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construction of DDEFL1 shRNA recombined adenoviruses and preliminary investigation on the biology of DDEFL1 [PDF]
, 2009 DDEFL1又名UPLC1、ACAP4、ASAP3，是ARF-GAP家族的一个新发现 的成员。与该家族的大部分成员一样，该蛋白具有BAR、PH、GAP和ANK等 多个结构域，可能在细胞内囊泡运输、细胞骨架组装、细胞生长、细胞迁移等方 面发挥着重要的作用，并有可能为低营养以及低氧分压下的细胞生长提供有利 条件。研究表明，DDEFL1在一些人肝细胞癌中超量表达，而且利用反义S-寡聚 核苷酸抑制DDEFL1的表达可显著抑制SNU423肝肿瘤细胞的生长。在宫颈癌 HeLa细胞和乳腺癌MDA-MB-231细胞中 ...
孔芳
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重组腺病毒介导RECK基因在大肠癌细胞中的表达及抑制癌细胞浸润能力的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的 研究重组腺病毒介导RECK基因转染大肠癌细胞后基因的表达情况,并观察转染细胞浸润能力变化。方法 构建了RECK基因的复制缺陷型重组腺病毒载体adRECK ,以adRECK转染大肠癌癌细胞株后,用RT PCR法检测RECK基因在大肠癌中的表达。并用Boyden小室测试转染细胞的侵袭性。结果 RECK基因在转染细胞中有效的表达。被转染细胞浸润能力明显下降。结论 重组腺病毒介导RECK基因能够在大肠癌细胞中有效的表达,转染病毒的大肠癌浸润能力明显下降。
杨德君 +4 more
doaj
Optimization of gene transfection conditon in eukaryotic cells [PDF]
, 2010 将外源基因导入真核细胞的方法有很多，但是很多转染方法的具体细节以及适宜的条件和使用的细胞仍然没有完全研究清楚。本文主要针对于实验室常使用的几种转染方法：PEI转染、磷酸钙共沉淀转染和电穿孔转染，以期找出其各自适合的使用条件和细胞。 PEI转染和磷酸钙共沉淀转染都是通过转染试剂与DNA静电结合，随后吸附到细胞膜上通过内吞作用进入细胞的。静电结合是通过正负电荷的相互吸引而产生的，所以复合物的形成可能和缓冲液中的正负离子的含量有关。本论文通过研究pH值与PEI、磷酸钙与DNA形成的颗粒的大小的关系 ...
洪蒙
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Preparation and Characterization of Gelatin-Siloxane Nanoparticles as Gene Delivery System [PDF]
, 2008 基因治疗的主要目的是研制安全有效的基因转染载体。在基因转染载体中，非病毒载体以其低毒性、低免疫原性、低致瘤性及易于制备等优点具有良好的应用前景。本文以新型有机-无机杂化材料——明胶-硅氧烷纳米颗粒作为基础，探讨了此种材料的合成机制，将其应用于基因治疗，并以活性多肽修饰表面增强功能性。取得的主要成果有：1.以明胶、GPSM和氨水作为反应物，或以明胶、GPSM和APTMS作为反应物，通过溶胶-凝胶法，制得两种阳离子明胶-硅氧烷颗粒。探讨了两种纳米颗粒的合成机制，探索了一种全新材料的合成和表征方法。2 ...
赵阳
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重组腺病毒载体Ad-LMP-1的构建及其转染 MSC后成骨活性
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2010 【目的】 快速构建大鼠LIM矿化蛋白-1基因重组腺病毒载体,转染MSC,探讨LMP-1基因对MSC成骨分化和成骨活性的影响65377; 【方法】 从大鼠成骨细胞内提取总RNA,并设计LMP-1特异性引物进行RT-PCR,获取LMP-1基因后利用Invitrogen公司的TOPO定向克隆技术创建入门克隆pENTR/D-LMP-165377;转化TOP10细菌后,挑取阳性克隆摇菌提取质粒,入门克隆再与表达载体pAD/CMV/V5-DEST进行同源重组反应得到病毒载体pAD/CMV/V5-LMP-1 ...
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的构建携带人肝癌细胞CDK2基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体;方法设计能表达CDK2特异性的小干扰RNA(siRNA),构建pAKD-shRNA-CDK2重组质粒,采用磷酸钙共转染法将重组质粒pAKD-shRNACDK2、包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共转染AAV-293细胞,采用定量PCR方法对病毒进行滴度测定;结果三质粒共转染AAV-293细胞48h后,荧光显微镜下检测到GFP绿色荧光,表明共转染成功,测定病毒平均滴度为3.56×1012v.g/ml ...
于水澜, 姜颖, 于英君, 宋高臣
doaj
Study on Introducing FMDV Epitopes Fused Gene into Carrot mediated by Agrobacterium [PDF]
, 2005 摘要口蹄疫是由口蹄疫病毒（Foot-and-mouthdiseasevirus,FMDV）引起的一种世界性的急性的家畜传染病。其特点是传播途径广、传染性很强、死亡率较高。利用转基因植物生产疫苗是目前植物基因工程的一个研究热点，具有生产简单、成本较低、使用安全方便、易贮存等优点。胡萝卜在我国种植广，营养丰富，可以生吃，是一种理想的研究转基因植物疫苗的载体植物。本实验通过农杆菌的介导，以携带O型和A型口蹄疫抗原决定簇融合基因O21-O14-A21-HBcAg的植物表达载体转化胡萝卜愈伤组织 ...
李文建
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Progress of Research on Diganosis and Treatment of Malignant Pleural Effusion [PDF]
Malignant pleural effusion (MPE) is one of the most common complications of advanced malignant diseases. The patients with MPE have a short survival time and poor prognosis.
Lifeng WANG, Ye LIU
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抑制miRNA-291b-3p表达对H9C2细胞胰岛素信号通路活性的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2016 目的本文探讨抑制miRNA-291b-3p表达在大鼠心肌细胞胰岛素抵抗中的作用,并分析其可能的作用机制。方法 1构建miR-291b-3p mimics和inhibitor腺病毒载体,感染H9C2细胞48h,分析miR-291b-3p水平、AKT/GSK信号通路活性和糖原水平的变化。2TNF-α刺激心肌细胞24h后,再用miR-291b-3p inhibitor腺病毒载体感染H9C2细胞24h,检测AKT/GSK信号通路活性和细胞糖原水平,验证TNF-α通过影响miR-291b ...
李雪杰 +6 more
doaj
Cloning and Functional Study on a new secrete isoform of EphrinA4(EA4D) [PDF]
, 2010 Eph受体是酪氨酸激酶受体家族中最大的一组，Eph及其配体ephrin构成一个非常庞大的信号转导分子系统，调节包括细胞与细胞间相互作用，细胞迁移等多种细胞活动。这个家族已经鉴定主要功能作用，是其在神经系统发育过程中在脑的布线（brainwiring）和神经轴突的生长导向(axonalguidance)方面的作用。因此，它们也是神经导向分子（Neuralguidancemolecules）的一个重要家族。现有研究表明，神经导向分子也在生血管新生和肿瘤发展过程中发挥重要的作用。虽然Eph受体 ...
王恒
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