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目的: 研究小鼠 B7 基因转染对小鼠肝癌细胞 Hepal-6 细胞株细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。方法: 用逆转录病毒载体,将 小鼠B7 基因导入小鼠肝癌细胞 Hepal-6 细胞株中,经G418 筛选,获得高表达 B7分子的阳性细胞克隆,采用CTLA-4Ig 的间接免疫荧光法检测 B7 分子的表达情况,并观察了B7 基因转染对细胞形态、生长速度及致瘤性的影响。结果:①亲本小鼠肝癌细胞株 Hepal-6 不表达 B7 分子,转 染 B7 基因的 Hepal-6 细胞高表达 B7 分子;②转染 B7
doaj
K7M2细胞转染Runx2基因后对MC3T3细胞RANKL基因表达的影响
目的探讨转染Runx2基因后对RANKL及相关细胞因子的影响。方法将鼠骨肉瘤K7M2细胞分成3组,K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组,应用Westernblot方法检测转染是否成功,选择转染成功的细胞连同K7M2组,K7M2-neo组细胞,应用ELISA方法检测培养上清液中的IL-1α,IL-6,IL-11和PGE2的含量变化,并应用RT-PCR的方法检测应用K7M2组,K7M2-neo组和K7M2-Runx2组以及在K7M2-Runx2组细胞中加入IL ...
吴丹凯 +6 more
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hTERT启动子调控的TRAIL基因对乳腺癌细胞株的杀伤作用
目的探讨hTERT、CMV启动子调控下TRAIL基因对乳腺癌细胞的生长抑制作用。方法脂质体法将pACCMV-EGFP-TRAIL、pAChTRET-EGFP-TRAIL转染至乳腺癌细胞MDA-MB-435,MTT法检测转染前后乳腺癌细胞的增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果pACCMV-EGFP-TRAIL转染组和pAChTRET-EGFP-TRAIL转染组OD490值明显低于空白对照组和空质粒转染组,流式细胞术检测细胞凋亡率也明显增高,并且pAChTRET-EGFP ...
刁建东, 卢振霞, 毕黎琦
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pAdKDR/CD/TK双自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用的试验研究
目的探讨含KDR启动子的双自杀基因CD/TK对肝癌HepG2细胞的杀伤作用。方法观察不同前药对HepG2细胞、血管内皮细胞ECV304和LST174细胞的杀伤作用,评估KDR启动子的靶向杀伤作用。观察不同前药对转染不同自杀基因的HepG2细胞的杀伤作用,及旁观者效应。结果转染腺病毒的HepG2细胞及血管内皮ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,而感染腺病毒的LST174细胞对前药不敏感 ...
谷洋 +4 more
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目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTTP)70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)和中国旱獭α干扰素基因(cwIFNA5)分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
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目的: 构建 p53 表达质粒, 研究 p53基因对白血病细胞 K562 细胞生长的抑制作用。方法: 以 T4 连接酶把 2 160 bp 的 p53 cDNA 片段插入 pRc/CMV 质粒, 重组构建 pRc/p53 表达质粒,以 Lipofectin 介导pRc/p53 质粒转染K562 细胞,以甲 基纤维素半固体培养方法作 K562 细胞体外克隆培养, 观察转染 p53 基因后 K562 细胞克隆形成改变。结果: p53 cDNA 质粒 转染的 K562 细胞, 体外培养克隆形成能力明显减低 ...
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抑制葡萄糖调节蛋白78基因表达逆转卵巢癌顺铂耐药作用的实验研究
目的探讨以葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因为靶向的RNA干扰(RNAi)抑制GRP78基因的表达,对人卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP的影响。方法以GRP78基因为靶向的pSilencerTM3.0-H1-GRP78 siRNA重组质粒的构建,脂质法转染至细胞中;RT-PCR及Western blot方法检测GRP78 mRNA及蛋白表达;Western blot方法检测CHOP蛋白表达;MTT法检测不同浓度顺铂作用下细胞存活率,计算IC50及耐药指数。结果 RT-PCR及Western ...
范丽梅 +4 more
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目的探讨盐诱导基因(Salt Inducible Kinase 2,SIK2)对3T3-L1成熟脂肪细胞生脂的影响及其机制。方法利用小鼠SIK2重组腺病毒表达载体,转染3T3-L1成熟脂肪细胞,采用油红O染色提取法和RT-PCR,测定脂肪细胞生脂及其关键酶和转录因子固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)mRNA水平的变化。结果与未转染组和空载体转染组相比,SIK2转染组油红O染色提取的脂滴含量降低56 ...
杜静 +5 more
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Snail基因慢病毒载体的构建及其促进结肠癌细胞上皮间质化的研究
【目的】 构建Snail基因慢病毒载体,研究Snail基因的表达与结肠癌细胞上皮间质化的关系。【方法】 利用Gateway Technology法构建Snail基因表达质粒和空白对照质粒,行慢病毒包装,成功构建Snail基因慢病毒载体后,在结肠癌细胞系caco2中转染Snail基因质粒及空白载体对照,构建稳转细胞株caco2- Snail和caco2-vc,并在LoVo细胞中瞬时转染上述质粒,对Snail及E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达进行检测,并用划痕 ...
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[miR-488-5p promotes osteogenic and neurogenic differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells and enhances neuralized bone regeneration]. [PDF]
Zeng L +5 more
europepmc +1 more source

