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Evaluation of filaggrin 2 expression in dogs with atopic dermatitis before and after oclacitinib maleate administration

open access: yesVeterinary Dermatology, Volume 36, Issue 4, Page 453-461, August 2025.
Background – Canine atopic dermatitis (cAD) is a chronic, inflammatory, multifactorial and pruritic disease. The presence of skin barrier impairment (e.g. filaggrin alterations), along with abnormal immune responses, can negatively impact cutaneous barrier function.
Wendie Roldan Villalobos   +5 more
wiley   +1 more source

人β防御素-2基因的克隆及原核表达载体的构建

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的构建人β-防御素2的融合性原核表达载体,为今后基因工程手段表达纯化及生产人β-防御素-2奠定基础。方法体外基因合成人β-防御素2(HBD-2)的基因片段,并克隆入pMD18T中间载体中,经酶切鉴定后再克隆入pET32a原核表达载体中,与载体中所固有的TrX-A形成融合基因。结果构建的融合性原核表达载体经酶切鉴定无突变发生。结论成功地构建了pET-32a-(HBD-2)。
魏洪涛, 董震, 张国利
doaj  

Examining the structure of plant–lemur interactions in the face of imperfect knowledge

open access: yesConservation Biology, Volume 39, Issue 1, February 2025.
Abstract Biotic interactions, such as plant–animal seed dispersal mutualisms, are essential for ecosystem function. Such interactions are threatened by the possible extinction of the animal partners. Using a data set that includes plant–lemur interactions across Madagascar, we studied the current state of knowledge of these interactions and their ...
Jadelys Tonos   +6 more
wiley   +1 more source

高效表达型T克隆载体的构建及其特性

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的研制高效表达型T载体用于基因的表达及蛋白功能分析。方法限制性内切酶EcoR V酶切真核表达载体pcDNA3,回收线性化质粒片段与三磷酸胸腺嘧啶脱氧核苷酸(dTTP)70℃退火,构成T克隆载体并回收纯化。将增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)和中国旱獭α干扰素基因(cwIFNA5)分别扩增后直接克隆到新构建的表达型T载体,转化感受态细菌,挑选阳性菌并制备质粒瞬时转染真核细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达,病毒保护试验检测中国旱獭α干扰素的生物学活性。结果成功构建了表达型T载体 ...
卢银平, 祝建芳, 刘朝, 董继华
doaj  

花药特异表达基因TaRAFTIN1a启动子的克隆及表达载体构建

open access: yes, 2015
组织特异性启动子是植物基因工程改良的重要工具。RAFTIN是禾本科植物花药绒毡层中特异积累与花药发育相关的蛋白,其调控序列可能提供一个很好来源的花药特异性表达启动子。为了解小麦TaRAFTIN1a基因启动子的花药表达特异性,本研究分离了TaRAFTIN1a基因的启动子,生物信息学分析表明,该启动子含有3种花药特异表达元件(总计10个),1个ABRE脱落酸响应元件,TGACG-motif与CGTCA-motif茉莉酸甲酯响应元件各1个,8个ARR1AT细胞分裂素响应元件 ...
陈静, 余懋群, 徐登安, 赵纯钦
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烟草花叶病毒siRNA设计及其植物表达载体构建(英文)

open access: yes, 2006
RNA干扰技术已广泛应用于沉默基因表达的研究.本文分析烟草花叶病毒(TMV)基因序列,选择设计编码小分子发卡结构RNA(hpRNA)的cDNA;并根据农杆菌双元载体质粒p2355多克隆位点区限制性酶切位点,两端分别加入XbaI和BamHI酶切位点;分别合成单链DNA复性后插入到p2355上,经PCR、测序验证,表明已成功构建了具有潜在表达烟草花叶病毒siRNA的植物表达载体 ...
刘华玲, 张义正, 谈心, 马欣荣
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pcDNA-GPC3真核表达载体的构建及鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的构建人类GPC3重组真核表达载体。方法以人类肝脏cDNA文库为模板扩增出GPC3基因序列,应用T克隆载体及pcDNA真核表达载体重构,将质粒转化进入HLE人肝癌细胞系,进行荧光免疫方法检测。结果 测序结果序列正确,荧光染色转染质粒的HLE细胞可见细胞浆和细胞膜上有GPC3的表达。结论成功构建真核表达载体pcDNA-GPC3,并在真核细胞中可以表达。
李莉   +4 more
doaj  

一种高效、稳定的分泌型原核表达载体的构建及应用 [PDF]

open access: yes, 2003
以本室构建的原核表达载体pTO-T7为基础载体,PCR合成ompT引导序列,插入该载体多克隆位点上游,构建了分泌型原核表达载体pTO-OT。将2个外源基因克隆至pTO-OT,2个重组质粒在大肠杆菌中均得以高效表达,表达量为25%-30%。Western印迹分析证实了重组蛋白在大肠杆菌中表达后可被信号肽酶有效识别,切割后的重组蛋白具有良好的免疫学活性。对重组表达菌株的连续传代实验证实了该表达载体具有良好的遗传稳定性 ...
杨海杰   +5 more
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四膜虫rDNA表达载体的改造及用于异源基因的高效表达

open access: yes, 2013
基于四膜虫小核rDNA改造得到的pD5H8载体,在转染进接合生殖时期的四膜虫后能发育成9000~10000拷贝的大核rDNA,因此pD5H8载体是四膜虫异源基因表达的研究热点;但其载体上匮乏合适的克隆位点和无启动子结构阻碍了该载体的进一步发展。本研究在四膜虫启动子HSP70—2和终止子HSP70-I之间,通过稀有酶切位点I-SceI导入细菌绿色荧光蛋白NGFP)这一筛选标记,由此组成的DNA片段(HSP70-25’UTR.I-SceI—HGFP.I—SeeI—HSP70-13’UTR)整合进pD5H8 ...
冯立芳, 熊杰, 袁冬霞, 缪炜
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具双T-DNA区的大麦黄矮病毒复制酶基因RNAi植物表达载体的构建(英文)

open access: yes, 2008
RNAi系双链RNA诱导同源mRNA降解,导致特定基因表达沉默的一种现象.RNAi技术是通过基因工程防治植物病毒病的最佳途径.由大麦黄矮病毒(Barely yellow dwarf virus,简称BYDV)引起的禾谷类黄矮病发病面积和危害程度在我国呈加重趋势.BYDV-GAV是当前流行的大麦黄矮病毒株系,本文针对BYDV-GAV复制酶基因序列,构建能在细胞内转录形成发卡RNA双链结构的表达盒,并将其置于中间载体pVec8-2b的T-DNA区,pVec8-2b的另一T ...
王磊, 付体华, 陈静, 孙文瑜
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