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Differential Transcriptome Sequencing and Critical Gene Identification on Escherichia coli with Soluble Overexpression [PDF]
随着生物技术的快速发展,对快速获取重组蛋白的需求日益增加,如何获得 高效的蛋白表达系统变得越来越关键。蛋白表达系统是基因工程技术的核心,通 常指的是利用模式生物,如细菌、酵母等微生物细胞或者动植物细胞作为表达宿 主表达外源蛋白的生物学系统。其中以大肠杆菌作为宿主的大肠杆菌表达系统由 于其细胞繁殖速度快、产量高、价格便宜、表达量高、抗污染能力强、遗传背景 明确等优点而被广泛应用,同时大肠杆菌表达系统也是最早被研究并且被成熟应 用的蛋白表达系统。尽管如此,该系统在实际应用时仍然会受到各种因素的影响 ...
洪奇阳
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目的制备YWHAZ重组腺病毒及逆转录病毒,在293T细胞中验证基因表达情况。方法将YWHAZ基因分别克隆至腺病毒穿梭质粒pacAd5CMV-IRES-GFP及逆转录病毒质粒pLXSN-IRES-GFP,并用酶切鉴定、PCR及测序验证后分别转染至HEK 293T及Ampho293细胞,构建重组腺病毒及逆转录病毒。重组病毒分别感染293T细胞,观察荧光验证病毒侵染效果,RT-PCR检测YWHAZ基因表达情况。结果 PCR、酶切鉴定及测序分析,重组腺病毒及逆转录病毒构建正确 ...
王雅雯, 于宏, 王世宝, 黄映辉
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为了解林麝(Moschus berezovskii)脂肪酸合酶(Fatty acid synthase,FASN)基因mRNA序列信息及解析麝香的生物机制,通过转录组测序、Trinity拼接、反转录PCR扩增和Singer测序获取林麝FASN基因mRNA序列,并对FASN蛋白序列进化树构建、二级结构、三级结构、互作蛋白、磷酸化分析及miRNAs结合预测,筛选与麝鼠(Ondatra zibethicus)FASN相同且与牛(Bos taurus)、山羊(Capra hircus)和绵羊(Ovis ...
谌颖莲 竭 航 赵贵军 封孝兰 张承露 吴佳勇 曾德军
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The Study of Ultrastructure、ATP、Calcium and RNA-Seq in fertile and sterile anthers of Lycium Barbarum L. [PDF]
高等植物的雄性不育是杂种优势利用的基础,避免了去雄的繁杂程序。植物雄性不育的种类很多,形成原因也很复杂,对雄性不育机理的探索一直是一个热门研究领域。枸杞雄性不育系是近年来新发现的一种不育类型,具有很大应用潜力,为了明确其雄性不育发生的机制并更好地开发利用这一宝贵种质资源,我们从结构、生理和分子生物学等几个方面展开了研究。 本研究以可育系宁杞1号和不育系宁杞5号为实验材料,用超微结构、ATPase和Ca2+的细胞化学定位,以及转录组和数字基因表达谱研究了枸杞花药发育的特征并比较了不育花药形态 ...
杨淑娟
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In vitro therapeutic effects and molecular mechanisms of targeted inhibition of CDK12/13 in high-grade gliomas [PDF]
Objective·To find novel and common targeting strategies for high-grade gliomas (HGGs) from the perspective of epigenetic and transcriptional modulators, test the therapeutic effect in vitro and investigate the related molecular mechanisms.Methods ...
HAN Yujie +4 more
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【目的】构建反义c-myb 重组逆转录病毒载体并建立其包装细胞株。【方法】采用RT-PCR 方法, 获取目的基因, 通过TA 克隆方法克隆入pUC19, 再反向亚克隆入逆转录病毒载体pDOR 中。采用DOTAP 法将重组逆转录病毒载体转入包 装细胞, 以NIH3T3 细胞为靶细胞测定产病毒滴度。【结果】序列测定结果与GenBank 中序列一致。c-myb 基因片段已定向 克隆入pDOR。细胞转染表明, 已形成稳定的包装细胞株PA317/ pDOR-my b, 产病毒滴度达5.2 ×104 ~ 9 ...
马会慧 +5 more
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pSiRNA-Shh逆转录病毒载体的构建及对恶性脑胶质瘤细胞作用的离体实验研究
目的建立逆转录病毒介导的人Shh基因RNA干扰体外表达体系并观察对恶性脑胶质瘤细胞的作用。方法将人Shh基因RNA干扰双链转录DNA片段重组到逆转录病毒质粒Psilencer 5.1-H1 Retro中,构建成携带人Shh基因RNA干扰逆转录病毒载体pSiRNA-Shh,经PT67细胞包装后,产生的重组逆转录病毒感染恶性脑胶质瘤细胞株U251和CHG-5细胞,用WST-8、RT-PCR和Western Blotting分别检测对转染细胞活性、人Shh mRNA和蛋白表达的影响。结果重组pSiRNA ...
尹昌林 +5 more
doaj
Adaptive Root of Mangrove Plant Avicennia marina: Structure and Transcriptome Analyses [PDF]
红树林泛指生长在热带、亚热带地区河口或海岸潮间带的木本植物群落,是适应陆地与海洋过渡区域的一种特殊森林类型。白骨壤(Avicenniamarina)是红树林中常见的红树植物,是群落演替中的先锋物种。对于生长在滨海湿地相对低氧环境的白骨壤而言,其根系统对湿地环境有高度专业化的适应。根据白骨壤根结构生长位置和生长方向不同,将其分为四种根结构,分别为在地面下方水平生长且围绕树干延伸数米的水平根(Cableroot)、垂直于水平根向地下生长的锚定根(Anchorroot ...
郝赛琦
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Study on Tissue Culture and Mechanisms of Adventitious Branches Induction and Inorganic Carbon Acquisition in Gracilaria lichenoides [PDF]
大型海藻组织培养(seaweedtissueculture,STC)技术可以解决大型海藻栽培中的诸多问题,主要包括高品质藻种的保存、大规模育苗生产以及基因工程研究等。然而,STC还面临着很多困难,例如:愈伤组织(callus)诱导与再分化困难、且形成率低;对于很多藻种,切块培养后会快速极性再生不定芽(adventitiousbranches,ABs)而非callus;同时,这一过程会因藻种的不同而对外源植物激素的敏感性有所不同。研究表明,转录因子、MicroRNA(miRNA ...
王文磊
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Molecular Mechanism by Which Oat β-Glucan Enhances Freeze Tolerance in Yeast [PDF]
To investigate the molecular mechanism for the effect of oat β-glucan (OβG) at different concentrations (0.5% and 1%) on freeze tolerance in yeast, yeast cells alone or under the protection of OβG were frozen and thawed up to five times.
YANG Jing, JI Shengxin, CAI Jie, YANG Yong, AI Zhilu, LI Zhen
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