的生物相容性以及DNA的包裹和释放能力。先前的研究表明穿膜多肽Tat修饰GSNPs可以提高其进入细胞的效率,因此本文旨在通过其它功能性的生物分子修饰GSNPs从而赋予其在基因及其它治疗性小分子递送方面的多功能作用。具体研究内容包括: (1)将膜融合肽八聚精氨酸(R8)和流感病毒血凝素蛋白亚基HA2修饰到GSNPs表面以提高纳米粒子逃逸溶酶体的效率,从而最终提高其基因转染的效率。通过流式细胞仪比较了R8-GS ...
印佩
core
【目的】构建神经营养素-3(NT-3)基因转染的施万细胞。【方法】NT-3基因重组腺病毒(AdvNT-3)扩增、纯化和测定后,转染体外培养的施万细胞(SCs)。用免疫细胞化学和ELISA方法分别检测NT-3基因转染SCs的NT-3表达及培养液中NT-3的含量。【结果】实验中获得的AdvNT-3中外源基因序列与大鼠NT-3的DNA序列完全一致,与未基因转染SCs相比,NT-3基因转染SCs的NT-3阳性增强,培养液中NT-3含量增高。【结论】通过腺病毒介导可以获得NT-3过量表达的基因转染SCs。
郭家松
doaj
Research on preparation and gene transfection of iron oxide nanoparticles multiple modified gelatin-siloxane nanoparticles [PDF]
脑胶质瘤是神经外科中最常见的颅内肿瘤,发病率约占中枢神经系统肿瘤的40%,成人神经恶性肿瘤的78%[1]。近30年来,虽然神经影像学及胶质瘤的治疗都取得了很大进展,但恶性胶质瘤的预后仍然悲观。成人中恶性胶质瘤的1年及5年生存率分别约为30%和13%,其中GBM的中位生存时间仅12月左右[2]。而肿瘤的发生从根本上讲是基因的病变,目前基因治疗从理论到实践为彻底地攻克肿瘤,改善患者预后带来了极大的希望。但仍然有很多环节亟待研究和早日攻破,其中由于缺乏高效稳定的载体系统,加之中枢神经系统血脑屏障结构的特殊性 ...
万希晨
core
目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因转染大鼠内皮祖细胞的方法,分析转染VEGF基因对内皮祖细胞生长的影响。方法分离大鼠骨髓内皮祖细胞并诱导其分化,采取FITCUEA-I和Dil-Ac-LDL双染色法验证;采用腺病毒包装VEGF165基因,按照不同比例转染内皮祖细胞后,通过荧光显微镜观察质粒自带绿色荧光蛋白验证转染效率;以未转染及转染空载体为对照;采用MTT法验证转染VEGF165基因对内皮祖细胞增殖的影响 ...
王伟 +5 more
doaj
Cellular traffic and in vitro transfection of functional peptides decorated gelatin–siloxane nanoparticles as non-viral vectors [PDF]
基因治疗能够从基因组水平治愈人类疾病。非病毒载体相对病毒载体具有较好的生物相容性,但其基因递送和转染效率都较低。本课题组合成的明胶-硅氧烷纳米粒子是一种新颖的有机-无机纳米杂化材料,具有较好的DNA包封和释放性能。但是有关基于明胶-硅氧烷的纳米粒子作为非病毒基因载体的潜能还缺乏深入系统的研究。本文针对基因治疗中的主要屏障,就基于明胶-硅氧烷的纳米粒子作为理想非病毒载体的可行性,开展了一系列的研究,主要包括: (1)通过MTT实验对明胶-硅氧烷纳米粒子(GSNPs)和Tat修饰的明胶-硅氧烷纳米粒子 ...
王祖勇
core
目的将全长外源多药耐药基因转入间充质干细胞使其外源基因得以表达。方法从胎盘组织中分离培养间充质干细胞,构建携带全长外源多药耐药基因的逆转录病毒,将此逆转录病毒转染间充质干细胞,绿色荧光显微镜检测外源基因的表达,western blot检测MDR1基因表达产物。结果绿色荧光显微镜可观测到转染后间充质干细胞有绿色荧光蛋白的表达,western blot检测到全长多药耐药基因编码的p-糖蛋白的表达。结论mdr1逆转录病毒载体可有效转染人胎盘源MSC,转染的外源基因可充分表达。
王博蔚 +3 more
doaj
The primary study of Hepatitis B virus core protein virus-like particle used as gene transfer [PDF]
基因治疗越来越成为一种治疗人类遗传病和癌症的一种手段,乙肝病毒核心蛋白病毒样颗粒具有规则的正二十面体结构,为基因治疗提供了新的载体选择。 本论文工作主要分为三个方面: 1、在构建好的乙肝病毒核心蛋白的大肠杆菌表达载体基础上,优化纯化步骤,探讨乙肝病毒核心蛋白病毒样颗粒(HBcVLPs)在体外条件下的解聚和重组条件,选定重组液的最佳配方,并考察解聚重组对HBcVLPs的形貌、抗原性等影响。 2、通过琼脂糖电泳等方法考察两种HBc-183和HBc ...
周军
core
放疗增强对转染pAdKDR/CD/TK自杀基因系统的SW480大肠癌细胞的杀伤作用
目的研究γ射线照射对含KDR启动子双自杀基因大肠癌细胞SW480的杀伤协同作用,和自杀基因及前药的放射增敏作用。方法重组腺病毒pAdKDR-TK、pAdKDR-CD和pAdKDR-TK/CD转染SW480细胞,观察γ射线对SW480细胞基因转染率的增强作用和对前药GCV、5-FC、GCV+5-FC杀伤SW480细胞的放射增敏效应,以及前药GCV、5-FC、GCV+5-FC对γ射线杀伤SW480细胞的协同增效作用。结果转染双自杀基因的大肠癌细胞射线组比对照组转染率有明显升高 ...
刘志毅, 金虎, 翟春亮, 刘明
doaj

