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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的构建人PTEN绿色荧光蛋白真核表达载体并进行鉴定。方法参照PTEN基因全序列,在cDNA两端各设计一条对应引物,并引入各自的酶切位点。从正常人胎盘组织中提取mRNA作为模板合成第一链,并扩增目的基因序列片段,经双酶切后定向克隆至绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1中,筛选阳性重组质粒,分别经双酶切、测序法对重组质粒进行鉴定。结果双酶切和特异PCR结果表明克隆的基因片段约1.2 kb;测序法进一步证实该基因为PTEN编码基因,经NCBIBLAST分析与Gene Bank中基因序列完全相同 ...
武鸿斌 +4 more
doaj
, 2010 本发明公开了肾上腺素受体激动剂诱导胚胎型珠蛋白的表达及其用途,涉及化合物在医学领域的应用,尤其涉及肾上腺素受体激动剂在治疗贫血病中的应用。本发明将肾上腺素受体激动剂用于诱导胚胎型珠蛋白的表达,因而这些物质可用于治疗β-珠蛋白自身缺陷或表达水平发生缺陷的遗传疾病,如对β型地中海贫血病或镰刀型细胞贫血病的患者进行其胚胎型珠蛋白的诱导 ...
尹乃达, 殷战, 梅芸, 贺江燕
core
四川大学学报. 自然科学版, 2005 构建增强型绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)基因的真核表达载体pCDNA3.1(+) EGFP,转染至培养的Hela细胞中成功表达,并发出绿色荧光,证明EGFP一种良好的报告基因和筛选标记.
徐洁杰 +3 more
doaj
四川大学学报. 自然科学版, 2010 利用RT-PCR方法从7721细胞系中分离野生型SAFB1基因,将该基因分别克隆入PET28a和pcDNA3.1载体来构建原核表达及真核表达载体.重组质粒经IPTG诱导表达后亲和层析纯化,用Western印迹实验验证蛋白表达的正确性.将SAFB1基因转入MCF7中,以RT-PCR的方法检测蛋白的表达,检测其对XOR基因的调控作用及做生长曲线验证其对乳腺癌细胞抑制作用.结果证实了SAFB1对乳腺癌细胞生长抑制作用非常明显,且对XOR基因的表达有一定的抑制作用.
季雯娟 +5 more
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue目的 构建带有FLAG标签的BPIFC基因真核表达载体，建立稳定转染BPIFC基因的HaCaT细胞系。方法 设计引物通过PCR扩增出BPIFC基因片段，利用DNA重组技术将该基因片段定向插入pcDNA3.1-flag-N真核表达载体中，并对重组质粒进行双酶切及DNA测序鉴定。验证正确的重组质粒通过PI Max线性转染的方法转染至HaCaT细胞，通过G418筛选建立BPIFC稳定转染的HaCaT细胞系，并通过RT-PCR法和Western-blot法分别测定BPIFC mRNA和蛋白的表达量。结果 ...
陆娇娇 +5 more
doaj
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 本系列研究筛选了弓形虫（Toxoplasma）速殖子表膜主要抗原（SAG1或P30）及分泌排泄抗原棒状体蛋白基因（ROPl），并将二者拼接构建复合基因（sAG1／ROP1），对其进行扩增、克隆、表达，制备真核表达质粒，接种小鼠，研究其免疫保护效应，为弓形虫核酸疫苗的研制提供有积极意义的科学根据。
陈观今 +4 more
doaj
[Effects of glutathione on acute cutaneous photodamage in mice and its mechanism]. [PDF]
Zhonghua Shao Shang Yu Chuang Mian Xiu Fu Za ZhiWang Q +5 more
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鸭肝炎病毒鸡胚化弱毒MY株VP1基因克隆、原核表达及抗原性分析
, 2010 应用巢氏PCR(nested-PCR)扩增出1型鸭肝炎病毒鸡胚化弱毒MY株结构蛋白VP1基因片段,将VP1克隆到pMD18-T载体上,测序结果为714 bp,GenBank登录号:GU363950。对MY株VP1基因编码蛋白的主要抗原位点进行预测,aa208-aa222氨基酸区段表现很高的亲水性、抗原指数和表面可及性。VP1经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆至pET32a(+)原核表达载体,获得重组质粒pET-VP1,转入BL21 PLyss(DE3)细胞中,IPTG诱导后SDS-PAGE检测结果表明 ...
刘群 +5 more
core
[Association between umbilical cord blood proteome and early infant neurodevelopmental risk]. [PDF]
Beijing Da Xue Xue Bao Yi Xue BanMo J, Wang H, Liu J, Li Q, Su T, Ji Y.
europepmc +1 more source
[Role of Gut Mycobiome in Lung Cancer Immunotherapy: Mechanisms, Challenges and Translational Prospects]. [PDF]
Zhongguo Fei Ai Za ZhiWang X +5 more
europepmc +1 more source