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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的研究RNA干扰（RNAi）对BEL7402细胞的N-ras基因表达的干扰效应。方法建立装载靶向N-ras基因小干扰性RNA（siRNA）的表达载体;用脂质体法将此表达载体转染BEL7402细胞株,以转染空载细胞作为对照;采用RT-PCR和Western blot检测N-ras基因的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果转染siRNA的表达载体可以抑制内源N-ras基因在转录和转译上的表达。N-ras基因的表达抑制与BEL7402细胞的凋亡相关联。结论转染siR ...
赵岳 +4 more
doaj
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1999 目的: 使用多聚阳离子脂质体载体( lipofectAMINE)在体外建立转γ -干扰素( IFN-γ )基因的大鼠肝细胞模型。方 法: 利用 lipofectAMINE 在体外将 IFN-γ基因转染大鼠肝细胞。分别以 RT-PCR 和 ELISA 方法检测所转IFN-γ基因在大鼠肝细胞 的转录和表达情况。结果: 以 lipofectAMINE 为载体的 IFN-γ基因转染大鼠肝细胞后, 可被有效的转录并产生具有生物活性的 IFN-γ。结论: IFN-γ基因可被成功转染入大鼠肝细胞并可有效表达 ...
王 坤 郭 英 闵 军 陈积圣
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Optimization of gene transfection conditon in eukaryotic cells [PDF]
, 2010 将外源基因导入真核细胞的方法有很多，但是很多转染方法的具体细节以及适宜的条件和使用的细胞仍然没有完全研究清楚。本文主要针对于实验室常使用的几种转染方法：PEI转染、磷酸钙共沉淀转染和电穿孔转染，以期找出其各自适合的使用条件和细胞。 PEI转染和磷酸钙共沉淀转染都是通过转染试剂与DNA静电结合，随后吸附到细胞膜上通过内吞作用进入细胞的。静电结合是通过正负电荷的相互吸引而产生的，所以复合物的形成可能和缓冲液中的正负离子的含量有关。本论文通过研究pH值与PEI、磷酸钙与DNA形成的颗粒的大小的关系 ...
洪蒙
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Regulation of Cell Cycle of Glioma C6 Cells by Regulator of G Protein Signaling 16 [PDF]
, 2002 目的 探讨G蛋白调节子 16(RGS16)对胶质瘤C6细胞周期的影响。方法 利用脂质体介导法将RGS16基因导入C6细胞中 ,在倒置显微镜下观察细胞形态变化和贴壁生长情况 ;免疫细胞化学法检测转染前后RGS16蛋白的表达情况 ;流式细胞仪检测转染pCMV 5 RGS16和 pCMV 5质粒后每隔 12h后的细胞周期变化。 结果 转染pCMV 5 RGS16质粒 2 4h后 3 0 .0 %细胞贴壁性降低 ,突起收缩 ,细胞变圆 ,72h之后细胞又恢复正常 ;RGS16蛋白的表达呈时相性 ,3 ...
叶菁(第四军医大学西京医院病理科) +6 more
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SARA低表达对Activin A/Smads环路活性的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的探讨下调Smad锚捉蛋白(SARA)表达对Activin A/Smads环路活性的影响。方法利用RNA干扰技术,设计靶向大鼠SARA基因的短发卡RNA(shRNA),瞬时转染激活素A(ActA)高表达的大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞。转染48h后倒置荧光显微镜观察转染效率,实时定量PCR、Western blot检测SARA基因的表达情况。对阳性转染组及阴性转染组细胞换液3h后,Western blot检测Smad3总蛋白及磷酸化蛋白的表达。结果靶向SARA基因的SARA-shRNA及对照NC ...
石晓花 +8 more
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C-Myc／Fas基因转染对人颊癌细胞移植瘤的影响 [PDF]
, 2006 【目的】探讨C-Myc／Fas基因BcaCD885细胞裸鼠移植瘤内转染的抑瘤效果，了解分子机制。【方法】构建人颊癌BcaCD885细胞裸鼠移植瘤模型，实验动物分3组，每组16只。分别瘤内注射脂质体、脂质体，pBK-fas、以及脂质体／pBK-Fas／pcDNA3-C-Myc共聚物，观测移植瘤增殖，绘制生长曲线。转染72h后每组处死6只动物，RT-PCR检测移植瘤细胞FasmRNA表达。流式细胞术（Flowcytometry，FCM）检测Fas蛋白表达和移植瘤细胞凋亡、增殖水平。【结果】Fas转染、C ...
侯劲松 +4 more
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抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1和PPARγ mRNA表达的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的观察抵抗素基因转染HepG2细胞对转录因子Sp1（Transcription Sp1,）和过氧化物酶体增殖体激活受体（Peroxisome Proliferator-Activated Receptorγ,PPARγ）mRNA表达的影响。方法把pc DNA3.1抵抗素基因真核表达载体转染入HepG2肝细胞,用RT-PCR方法进行Sp1和PPARγ)mRNA表达的检测。结果抵抗素基因转染HepG2细胞后,Sp1的表达明显增强,P0.05。结论抵抗素基因转染HepG2细胞后,可明显增强Sp1的表达 ...
金正贤, 赵虹, 杜珍武, 张桂珍
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Effects of transfection with acidic fibroblast growth factor by electroporation on skeletal muscle satellite cells [PDF]
, 2015 背景:课题组早期研究表明体外一定剂量酸性成纤维细胞生长因子对骨骼肌卫星细胞增殖有促进作用。目的:进一步验证电穿孔转染酸性成纤维细胞生长因子基因对骨骼肌卫星细胞生长、增殖及分化的影响。方法:原代培养、纯化骨骼肌卫星细胞,将带有酸性成纤维细胞生长因子基因的质粒P SECTAg-gfP-A fgf通过电转染的方法转染大鼠骨骼肌卫星细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况并计算转染率,以流式细胞仪分析转染后细胞周期,绘制细胞生长曲线,观察转染后肌管形成情况,WESTErn ...
刘启云 +5 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】构建携带加强型黄色荧光素蛋白(EYFP)和人类血管内皮生长因子(VEGF)的双基因真核表达载体 pIRES-EYFP/ VEGF121 , 用EYFP 作标记基因, 研究外源性VEGF121 基因在大鼠原代培养肝细胞转染表达, 为实时监测 VEGF121基因修饰肝细胞移植后状态提供基础。【方法】将pcDNA3VEGF121中VEGF121定向克隆到pIRES-EYFP , 构建重组质 粒pIRES-EYFP/ VEGF121 , 经酶切、PCR 扩增和部分DNA 序列分析证实后 ...
王金林 +3 more
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Research on preparation of silica based vectors and transfection in vivo [PDF]
, 2009 本文旨在以硅氧烷纳米材料作为基础，引入阳离子聚合物，制备有机-无机杂化纳米基因载体。本文工作主要分为以下三个方面：1.以羧甲基壳聚糖、有机硅烷（GPSM）作为反应物，以氨水作为反应介质，在水相中制得羧甲基壳聚糖-硅氧烷（CMG）纳米颗粒。采用电子透射显微镜及粒径仪对CMG纳米颗粒的形貌、尺寸和表面电位进行表征。通过红外光谱、热失重分析等方法，对CMG纳米颗粒的结构进行了分析，并探讨了该基因载体的合成机制。为了提高该载体的功能性及结合DNA的能力 ...
张亚菲
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